摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-16页 |
第一章 课题提出与研究进展 | 第16-36页 |
·课题提出 | 第16页 |
·植物体细胞杂交研究进展 | 第16-22页 |
·利用体细胞杂交转移有利性状 | 第17-18页 |
·体细胞杂种的鉴定 | 第18-20页 |
·形态学鉴定 | 第18页 |
·细胞学鉴定 | 第18-19页 |
·生化鉴定 | 第19页 |
·分子标记鉴定 | 第19-20页 |
·柑橘体细胞杂种遗传变异分析 | 第20-21页 |
·柑橘体细胞杂种在遗传育种中的应用 | 第21-22页 |
·植物多倍体化研究进展 | 第22-29页 |
·植物多倍体化过程中的遗传变化 | 第23-27页 |
·多倍体化诱发基因组序列变化 | 第23-24页 |
·多倍体化诱发基因组重组 | 第24-25页 |
·多倍体化诱发的转座子变化 | 第25-27页 |
·植物多倍体化过程中的表观遗传变化 | 第27-29页 |
·多倍体化诱发的DNA甲基化变化 | 第27-28页 |
·多倍体化诱发Small RNA变化 | 第28-29页 |
·绿色荧光蛋白基因在柑橘生物工程中的应用 | 第29-35页 |
·绿色荧光蛋白基因的概况 | 第29-31页 |
·GFP在生物工程中的应用 | 第31-34页 |
·新型报告基因 | 第31-33页 |
·作为一种荧光标记 | 第33-34页 |
·未知基因的克隆和功能鉴定,基因表达 | 第34页 |
·GFP荧光的检测 | 第34页 |
·GFP在柑橘生物工程中的应用 | 第34-35页 |
·本研究的目的和内容 | 第35-36页 |
第二章 柑橘多倍体化过程中核基因组遗传变异研究 | 第36-83页 |
·引言 | 第36页 |
·材料与方法 | 第36-45页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·试验方法 | 第37-45页 |
·基因组DNA提取 | 第37-38页 |
·基因组AFLP分析 | 第38-42页 |
·基因组MSAP分析 | 第42页 |
·基因组SSAP分析 | 第42页 |
·基因组MSTD分析 | 第42页 |
·数据统计及分析方法 | 第42-43页 |
·差异片段重扩增及克隆测序 | 第43页 |
·生物信息学分析 | 第43页 |
·Southern blot分析 | 第43-45页 |
·结果与分析 | 第45-77页 |
·异源四倍体体细胞杂种基因组序列变化研究 | 第45-57页 |
·异源四倍体体细胞杂种基因组序列变化特点 | 第45-50页 |
·异源四倍体体细胞杂种基因组中反转录转座子的多态性分析 | 第50-55页 |
·Southern blot验证体细胞杂种基因组中反转录转座子的变化 | 第55-57页 |
·异源四倍体体细胞杂种基因组胞嘧啶甲基化变化特征分析 | 第57-66页 |
·异源四倍体体细胞杂种基因组CCGG位点胞嘧啶甲基化水平 | 第57-62页 |
·异源四倍体体细胞杂种基因组CCGG胞嘧啶甲基化遗传变异类型 | 第62-66页 |
·异源四倍体体细胞杂种基因组CCGG胞嘧啶甲基化差异条带测序分析 | 第66页 |
·同源四倍体基因组序列变化特征分析 | 第66-69页 |
·同源四倍体核基因组胞嘧啶甲基化变化特征分析 | 第69-73页 |
·同源四倍体核基因组CCGG位点胞嘧啶甲基化水平 | 第69-70页 |
·同源四倍体核基因组CCGG胞嘧啶甲基化遗传变异类型 | 第70-73页 |
·二倍体胞质杂种核基因组序列变化研究 | 第73-75页 |
·二倍体胞质杂种核基因组胞嘧啶甲基化变化特征分析 | 第75-77页 |
·二倍体胞质杂种核基因组CCGG位点胞嘧啶甲基化水平 | 第75-76页 |
·二倍体胞质杂种及其亲本核基因组CCGG胞嘧啶甲基化遗传变异类型 | 第76-77页 |
·讨论 | 第77-83页 |
·体细胞杂种基因组多倍体化后对遗传和表观遗传的影响 | 第77-79页 |
·体细胞杂种基因组遗传变异的亲本偏向性 | 第79页 |
·同源基因组加倍对核基因组遗传和表观遗传的影响 | 第79-80页 |
·胞质基因组对核基因组遗传和表观遗传的影响 | 第80-81页 |
·体细胞杂种在柑橘基因组遗传变异研究中的应用潜力 | 第81-83页 |
第三章 体细胞杂种多倍体化对外源基因EGFP表达的影响 | 第83-92页 |
·引言 | 第83页 |
·材料与方法 | 第83-86页 |
·实验材料 | 第83-84页 |
·试验方法 | 第84-86页 |
·叶肉原生质体的分离和荧光强度的测定 | 第84页 |
·激光共聚焦显微镜观察叶片组织GFP荧光 | 第84页 |
·Southern blot分析EGFP | 第84页 |
·EGFP RNA表达分析 | 第84-85页 |
·EGFP western blot蛋白表达分析 | 第85-86页 |
·结果与分析 | 第86-90页 |
·原生质体水平比较不同倍性材料荧光强度 | 第86-87页 |
·不同倍性叶片组织荧光强度比较 | 第87-89页 |
·EGFP western blot蛋白表达分析 | 第89页 |
·EGFP RNA表达分析 | 第89页 |
·Southern blot分析EGFP | 第89-90页 |
·讨论 | 第90-92页 |
第四章 Mt-GFP融合基因转化不同倍性柑橘愈伤组织 | 第92-103页 |
·引言 | 第92页 |
·材料与方法 | 第92-95页 |
·实验材料 | 第92页 |
·菌株、质粒及试剂 | 第92-93页 |
·试验方法 | 第93-95页 |
·农杆菌介导柑橘遗传转化与转化子筛选、再生 | 第93-94页 |
·GFP荧光检测 | 第94页 |
·融合基因原生质体水平的共定位 | 第94页 |
·抗性植株的分子鉴定 | 第94-95页 |
·结果与分析 | 第95-100页 |
·不同倍性转基因材料的转化和再生 | 第95-98页 |
·转基因植株的分子鉴定 | 第98-99页 |
·Mt-GFP融合基因亚细胞定位 | 第99-100页 |
·讨论 | 第100-101页 |
·论文创新点与后续研究 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-113页 |
附录Ⅰ AFLP(EcoRⅠ/MspⅠ),SSAP(EcoRⅠ/MspⅠ),MSAP(EcoRⅠ和HpaⅡ/MspⅠ)andMSTD(EcoRⅠ和HpaⅡ/MspⅠ)分析中接头、预扩增、选择扩增引物序列 | 第113-114页 |
附录Ⅱ 不同倍性荧光强度差异比较 | 第114-115页 |
附录Ⅲ 不同亚细胞定位GFP荧光表达比较 | 第115-116页 |
附录Ⅳ 博士期间发表及待发表的论文 | 第116-117页 |
致谢 | 第117页 |