目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-22页 |
·卵巢的功能 | 第12页 |
·卵泡发育与调控 | 第12-15页 |
·卵泡发育 | 第12-13页 |
·颗粒细胞对卵泡发育的调控 | 第13-14页 |
·卵泡闭锁 | 第14-15页 |
·Activin与卵泡发育 | 第15页 |
·microRNAs生成和作用机制 | 第15-17页 |
·microRNAs生成 | 第16页 |
·microRNAs作用机制 | 第16-17页 |
·卵巢中microRNAs的研究 | 第17-19页 |
·microRNAs与卵母细胞 | 第18页 |
·microRNAs与颗粒细胞 | 第18-19页 |
·mir-381的研究进展 | 第19-20页 |
·microRNAs与生殖疾病 | 第20-22页 |
2 研究目的及意义 | 第22-23页 |
3 材料与方法 | 第23-35页 |
·材料 | 第23-25页 |
·实验动物 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要溶液及缓冲液 | 第23-24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-35页 |
·不同发育阶段卵泡的获取 | 第25页 |
·卵泡microRNAs提取 | 第25-27页 |
·反转录cDNA | 第27页 |
·实时荧光定量PCR(QPCR) | 第27-28页 |
·颗粒细胞分离与收集 | 第28-29页 |
·颗粒细胞培养和传代 | 第29页 |
·颗粒细胞转染 | 第29-30页 |
·细胞增殖检测 | 第30页 |
·细胞周期检测 | 第30-31页 |
·流式细胞仪细胞凋亡检测 | 第31页 |
·靶基因预测 | 第31-34页 |
·统计分析 | 第34-35页 |
4 结果与分析 | 第35-49页 |
·卵泡不同发育阶段差异表达microRNAs的筛选 | 第35-36页 |
·mir-381等microRNAs在卵泡发育不同阶段差异表达的检测 | 第36-38页 |
·mir-381在小鼠卵巢不同时期颗粒细胞中的表达 | 第38-40页 |
·mir-381对小鼠颗粒细胞增殖的影响 | 第40-42页 |
·转染条件的优化 | 第40-41页 |
·转染mir-381 mimics/inhibitors对小鼠颗粒细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
·mir-381对小鼠颗粒细胞周期的影响 | 第42-43页 |
·mir-381对小鼠颗粒细胞凋亡的影响 | 第43-44页 |
·靶基因的初步预测 | 第44-49页 |
·mir-381模拟物或抑制物对颗粒细胞中acvr1和acvr2a表达水平的影响 | 第45-46页 |
·mir-381模拟物或抑制物对颗粒细胞中cdk2ap2、cdk-4和cdk-6表达水平的影响 | 第46-49页 |
5 讨论 | 第49-54页 |
·mir-381在小鼠卵泡和颗粒细胞中的表达 | 第49-51页 |
·mir-381对小鼠卵泡颗粒细胞的调控 | 第51-52页 |
·mir-381靶基因研究 | 第52-54页 |
6 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63页 |