目录 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
縮略词表 | 第15-17页 |
第一章 前言 | 第17-41页 |
1 课题的提出 | 第17-18页 |
2 前人研究进展 | 第18-39页 |
·植物类胡萝卜素研究进展 | 第18-37页 |
·类胡萝卜素概述 | 第18-19页 |
·植物类胡萝卜素的生物合成与转录调控 | 第19-24页 |
·植物类胡萝卜素的降解 | 第24-26页 |
·类胡萝卜素与质体发育 | 第26-29页 |
·植物类胡萝卜素代谢工程调控 | 第29-35页 |
·柑橘果实类胡萝卜素研究进展 | 第35-37页 |
·植物离体细胞系的应用 | 第37-38页 |
·现代柑橘果实品质改良技术与进展 | 第38-39页 |
3 本研究的目的和内容 | 第39-41页 |
第二章 转CrtB和DSM2基因调控柑橘胚性愈伤组织类胡萝卜素积累的研究 | 第41-80页 |
1 引言 | 第41-42页 |
2 材料与方法 | 第42-54页 |
·实验材料 | 第42-44页 |
·实验方法 | 第44-54页 |
·遗传转化 | 第44页 |
·DNA提取 | 第44-45页 |
·PCR分析 | 第45-46页 |
·Sourthem杂交分析 | 第46-48页 |
·抗体制备 | 第48-49页 |
·蛋白提取与Western杂交分析 | 第49-50页 |
·倍性分析 | 第50-51页 |
·类胡萝卜素分析 | 第51-52页 |
·细胞学分析 | 第52页 |
·RNA提取与基因表达分析 | 第52-53页 |
·统计分析 | 第53-54页 |
3 结果与分析 | 第54-74页 |
·类胡萝卜素代谢细胞模型(ECMs)的创制及其表型特征 | 第54页 |
·ECMs的倍性特征 | 第54-55页 |
·ECMs的T-DNA拷贝数分析 | 第55页 |
·ECMs中的CrtB蛋白表达量分析 | 第55-56页 |
·ECMs的类胡萝卜素积累特征 | 第56-61页 |
·光照对ECMs中类胡萝卜素积累的影响 | 第61-62页 |
·高温对ECMs中类胡萝卜素积累的影响 | 第62-63页 |
·ECMs中类胡萝卜素积累的不稳定性 | 第63页 |
·成熟柑橘有色层的类胡萝卜素积累特征 | 第63-64页 |
·ECMs中类胡萝卜素积累结构的光镜观察 | 第64-66页 |
·ECMs中类胡萝卜素积累结构的超微观察 | 第66-67页 |
·成熟柑橘有色层的类胡萝卜素积累结构 | 第67-69页 |
·两个叶绿体特征蛋白的Western杂交分析 | 第69页 |
·异戊二烯和胡萝卜素代谢相关基因在愈伤和成熟有色层组织中的表达特征 | 第69-73页 |
·CrtB/DSM2共表达细胞系的创制及其特征分析 | 第73-74页 |
4 讨论 | 第74-79页 |
·ECMs中类胡萝卜素积累模式的形成原因 | 第75-77页 |
·ECMs中类胡萝卜素存储结构的特征 | 第77-78页 |
·ECMs中类胡萝卜素的降解机制 | 第78页 |
·ECMs同成熟果实有色层间类胡萝卜素积累差异的转录解释 | 第78-79页 |
5 本章小结 | 第79-80页 |
第三章 类胡萝卜素积累对质体发育和代谢的影响 | 第80-108页 |
1. 引言 | 第80-81页 |
2. 材料与方法 | 第81-85页 |
·实验材料 | 第81页 |
·研究方法 | 第81-85页 |
·淀粉含量分析 | 第81-82页 |
·淀粉粒分离纯化以及扫描电镜观察 | 第82页 |
·饥饿处理与细胞学观察 | 第82-83页 |
·糖酸含量分析 | 第83页 |
·RNA提取与基因表达分析 | 第83页 |
·芯片分析 | 第83-84页 |
·ABA含量分析 | 第84页 |
·活性氧分析 | 第84-85页 |
·氧化还原处理 | 第85页 |
·根癌农杆菌介导苹果愈伤的遗传转化和分析 | 第85页 |
3 结果与分析 | 第85-102页 |
·ECMs中的淀粉含量以及淀粉粒特征 | 第85-87页 |
·糖饥饿条件下ECMs中质体形态特征 | 第87-88页 |
·ECMs及其野生型中有机酸和可溶性糖含量 | 第88-89页 |
·类胡萝卜素积累对愈伤转录谱的影响 | 第89-94页 |
·ECMs中ABA的含量变化 | 第94-95页 |
·ECMs中的ROS水平 | 第95-96页 |
·ROS与类胡萝卜素消解的相关性分析 | 第96-97页 |
·细胞氧化还原状态同淀粉含量的相关性分析 | 第97-98页 |
·类胡萝卜素对苹果愈伤组织中花青素合成的影响 | 第98-102页 |
4. 讨论 | 第102-107页 |
·类胡萝卜素积累与逆境相关基因响应 | 第102-103页 |
·ECMs中的ABA含量特征 | 第103页 |
·类胡萝卜素积累改变细胞的氧化还原状态 | 第103-104页 |
·类胡萝卜素积累改变质体发育 | 第104-105页 |
·类胡萝卜素积累调控淀粉代谢 | 第105-106页 |
·类胡萝卜素积累负调控花青素代谢 | 第106-107页 |
5 本章小结 | 第107-108页 |
第四章 转CrtB基因早实枳和山金柑的再生和类胡萝卜素积累特征研究 | 第108-119页 |
1. 引言 | 第108页 |
2. 材料与方法 | 第108-109页 |
·实验材料 | 第108页 |
·研究方法 | 第108-109页 |
·遗传转化与材料培养 | 第108-109页 |
·ABA含量检测 | 第109页 |
·细胞学观察 | 第109页 |
3. 结果与分析 | 第109-115页 |
·转基因早实枳的获得与表型分析 | 第109-110页 |
·转基因山金柑的获得与表型分析 | 第110-111页 |
·叶龄与ABA的含量 | 第111页 |
·转基因山金柑中的质体特征 | 第111-114页 |
·成熟果实中的类胡萝卜素积累特征以及有色体观察 | 第114-115页 |
4. 讨论 | 第115-118页 |
·转基因植株中类胡萝卜素的组织特异性积累 | 第116-117页 |
·类胡萝卜素积累对质体发育的影响 | 第117-118页 |
·组成型表达CrtB基因影响叶片衰老和株型 | 第118页 |
5 本章小结 | 第118-119页 |
第五章 花药诱导获得红夏橙DH愈伤系并用于LCYB1和LCYE基因的等位多态性分析 | 第119-127页 |
1 引言 | 第119-120页 |
2 材料和方法 | 第120-121页 |
·实验材料 | 第120页 |
·实验方法 | 第120-121页 |
·花药培养 | 第120页 |
·倍性分析 | 第120页 |
·DNA提取 | 第120页 |
·SSR分析 | 第120-121页 |
·LCYB1基因的CAPS分析 | 第121页 |
·LCYE基因片段测序分析 | 第121页 |
3 结果与分析 | 第121-125页 |
·花药培养获得愈伤、胚状体以及再生芽 | 第121-122页 |
·愈伤以及胚状体的倍性分析 | 第122-123页 |
·SSR分析 | 第123-124页 |
·DH愈伤系应用于LCYB1和LCYE基因的等位多态性分析 | 第124-125页 |
4 讨论 | 第125-127页 |
第六章 总讨论与未来研究展望 | 第127-130页 |
参考文献 | 第130-153页 |
附录Ⅰ | 第153-156页 |
附录Ⅱ | 第156-159页 |
附录Ⅲ 图版 | 第159-162页 |
附录Ⅳ 各种胚性愈伤组织中的类胡萝卜素组成(暗培养条件) | 第162-164页 |
附录Ⅴ 基因芯片杂交数据 | 第164-169页 |
附录Ⅵ 博士期间发表论文 | 第169-170页 |
致谢 | 第170-171页 |