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独活寄生汤对骨性关节炎软骨细胞增殖与凋亡影响的实验研究

縮略词表第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-13页
前言第13-17页
第一部分 独活寄生汤对体内大鼠膝骨性关节炎软骨细胞增殖与凋亡的影响第17-41页
 1 材料第17-18页
   ·药物第17页
   ·动物第17页
   ·试剂第17页
   ·仪器第17页
   ·主要试剂的配制第17-18页
 2 方法第18-24页
   ·实验药物工作液的制备第18页
   ·骨性关节炎动物模型的复制与鉴定第18页
   ·动物分组及给药第18页
   ·动物取材及标本制备第18页
   ·光镜、电镜观察OA大鼠关节软骨组织形态变化第18-19页
   ·RT-PCR法检测OA大鼠关节软骨组织中Cyclin D1、CDK4、Rb和p16 mRNA表达第19-22页
   ·免疫组化法检测OA大鼠关节软骨组织中Cyclin D1、CDK4、pRb和p16蛋白表达第22-23页
   ·TUNEL法检测OA大鼠关节软骨组织中细胞凋亡情况第23-24页
   ·免疫组化法检测OA大鼠关节软骨组织中Bcl-2、Bax、Cytochrome c、caspase-9及caspase-3蛋白表达第24页
   ·统计学分析第24页
 3 结果第24-35页
   ·骨性关节炎模型鉴定结果第24页
   ·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织形态结构的影响第24-27页
   ·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织Cyclin D1、CDK4、Rb和p16 mRNA表达的影响第27-29页
   ·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织Cyclin D1、CDK4、pRb和p16蛋白表达的影响第29-31页
   ·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨细胞凋亡的影响第31-32页
   ·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织Bcl-2、Bax、Cytochrome c、caspase-9和caspase-3蛋白表达的影响第32-35页
 4 讨论第35-41页
   ·骨性关节炎动物模型的复制与鉴定第35-36页
   ·独活寄生汤组方依据第36页
   ·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨组织形态结构的影响第36-37页
   ·细胞周期中G_1/S限制点的调控机制第37-38页
   ·独活寄生汤对细胞周期G1/S限制点相关调节因子的影响第38-39页
   ·独活寄生汤对OA大鼠关节软骨细胞凋亡的影响第39页
   ·线粒体凋亡通路调控软骨细胞凋亡的作用机制第39-40页
   ·独活寄生汤对线粒体凋亡通路相关调节因子的影响第40-41页
第二部分 独活寄生汤含药血清对体外退变软骨细胞增殖与凋亡的影响第41-65页
 1 材料第41-42页
   ·药物第41页
   ·动物第41页
   ·试剂第41页
   ·仪器第41-42页
   ·主要试剂的配制第42页
 2 方法第42-48页
   ·不同采血时间点独活寄生汤含药血清的制备第42页
   ·体外软骨细胞的培养与鉴定第42-44页
   ·MTT法确定含药血清最佳采血时间点及干预软骨细胞最佳量效、时效关系第44页
   ·大鼠退变软骨细胞模型的复制与鉴定第44页
   ·含药血清干预退变软骨细胞的方法第44页
   ·MTT法检测含药血清干预后退变软骨细胞增殖情况第44页
   ·流式细胞术检测含药血清干预后退变软骨细胞周期分布第44-45页
   ·RT-PCR法检测含药血清干预后退变软骨细胞CyclinD1、CDK4、Rb及p16 mRNA表达第45页
   ·Western Blot法检测含药血清干预后退变软骨细胞CyclinD1、CDK4、pRb及p16蛋白表达第45-47页
   ·Annexin V-FITC/PI染色流式检测含药血清干预后退变软骨细胞凋亡情况第47页
   ·JC-1染色流式检测含药血清干预后退变软骨细胞线粒体膜电位的改变第47页
   ·分光光度法检测含药血清干预后退变软骨细胞中caspase-9和caspase-3活性第47-48页
   ·RT-PCR法检测含药血清干预后退变软骨细胞Bcl-2、Bax mRNA表达第48页
   ·Western Blot法检测含药血清干预后退变软骨细胞Bcl-2、Bax蛋白表达第48页
   ·统计学分析第48页
 3 结果第48-59页
   ·软骨细胞形态结构变化第48-49页
   ·软骨细胞的鉴定结果第49-50页
   ·含药血清最佳采血时间、干预浓度与干预时间第50-51页
   ·退变软骨细胞模型的鉴定结果第51-52页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞增殖的影响第52-53页
   ·独活寄生汤含药血清对各组退变软骨细胞周期分布的影响第53-54页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞Cyclin D1、CDK4、Rb及p16 mRNA表达的影响第54-55页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞Cyclin D1、CDK4、pRb及p16蛋白表达的影响第55-56页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞凋亡的影响第56-57页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞线粒体膜电位改变的影响第57页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞caspase-9和caspase-3活性的影响第57-58页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞Bcl-2、Bax mRNA表达的影响第58页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响第58-59页
 4 讨论第59-65页
   ·软骨细胞的分离、培养与鉴定第59-60页
   ·建立独活寄生汤含药血清的理论依据第60-61页
   ·IL-1β诱导软骨细胞退变模型的建立与鉴定第61-62页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞增殖的影响第62-63页
   ·独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞凋亡的影响第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-72页
致谢第72-73页
文献综述第73-77页
 参考文献第75-77页
作者简历第77页

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