摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-15页 |
1 引言 | 第15-32页 |
·猪水肿病概述 | 第15-16页 |
·猪水肿病的主要毒力因子 | 第16-19页 |
·志贺毒素Ⅱ型变异体 (Stx2e) | 第16-18页 |
·F18ab (F107)菌毛 | 第18-19页 |
·猪水肿病的防治 | 第19-21页 |
·药物防治 | 第19-20页 |
·疫苗免疫 | 第20页 |
·卵黄抗体防治 | 第20-21页 |
·卵黄抗体研究概况 | 第21-25页 |
·卵黄抗体的形成 | 第21页 |
·卵黄抗体的结构 | 第21-22页 |
·卵黄抗体的特点 | 第22-23页 |
·卵黄抗体的抗菌作用机制 | 第23页 |
·卵黄抗体的应用 | 第23-25页 |
·环介导等温扩增 (LAMP) | 第25-30页 |
·LAMP 的引物设计 | 第25-26页 |
·LAMP 的原理 | 第26-28页 |
·LAMP 的特点 | 第28-29页 |
·LAMP 的应用 | 第29-30页 |
·研究的目的与意义 | 第30-32页 |
2 材料与方法 | 第32-43页 |
·实验材料 | 第32-34页 |
·菌株、质粒、实验动物及细胞系 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32-33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·PCR 扩增引物及 LAMP 扩增引物 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-43页 |
·志贺毒素的提取及蛋白浓度测定 | 第34-35页 |
·F18ab 菌毛的提取及蛋白浓度测定 | 第35页 |
·Stx2eB 蛋白的诱导表达 | 第35-36页 |
·大肠杆菌 F18ab 菌毛 FedF 基因的表达 | 第36-37页 |
·重组蛋白的纯化及蛋白浓度测定 | 第37页 |
·免疫原的鉴定 | 第37-38页 |
·卵黄抗体的制备 | 第38-42页 |
·Stx2e 基因 LAMP 检测方法的建立 | 第42-43页 |
3 结果 | 第43-64页 |
·Stx2e 的提取、鉴定及蛋白浓度测定 | 第43-45页 |
·Stx2e+菌株的 PCR 鉴定 | 第43页 |
·Stx2e 的提取 | 第43-44页 |
·Stx2e 的鉴定 | 第44-45页 |
·F18ab 菌毛的提取、鉴定及蛋白浓度测定 | 第45-46页 |
·F18ab+菌株的 PCR 鉴定及电镜观察 | 第45-46页 |
·F18ab 菌毛的提取及 Western blot 分析 | 第46页 |
·Stx2eB 重组蛋白的诱导表达、纯化及 Western blot 分析 | 第46-47页 |
·Fed F 重组蛋白的表达与鉴定 | 第47-50页 |
·Fed F 基因的克隆 | 第47-48页 |
·Fed F 重组质粒的 PCR 及酶切鉴定 | 第48-49页 |
·FedF 重组表达质粒的 PCR 及酶切鉴定 | 第49页 |
·Fed F 重组蛋白的诱导表达、纯化及 Western blot 鉴定 | 第49-50页 |
·重组蛋白浓度测定 | 第50-51页 |
·卵黄抗体的鉴定 | 第51-52页 |
·抗 Stx2e 卵黄抗体的琼脂扩散试验鉴定 | 第51页 |
·抗 F18ab 菌毛蛋白卵黄抗体的平板凝集试验 | 第51页 |
·抗 Stx2eB 蛋白卵黄抗体的 Western blot 鉴定 | 第51-52页 |
·抗FedF蛋白卵黄抗体的Western blot鉴定 | 第52页 |
·卵黄抗体安全检验 | 第52-53页 |
·物理性状检验 | 第52-53页 |
·无菌检验 | 第53页 |
·支原体检验 | 第53页 |
·安全检验 | 第53页 |
·卵黄抗体效价检测 | 第53-56页 |
·卵黄抗体效力评价 | 第56-59页 |
·体外吸附与吸附抑制试验 | 第56-57页 |
·中和试验 | 第57-59页 |
·Stx2e 基因 LAMP 检测方法结果 | 第59-64页 |
·LAMP 扩增产物的检测结果 | 第59-60页 |
·LAMP 反应温度及反应时间的筛选结果 | 第60页 |
·LAMP 的特异性反应结果 | 第60-61页 |
·LAMP 的敏感性试验结果 | 第61-62页 |
·模拟样品的检测结果 | 第62-64页 |
4 讨论 | 第64-68页 |
·卵黄抗体在预防仔猪水肿病方面的应用前景 | 第64-65页 |
·免疫原及抗体的鉴定 | 第65-66页 |
·卵黄抗体的提取 | 第66页 |
·LAMP 的引物设计 | 第66-67页 |
·LAMP 方法改善的初步探索 | 第67-68页 |
5 结论 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-81页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第81页 |