| 目录 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 縮略词表 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-35页 |
| 1 低温胁迫对植物的影响 | 第18-22页 |
| ·低温胁迫对细胞膜系统的影响 | 第19页 |
| ·低温胁迫对植物光合作用的影响 | 第19-20页 |
| ·低温胁迫对代谢的影响 | 第20-22页 |
| 2 植物抗寒性的鉴定方法和指标 | 第22-23页 |
| 3 植物应答低温胁迫的分子机制 | 第23-28页 |
| ·低温胁迫信号的感知及信号传递 | 第23-24页 |
| ·植物低温应答的转录调控 | 第24-26页 |
| ·CBF调控途径 | 第24-25页 |
| ·不依赖CBF的调控途径 | 第25-26页 |
| ·转录后调控 | 第26-28页 |
| ·mRNA加工及由核内运出 | 第26-27页 |
| ·小RNA(Small RNAs) | 第27-28页 |
| ·翻译后调控 | 第28页 |
| 4 基因芯片技术在植物低温逆境研究中的应用 | 第28-29页 |
| 5 利用基因工程提高植物的抗寒性 | 第29-31页 |
| 6 番茄耐低温研究进展 | 第31-33页 |
| 7 本研究的目的、意义及内容 | 第33-35页 |
| 第二章 耐低温IL系的筛选及低温胁迫下生理应答差异 | 第35-48页 |
| 1 前言 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-40页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-40页 |
| ·耐低温渐渗系的筛选 | 第36-37页 |
| ·电导率的测定 | 第37页 |
| ·MDA含量的测定 | 第37页 |
| ·脯氨酸含量的测定 | 第37-38页 |
| ·可溶性糖含量的测定 | 第38-39页 |
| ·SOD活性的测定 | 第39页 |
| ·CAT活性的测定 | 第39页 |
| ·APX活性的测定 | 第39-40页 |
| ·POD活性的测定 | 第40页 |
| ·叶绿素荧光参数的测定 | 第40页 |
| ·数据处理 | 第40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-46页 |
| ·耐低温渐渗系的筛选 | 第40-43页 |
| ·低温胁迫对番茄幼苗生理生化指标的影响 | 第43-46页 |
| ·低温胁迫对番茄幼苗细胞膜的影响 | 第43页 |
| ·低温胁迫对番茄幼苗可溶性溶质的影响 | 第43-44页 |
| ·低温胁迫对番茄幼苗PSII的影响 | 第44-45页 |
| ·低温胁迫对番茄幼苗抗氧化酶活性的影响 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 抗/感番茄在低温胁迫下基因表达差异分析 | 第48-74页 |
| 1 前言 | 第48-49页 |
| 2 材料和方法 | 第49-51页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·TOM2芯片 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·RNA提取 | 第49-50页 |
| ·样品RNA荧光标记 | 第50页 |
| ·芯片杂交与清洗 | 第50页 |
| ·芯片扫描及数据分析 | 第50页 |
| ·生物信息学分析 | 第50页 |
| ·反转录 | 第50-51页 |
| ·实时荧光定量PCR验证 | 第51页 |
| 3 结果分析与讨论 | 第51-72页 |
| ·低温胁迫下三材料基因表达谱的总体特征 | 第51-53页 |
| ·芯片结果的验证 | 第53-55页 |
| ·抗感材料间基因表达差异分析 | 第55-57页 |
| ·LA1777中可能贡献抗寒性的其它差异表达基因 | 第57-58页 |
| ·GO生物学进程富集分析 | 第58-61页 |
| ·钙信号途径相关基因 | 第61页 |
| ·光合相关基因 | 第61-63页 |
| ·ROS相关基因 | 第63-64页 |
| ·激素代谢与信号转导 | 第64-66页 |
| ·转录因子 | 第66-68页 |
| ·翻译后修饰 | 第68-70页 |
| ·低温胁迫下显著改变的代谢途径 | 第70-72页 |
| 4 本章小结 | 第72-74页 |
| 第四章 差异表达基因ShDHN的功能鉴定 | 第74-94页 |
| 1 前言 | 第74-75页 |
| 2 材料与方法 | 第75-78页 |
| ·实验材料 | 第75页 |
| ·试剂、菌株和载体 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-78页 |
| ·非生物逆境处理 | 第75-76页 |
| ·ShDHN的组织及诱导表达分析 | 第76页 |
| ·目标基因扩增和测序分析 | 第76页 |
| ·超量表达载体的构建 | 第76页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第76页 |
| ·转基因植株的阳性检测 | 第76页 |
| ·转基因植株相对表达量的检测 | 第76-77页 |
| ·转基因植株苗期抗寒性鉴定 | 第77页 |
| ·转基因植株苗期抗旱性鉴定 | 第77页 |
| ·盐及渗透胁迫下的生长实验 | 第77页 |
| ·ROS组织原位检测 | 第77-78页 |
| ·相关生理指标的测定 | 第78页 |
| ·失水率的测定 | 第78页 |
| ·相对含水量的测定 | 第78页 |
| 3 结果与分析 | 第78-91页 |
| ·ShDHN组织及诱导表达分析 | 第78-80页 |
| ·ShDHN的克隆及序列分析 | 第80-82页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第82页 |
| ·超量表达ShDHN提高了番茄的抗逆性 | 第82-89页 |
| ·超量表达ShDHN提高了番茄的抗寒性 | 第82-86页 |
| ·超量表达ShDHN提高了番茄的抗旱性 | 第86-88页 |
| ·超量表达ShDHN提高了幼苗对高盐及渗透胁迫的抗性 | 第88-89页 |
| ·超量表达ShDHN改变了相关基因的表达 | 第89-91页 |
| 4 讨论 | 第91-94页 |
| ·脱水素基因的表达与植株抗性正相关 | 第91-92页 |
| ·超量表达脱水素基因降低了ROS对细胞膜的伤害 | 第92页 |
| ·脱水素基因功能的多效性 | 第92-94页 |
| 第五章 差异表达基因ShCHLP的功能鉴定 | 第94-111页 |
| 1 前言 | 第94-96页 |
| 2 材料和方法 | 第96-98页 |
| ·植物材料 | 第96页 |
| ·主要试剂、菌株及载体 | 第96页 |
| ·实验方法 | 第96-98页 |
| ·各种逆境胁迫处理 | 第96页 |
| ·ShCHL P组织及诱导表达谱分析 | 第96页 |
| ·ShCHL P的克隆及序列分析 | 第96页 |
| ·超量表达载体的构建及遗传转化 | 第96-97页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第97页 |
| ·叶盘法分析转基因植株对氧化及高盐的抗性 | 第97页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第97页 |
| ·高盐、渗透及氧化胁迫下的生长实验 | 第97页 |
| ·ROS组织原位检测 | 第97-98页 |
| 3 结果与分析 | 第98-108页 |
| ·ShCHL P基因的克隆及序列分析 | 第98-100页 |
| ·ShCHLP的表达谱分析 | 第100-101页 |
| ·转基因株系的分子检测 | 第101-102页 |
| ·CHL P调控叶绿素的生物合成 | 第102-103页 |
| ·ShCHL P转基因植株的抗逆性分析 | 第103-108页 |
| ·ShCHL P转基因植株耐盐性分析 | 第103-106页 |
| ·ShCHL P转基因幼苗对渗透胁迫的抗性分析 | 第106页 |
| ·ShCHL P转基因幼苗对氧化胁迫的抗性分析 | 第106-108页 |
| 4 讨论 | 第108-111页 |
| ·CHL P基因在植物叶绿素生物合成中的作用 | 第108-109页 |
| ·CHL P基因在植物非生物逆境应答中的作用 | 第109-111页 |
| 第六章 差异表达转录因子ShNAC的功能鉴定 | 第111-123页 |
| 1 前言 | 第111-113页 |
| 2 材料与方法 | 第113-114页 |
| ·植物材料 | 第113页 |
| ·主要试剂、菌株及载体 | 第113页 |
| ·实验方法 | 第113-114页 |
| ·ShNAC组织及诱导表达谱分析 | 第113页 |
| ·ShNAC基因扩增和序列分析 | 第113页 |
| ·超量表达载体的构建及转基因株系的分子检测 | 第113-114页 |
| ·转基因植株苗期抗逆性鉴定 | 第114页 |
| ·相关生理指标的测定 | 第114页 |
| 3 结果与分析 | 第114-120页 |
| ·ShNAC基因的克隆及序列分析 | 第114-116页 |
| ·ShNAC组织及诱导表达谱分析 | 第116-117页 |
| ·转基因植株的抗逆性鉴定 | 第117-120页 |
| ·超量表达ShNAC转基因番茄植株对干旱更敏感 | 第118-120页 |
| ·超量表达ShNAC转基因番茄植株对低温更敏感 | 第120页 |
| 4 讨论 | 第120-123页 |
| ·ShNAC负调控番茄的生长发育 | 第120-121页 |
| ·ShNAC负调控番茄的抗逆性 | 第121-123页 |
| 第七章 全文总结 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-155页 |
| 附录 | 第155-167页 |
| 作者简介 | 第167-168页 |
| 致谢 | 第168页 |