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柑橘异源多倍体化过程中核基因组变异及多倍体化对外源基因表达的影响

摘要第1-11页
Abstract第11-16页
第一章 课题提出与研究进展第16-36页
   ·课题提出第16页
   ·植物体细胞杂交研究进展第16-22页
     ·利用体细胞杂交转移有利性状第17-18页
     ·体细胞杂种的鉴定第18-20页
       ·形态学鉴定第18页
       ·细胞学鉴定第18-19页
       ·生化鉴定第19页
       ·分子标记鉴定第19-20页
     ·柑橘体细胞杂种遗传变异分析第20-21页
     ·柑橘体细胞杂种在遗传育种中的应用第21-22页
   ·植物多倍体化研究进展第22-29页
     ·植物多倍体化过程中的遗传变化第23-27页
       ·多倍体化诱发基因组序列变化第23-24页
       ·多倍体化诱发基因组重组第24-25页
       ·多倍体化诱发的转座子变化第25-27页
     ·植物多倍体化过程中的表观遗传变化第27-29页
       ·多倍体化诱发的DNA甲基化变化第27-28页
       ·多倍体化诱发Small RNA变化第28-29页
   ·绿色荧光蛋白基因在柑橘生物工程中的应用第29-35页
     ·绿色荧光蛋白基因的概况第29-31页
     ·GFP在生物工程中的应用第31-34页
       ·新型报告基因第31-33页
       ·作为一种荧光标记第33-34页
       ·未知基因的克隆和功能鉴定,基因表达第34页
     ·GFP荧光的检测第34页
     ·GFP在柑橘生物工程中的应用第34-35页
   ·本研究的目的和内容第35-36页
第二章 柑橘多倍体化过程中核基因组遗传变异研究第36-83页
   ·引言第36页
   ·材料与方法第36-45页
     ·实验材料第36-37页
     ·试验方法第37-45页
       ·基因组DNA提取第37-38页
       ·基因组AFLP分析第38-42页
       ·基因组MSAP分析第42页
       ·基因组SSAP分析第42页
       ·基因组MSTD分析第42页
       ·数据统计及分析方法第42-43页
       ·差异片段重扩增及克隆测序第43页
       ·生物信息学分析第43页
       ·Southern blot分析第43-45页
   ·结果与分析第45-77页
     ·异源四倍体体细胞杂种基因组序列变化研究第45-57页
       ·异源四倍体体细胞杂种基因组序列变化特点第45-50页
       ·异源四倍体体细胞杂种基因组中反转录转座子的多态性分析第50-55页
       ·Southern blot验证体细胞杂种基因组中反转录转座子的变化第55-57页
     ·异源四倍体体细胞杂种基因组胞嘧啶甲基化变化特征分析第57-66页
       ·异源四倍体体细胞杂种基因组CCGG位点胞嘧啶甲基化水平第57-62页
       ·异源四倍体体细胞杂种基因组CCGG胞嘧啶甲基化遗传变异类型第62-66页
       ·异源四倍体体细胞杂种基因组CCGG胞嘧啶甲基化差异条带测序分析第66页
     ·同源四倍体基因组序列变化特征分析第66-69页
     ·同源四倍体核基因组胞嘧啶甲基化变化特征分析第69-73页
       ·同源四倍体核基因组CCGG位点胞嘧啶甲基化水平第69-70页
       ·同源四倍体核基因组CCGG胞嘧啶甲基化遗传变异类型第70-73页
     ·二倍体胞质杂种核基因组序列变化研究第73-75页
     ·二倍体胞质杂种核基因组胞嘧啶甲基化变化特征分析第75-77页
       ·二倍体胞质杂种核基因组CCGG位点胞嘧啶甲基化水平第75-76页
       ·二倍体胞质杂种及其亲本核基因组CCGG胞嘧啶甲基化遗传变异类型第76-77页
   ·讨论第77-83页
     ·体细胞杂种基因组多倍体化后对遗传和表观遗传的影响第77-79页
     ·体细胞杂种基因组遗传变异的亲本偏向性第79页
     ·同源基因组加倍对核基因组遗传和表观遗传的影响第79-80页
     ·胞质基因组对核基因组遗传和表观遗传的影响第80-81页
     ·体细胞杂种在柑橘基因组遗传变异研究中的应用潜力第81-83页
第三章 体细胞杂种多倍体化对外源基因EGFP表达的影响第83-92页
   ·引言第83页
   ·材料与方法第83-86页
     ·实验材料第83-84页
     ·试验方法第84-86页
       ·叶肉原生质体的分离和荧光强度的测定第84页
       ·激光共聚焦显微镜观察叶片组织GFP荧光第84页
       ·Southern blot分析EGFP第84页
       ·EGFP RNA表达分析第84-85页
       ·EGFP western blot蛋白表达分析第85-86页
   ·结果与分析第86-90页
     ·原生质体水平比较不同倍性材料荧光强度第86-87页
     ·不同倍性叶片组织荧光强度比较第87-89页
     ·EGFP western blot蛋白表达分析第89页
     ·EGFP RNA表达分析第89页
     ·Southern blot分析EGFP第89-90页
   ·讨论第90-92页
第四章 Mt-GFP融合基因转化不同倍性柑橘愈伤组织第92-103页
   ·引言第92页
   ·材料与方法第92-95页
     ·实验材料第92页
     ·菌株、质粒及试剂第92-93页
     ·试验方法第93-95页
       ·农杆菌介导柑橘遗传转化与转化子筛选、再生第93-94页
       ·GFP荧光检测第94页
       ·融合基因原生质体水平的共定位第94页
       ·抗性植株的分子鉴定第94-95页
   ·结果与分析第95-100页
     ·不同倍性转基因材料的转化和再生第95-98页
     ·转基因植株的分子鉴定第98-99页
     ·Mt-GFP融合基因亚细胞定位第99-100页
   ·讨论第100-101页
   ·论文创新点与后续研究第101-103页
参考文献第103-113页
附录Ⅰ AFLP(EcoRⅠ/MspⅠ),SSAP(EcoRⅠ/MspⅠ),MSAP(EcoRⅠ和HpaⅡ/MspⅠ)andMSTD(EcoRⅠ和HpaⅡ/MspⅠ)分析中接头、预扩增、选择扩增引物序列第113-114页
附录Ⅱ 不同倍性荧光强度差异比较第114-115页
附录Ⅲ 不同亚细胞定位GFP荧光表达比较第115-116页
附录Ⅳ 博士期间发表及待发表的论文第116-117页
致谢第117页

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