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植物源重组人碱性/酸性成纤维细胞生长因子表达研究

本论文的创新点第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-13页
第一章 文献综述第13-33页
 第一节 生物反应器种类第13-15页
   ·总论第13页
   ·细菌生物反应器第13页
   ·酵母生物反应器第13-14页
   ·动物细胞生物反应器第14-15页
     ·动物细胞悬浮培养第14页
     ·转基因动物第14-15页
   ·植物细胞生物反应器第15页
     ·植物细胞悬浮培养第15页
     ·转基因植物第15页
 第二节 植物分子医药农业研究进展第15-33页
  1 植物分子医药农业的概念第15页
  2 植物生物反应器研究进展第15-21页
   ·植物生物反应器的种类第16-21页
  3 植物生物反应器的优点第21-23页
   ·生产成本低第21页
   ·表达水平高第21-22页
   ·规模化生产容易第22页
   ·安全性好第22-23页
  4 植物生物反应器的缺点第23-25页
   ·糖苷结构的差异第23-24页
   ·生物安全性问题第24-25页
  5 植物生物反应器的主要用途第25-26页
   ·疫苗第25页
   ·抗体第25-26页
   ·治疗性和营养作用的蛋白第26页
   ·非药用蛋白第26页
  6 植物生物反应器的主要研究进展第26-33页
   ·高效表达技术研究进展第26-30页
   ·重组蛋白的下游加工技术研究进展第30-31页
   ·分子医药农业产品的市场化程度第31-33页
第二章 利用水稻胚乳体系表达重组人碱性成纤维细胞生长因子第33-70页
 第一节 背景介绍第33-36页
   ·水稻胚乳生物反应器第33页
   ·碱性成纤维细胞生长因子研究进展第33-36页
     ·重组碱性成纤维细胞生长因子的研究进展第34-36页
 第二节 实验材料与方法第36-45页
   ·材料第36页
     ·实验材料第36页
   ·实验方法第36-45页
     ·bFGF转基因材料的获得第36-38页
     ·Southern blot分析第38页
     ·免疫金水溶性树脂免疫电镜样品的制备和观察第38页
     ·蛋白表达量分析第38-39页
     ·OsrbFGF的提取纯化及生理生化性质的分析第39-41页
     ·NIH/3T3细胞培养实验第41-42页
     ·大鼠皮肤创伤(切割伤)药效学评价实验第42-43页
     ·大鼠皮趺烧(焚)伤药效学评价实验第43-45页
 第三节 实验结果与分析第45-69页
   ·密码子的优化和胚乳特异性表达载体的构建第45页
   ·转基因材料的鉴定第45-46页
   ·转基因株系的插入位点以及拷贝数分析第46-48页
   ·OsrbFGF的表达对水稻自身胚乳细胞蛋白体的形态影响及其亚细胞定位结果第48-49页
   ·OsrbFGF表达量的定量分析第49-50页
   ·OsrbFGF提取和纯化工艺研究第50-53页
     ·OsrbFGF提取条件的摸索第50-52页
     ·OsrbFGF纯化工艺的确定第52-53页
   ·OsrbFGF生理生化性质研究第53-54页
     ·N-末端测序结果第53-54页
     ·分子量和等电点测定结果第54页
   ·OsrbFGF的生物活性检测第54-69页
     ·NIH/3T3细胞活性检测结果第54-55页
     ·OsrbFGF的大鼠皮肤创伤(切割伤)药效学研究第55-62页
       ·OsrbFGF的创面愈合药效研究第55-57页
       ·Masson 染色结果第57-58页
       ·免疫组化结果第58-62页
     ·OsrbFGF的大鼠皮肤烧(烫)伤药效学研究第62-69页
 第四节 小结与讨论第69-70页
第三章 利用水稻胚乳体系表达重组人酸性成纤维细胞生长因子第70-85页
 第一节 背景介绍第70-72页
   ·酸性成纤维细胞生长因子简介第70-71页
   ·重组酸性成纤维细胞生长因子的研究进展第71-72页
     ·以大肠杆菌为表达宿主生产重组aFGF第71页
     ·以昆虫细胞为表达宿主生产重组aFGF第71-72页
     ·以植物为表达宿主生产重组aFGF第72页
 第二节 实验材料与方法第72-76页
   ·材料第72-73页
     ·实验材料第72-73页
   ·实验方法第73-76页
     ·aFGF转基因材料的获得第73-74页
     ·Southern blot分析第74-75页
     ·免疫金水溶性树脂免疫电镜样品的制备和观察第75页
     ·重组OsraFGF蛋白的提取与纯化第75-76页
 第三节 实验结果与分析第76-84页
   ·密码子的优化和胚乳特异表达型载体的构建第76-77页
   ·转基因材料的鉴定第77-78页
     ·PCR检测结果第77页
     ·Western blot检测蛋白表达阳性的OsraFGF的转基因植株第77-78页
   ·转基因株系的插入位点以及拷贝数分析第78-79页
   ·OsraFGF的亚细胞定位与对水稻胚乳细胞蛋白体形态的影响第79-80页
     ·OsraFGF转基因植株胚乳中蛋白体Ⅰ(PBⅠ)和蛋白体Ⅱ(PBⅡ)的形态观察第79-80页
   ·重组OsraFGF的提取与纯化第80-84页
     ·重组OsraFGF蛋白提取条件的确定第80-81页
     ·重组OsraFGF蛋白初步的纯化条件的摸索第81-84页
 第四节 小结与讨论第84-85页
参考文献第85-95页
在读期间发表的论文第95-96页
致谢第96-97页

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