本论文的创新点 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-33页 |
第一节 生物反应器种类 | 第13-15页 |
·总论 | 第13页 |
·细菌生物反应器 | 第13页 |
·酵母生物反应器 | 第13-14页 |
·动物细胞生物反应器 | 第14-15页 |
·动物细胞悬浮培养 | 第14页 |
·转基因动物 | 第14-15页 |
·植物细胞生物反应器 | 第15页 |
·植物细胞悬浮培养 | 第15页 |
·转基因植物 | 第15页 |
第二节 植物分子医药农业研究进展 | 第15-33页 |
1 植物分子医药农业的概念 | 第15页 |
2 植物生物反应器研究进展 | 第15-21页 |
·植物生物反应器的种类 | 第16-21页 |
3 植物生物反应器的优点 | 第21-23页 |
·生产成本低 | 第21页 |
·表达水平高 | 第21-22页 |
·规模化生产容易 | 第22页 |
·安全性好 | 第22-23页 |
4 植物生物反应器的缺点 | 第23-25页 |
·糖苷结构的差异 | 第23-24页 |
·生物安全性问题 | 第24-25页 |
5 植物生物反应器的主要用途 | 第25-26页 |
·疫苗 | 第25页 |
·抗体 | 第25-26页 |
·治疗性和营养作用的蛋白 | 第26页 |
·非药用蛋白 | 第26页 |
6 植物生物反应器的主要研究进展 | 第26-33页 |
·高效表达技术研究进展 | 第26-30页 |
·重组蛋白的下游加工技术研究进展 | 第30-31页 |
·分子医药农业产品的市场化程度 | 第31-33页 |
第二章 利用水稻胚乳体系表达重组人碱性成纤维细胞生长因子 | 第33-70页 |
第一节 背景介绍 | 第33-36页 |
·水稻胚乳生物反应器 | 第33页 |
·碱性成纤维细胞生长因子研究进展 | 第33-36页 |
·重组碱性成纤维细胞生长因子的研究进展 | 第34-36页 |
第二节 实验材料与方法 | 第36-45页 |
·材料 | 第36页 |
·实验材料 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-45页 |
·bFGF转基因材料的获得 | 第36-38页 |
·Southern blot分析 | 第38页 |
·免疫金水溶性树脂免疫电镜样品的制备和观察 | 第38页 |
·蛋白表达量分析 | 第38-39页 |
·OsrbFGF的提取纯化及生理生化性质的分析 | 第39-41页 |
·NIH/3T3细胞培养实验 | 第41-42页 |
·大鼠皮肤创伤(切割伤)药效学评价实验 | 第42-43页 |
·大鼠皮趺烧(焚)伤药效学评价实验 | 第43-45页 |
第三节 实验结果与分析 | 第45-69页 |
·密码子的优化和胚乳特异性表达载体的构建 | 第45页 |
·转基因材料的鉴定 | 第45-46页 |
·转基因株系的插入位点以及拷贝数分析 | 第46-48页 |
·OsrbFGF的表达对水稻自身胚乳细胞蛋白体的形态影响及其亚细胞定位结果 | 第48-49页 |
·OsrbFGF表达量的定量分析 | 第49-50页 |
·OsrbFGF提取和纯化工艺研究 | 第50-53页 |
·OsrbFGF提取条件的摸索 | 第50-52页 |
·OsrbFGF纯化工艺的确定 | 第52-53页 |
·OsrbFGF生理生化性质研究 | 第53-54页 |
·N-末端测序结果 | 第53-54页 |
·分子量和等电点测定结果 | 第54页 |
·OsrbFGF的生物活性检测 | 第54-69页 |
·NIH/3T3细胞活性检测结果 | 第54-55页 |
·OsrbFGF的大鼠皮肤创伤(切割伤)药效学研究 | 第55-62页 |
·OsrbFGF的创面愈合药效研究 | 第55-57页 |
·Masson 染色结果 | 第57-58页 |
·免疫组化结果 | 第58-62页 |
·OsrbFGF的大鼠皮肤烧(烫)伤药效学研究 | 第62-69页 |
第四节 小结与讨论 | 第69-70页 |
第三章 利用水稻胚乳体系表达重组人酸性成纤维细胞生长因子 | 第70-85页 |
第一节 背景介绍 | 第70-72页 |
·酸性成纤维细胞生长因子简介 | 第70-71页 |
·重组酸性成纤维细胞生长因子的研究进展 | 第71-72页 |
·以大肠杆菌为表达宿主生产重组aFGF | 第71页 |
·以昆虫细胞为表达宿主生产重组aFGF | 第71-72页 |
·以植物为表达宿主生产重组aFGF | 第72页 |
第二节 实验材料与方法 | 第72-76页 |
·材料 | 第72-73页 |
·实验材料 | 第72-73页 |
·实验方法 | 第73-76页 |
·aFGF转基因材料的获得 | 第73-74页 |
·Southern blot分析 | 第74-75页 |
·免疫金水溶性树脂免疫电镜样品的制备和观察 | 第75页 |
·重组OsraFGF蛋白的提取与纯化 | 第75-76页 |
第三节 实验结果与分析 | 第76-84页 |
·密码子的优化和胚乳特异表达型载体的构建 | 第76-77页 |
·转基因材料的鉴定 | 第77-78页 |
·PCR检测结果 | 第77页 |
·Western blot检测蛋白表达阳性的OsraFGF的转基因植株 | 第77-78页 |
·转基因株系的插入位点以及拷贝数分析 | 第78-79页 |
·OsraFGF的亚细胞定位与对水稻胚乳细胞蛋白体形态的影响 | 第79-80页 |
·OsraFGF转基因植株胚乳中蛋白体Ⅰ(PBⅠ)和蛋白体Ⅱ(PBⅡ)的形态观察 | 第79-80页 |
·重组OsraFGF的提取与纯化 | 第80-84页 |
·重组OsraFGF蛋白提取条件的确定 | 第80-81页 |
·重组OsraFGF蛋白初步的纯化条件的摸索 | 第81-84页 |
第四节 小结与讨论 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-95页 |
在读期间发表的论文 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-97页 |