縮略词表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
前言 | 第13-17页 |
第一部分 独活寄生汤对体内大鼠膝骨性关节炎软骨细胞增殖与凋亡的影响 | 第17-41页 |
1 材料 | 第17-18页 |
·药物 | 第17页 |
·动物 | 第17页 |
·试剂 | 第17页 |
·仪器 | 第17页 |
·主要试剂的配制 | 第17-18页 |
2 方法 | 第18-24页 |
·实验药物工作液的制备 | 第18页 |
·骨性关节炎动物模型的复制与鉴定 | 第18页 |
·动物分组及给药 | 第18页 |
·动物取材及标本制备 | 第18页 |
·光镜、电镜观察OA大鼠关节软骨组织形态变化 | 第18-19页 |
·RT-PCR法检测OA大鼠关节软骨组织中Cyclin D1、CDK4、Rb和p16 mRNA表达 | 第19-22页 |
·免疫组化法检测OA大鼠关节软骨组织中Cyclin D1、CDK4、pRb和p16蛋白表达 | 第22-23页 |
·TUNEL法检测OA大鼠关节软骨组织中细胞凋亡情况 | 第23-24页 |
·免疫组化法检测OA大鼠关节软骨组织中Bcl-2、Bax、Cytochrome c、caspase-9及caspase-3蛋白表达 | 第24页 |
·统计学分析 | 第24页 |
3 结果 | 第24-35页 |
·骨性关节炎模型鉴定结果 | 第24页 |
·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织形态结构的影响 | 第24-27页 |
·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织Cyclin D1、CDK4、Rb和p16 mRNA表达的影响 | 第27-29页 |
·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织Cyclin D1、CDK4、pRb和p16蛋白表达的影响 | 第29-31页 |
·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨细胞凋亡的影响 | 第31-32页 |
·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织Bcl-2、Bax、Cytochrome c、caspase-9和caspase-3蛋白表达的影响 | 第32-35页 |
4 讨论 | 第35-41页 |
·骨性关节炎动物模型的复制与鉴定 | 第35-36页 |
·独活寄生汤组方依据 | 第36页 |
·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织形态结构的影响 | 第36-37页 |
·细胞周期中G_1/S限制点的调控机制 | 第37-38页 |
·独活寄生汤对细胞周期G1/S限制点相关调节因子的影响 | 第38-39页 |
·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨细胞凋亡的影响 | 第39页 |
·线粒体凋亡通路调控软骨细胞凋亡的作用机制 | 第39-40页 |
·独活寄生汤对线粒体凋亡通路相关调节因子的影响 | 第40-41页 |
第二部分 独活寄生汤含药血清对体外退变软骨细胞增殖与凋亡的影响 | 第41-65页 |
1 材料 | 第41-42页 |
·药物 | 第41页 |
·动物 | 第41页 |
·试剂 | 第41页 |
·仪器 | 第41-42页 |
·主要试剂的配制 | 第42页 |
2 方法 | 第42-48页 |
·不同采血时间点独活寄生汤含药血清的制备 | 第42页 |
·体外软骨细胞的培养与鉴定 | 第42-44页 |
·MTT法确定含药血清最佳采血时间点及干预软骨细胞最佳量效、时效关系 | 第44页 |
·大鼠退变软骨细胞模型的复制与鉴定 | 第44页 |
·含药血清干预退变软骨细胞的方法 | 第44页 |
·MTT法检测含药血清干预后退变软骨细胞增殖情况 | 第44页 |
·流式细胞术检测含药血清干预后退变软骨细胞周期分布 | 第44-45页 |
·RT-PCR法检测含药血清干预后退变软骨细胞CyclinD1、CDK4、Rb及p16 mRNA表达 | 第45页 |
·Western Blot法检测含药血清干预后退变软骨细胞CyclinD1、CDK4、pRb及p16蛋白表达 | 第45-47页 |
·Annexin V-FITC/PI染色流式检测含药血清干预后退变软骨细胞凋亡情况 | 第47页 |
·JC-1染色流式检测含药血清干预后退变软骨细胞线粒体膜电位的改变 | 第47页 |
·分光光度法检测含药血清干预后退变软骨细胞中caspase-9和caspase-3活性 | 第47-48页 |
·RT-PCR法检测含药血清干预后退变软骨细胞Bcl-2、Bax mRNA表达 | 第48页 |
·Western Blot法检测含药血清干预后退变软骨细胞Bcl-2、Bax蛋白表达 | 第48页 |
·统计学分析 | 第48页 |
3 结果 | 第48-59页 |
·软骨细胞形态结构变化 | 第48-49页 |
·软骨细胞的鉴定结果 | 第49-50页 |
·含药血清最佳采血时间、干预浓度与干预时间 | 第50-51页 |
·退变软骨细胞模型的鉴定结果 | 第51-52页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
·独活寄生汤含药血清对各组退变软骨细胞周期分布的影响 | 第53-54页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞Cyclin D1、CDK4、Rb及p16 mRNA表达的影响 | 第54-55页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞Cyclin D1、CDK4、pRb及p16蛋白表达的影响 | 第55-56页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞凋亡的影响 | 第56-57页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞线粒体膜电位改变的影响 | 第57页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞caspase-9和caspase-3活性的影响 | 第57-58页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞Bcl-2、Bax mRNA表达的影响 | 第58页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-65页 |
·软骨细胞的分离、培养与鉴定 | 第59-60页 |
·建立独活寄生汤含药血清的理论依据 | 第60-61页 |
·IL-1β诱导软骨细胞退变模型的建立与鉴定 | 第61-62页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞增殖的影响 | 第62-63页 |
·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞凋亡的影响 | 第63-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
文献综述 | 第73-77页 |
参考文献 | 第75-77页 |
作者简历 | 第77页 |