| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 1. 绪论 | 第13-30页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·人类博卡病毒的分类 | 第13-14页 |
| ·人类博卡病毒的流行病学 | 第14-17页 |
| ·人类博卡病毒的发病率 | 第14-16页 |
| ·人类博卡病毒感染的高发季节 | 第16页 |
| ·人类博卡病毒的易感人群 | 第16-17页 |
| ·人类博卡病毒与其他病毒混合感染 | 第17页 |
| ·人类博卡病毒感染的临床症状 | 第17-19页 |
| ·人类博卡病毒的诊断方法 | 第19-20页 |
| ·人类博卡病毒分子生物学研究进展 | 第20-28页 |
| ·人类博卡病毒基因组序列分析 | 第21-23页 |
| ·人类博卡病毒基因功能研究进展 | 第23-25页 |
| ·人类博卡病毒转录机制研究 | 第25-27页 |
| ·人类博卡病毒的体外培养 | 第27-28页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统简介 | 第28-29页 |
| ·研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 2. 人类博卡病毒(HBoVl)的鉴定、基因组克隆及序列分析 | 第30-44页 |
| ·材料与方法 | 第30-35页 |
| ·样本的采集和预处理 | 第30页 |
| ·试剂、载体与菌株 | 第30-31页 |
| ·病毒DNA的提取 | 第31页 |
| ·PCR鉴定 | 第31页 |
| ·HBoV1基因组克隆的构建 | 第31-35页 |
| ·基因组序列分析 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-42页 |
| ·HBoV1阳性样本PCR扩增 | 第35-36页 |
| ·HBoV1基因组克隆的构建 | 第36-38页 |
| ·基因组序列分析 | 第38-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 3. HBoV1启动子活性分析及非结构蛋白对启动子的调控作用 | 第44-59页 |
| ·材料与方法 | 第44-49页 |
| ·载体、菌株与细胞系 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44-45页 |
| ·引物设计 | 第45-46页 |
| ·重组载体的构建 | 第46-48页 |
| ·脂质体介导的转染 | 第48页 |
| ·蛋白表达的检测 | 第48-49页 |
| ·HBoV1启动子活性检测 | 第49页 |
| ·非结构蛋白对启动子的调控 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-57页 |
| ·PCR扩增产物检测 | 第49-50页 |
| ·启动子重组载体的鉴定 | 第50-52页 |
| ·非结构基因表达载体的鉴定 | 第52页 |
| ·蛋白表达的检测 | 第52-53页 |
| ·全长启动子活性检测 | 第53-54页 |
| ·启动子截短片段活性检测 | 第54-56页 |
| ·非结构蛋白NS1对启动子具有正调控作用 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 4. HBoV1基因组转录、翻译机制初步研究 | 第59-72页 |
| ·材料与方法 | 第59-64页 |
| ·载体、菌株与细胞系 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59-60页 |
| ·引物设计与合成 | 第60-61页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第61-62页 |
| ·RT-PCR | 第62页 |
| ·RACE实验 | 第62-63页 |
| ·共聚焦显微镜观察NP1蛋白定位 | 第63页 |
| ·Southern-blot | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-70页 |
| ·NP1基因转录产物的检测 | 第64-65页 |
| ·VP基因转录产物的检测 | 第65-66页 |
| ·HBoV1转录图谱的构建 | 第66-68页 |
| ·NP1蛋白的表达及细胞内定位 | 第68-69页 |
| ·Southern-blot检测病毒DNA复制 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 5. HBoV1重组杆状病毒载体的构建及应用 | 第72-86页 |
| ·材料与方法 | 第72-77页 |
| ·载体、菌株与细胞系 | 第72页 |
| ·试剂 | 第72-73页 |
| ·重组杆状病毒Bac-HBoV1的构建 | 第73-75页 |
| ·重组杆状病毒Bac-Bov-EGFP的构建 | 第75页 |
| ·重组杆状病毒Bac-Bov-EGFP转导哺乳动物细胞 | 第75页 |
| ·重组杆状病毒转导效率与脂质体介导的质粒转染效率的比较 | 第75-76页 |
| ·重组杆状病毒Bac-HBoV1在哺乳动物细胞中的转录 | 第76-77页 |
| ·重组杆状病毒Bac-HBoV1转导哺乳动物细胞后NPl蛋白的翻译及定位 | 第77页 |
| ·结果 | 第77-84页 |
| ·重组杆状病毒Bac-HBoV1的构建 | 第77-79页 |
| ·重组杆状病毒Bac-Bov-EGFP的构建 | 第79-81页 |
| ·重组杆状病毒Bac-Bov-EGFP转导哺乳动物细胞 | 第81页 |
| ·两种系统效率比较 | 第81-82页 |
| ·重组杆状病毒Bac-HBoV1在哺乳动物细胞中的转录 | 第82-83页 |
| ·重组杆状病毒Bac-HBoV1转导哺乳动物细胞后NP1蛋白的翻译及定位 | 第83-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-95页 |
| 附录Ⅰ WHL-1基因组序列 | 第95-98页 |
| 攻读博士学位期间论文发表情况 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
