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棉蚜类异戊二烯通路两个关键酶基因的克隆与功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
第一章 绪论第10-21页
   ·棉蚜简介第10-12页
   ·类异戊二烯通路研究进展第12-14页
   ·异戊烯基转移酶(IPPS)研究进展第14-15页
   ·十聚异戊二烯焦磷酸合成酶(DPPS)研究进展第15-17页
   ·牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(GGPPS)研究进展第17-19页
   ·本研究技术路线图第19-20页
   ·本研究的目的及意义第20-21页
第二章 棉蚜DPPS基因的克隆及分析第21-39页
   ·材料与方法第21-30页
     ·供试昆虫第21页
     ·主要试剂第21-22页
     ·主要仪器第22-23页
     ·技术路线第23页
     ·棉蚜DPPS1基因cDNA全长的克隆第23-29页
     ·棉蚜DPPS2基因cDNA全长的克隆第29-30页
     ·氨基酸序列比对及系统进化分析第30页
   ·结果与分析第30-38页
     ·棉蚜DPPS1基因cDNA全长序列的获得第30-32页
     ·棉蚜DPPS2基因cDNA全长序列的获得第32-33页
     ·棉蚜DPPS的氨基酸序列分析第33-36页
     ·棉蚜DPPS的系统进化分析第36-38页
   ·讨论第38-39页
第三章 棉蚜DPPS编码基因的原核表达和功能分析第39-68页
   ·材料与方法第39-55页
     ·供试昆虫第39页
     ·主要试剂第39-41页
     ·主要仪器第41页
     ·表达载体简介第41-45页
     ·pET28a-AgDPPS重组蛋白的表达第45-49页
     ·pET42a-AgDPPS重组蛋白的表达、纯化及GST标签的切除第49-51页
     ·棉蚜DPPS重组酶活性检测第51页
     ·棉蚜DPPS在大肠杆菌体内功能分析体系的构建第51-54页
     ·体内功能分析体系表达产物辅酶Q的提取和检测第54-55页
   ·结果与分析第55-66页
     ·pET28a-AgDPPS融合表达载体的构建、转化第55-56页
     ·pET28a-AgDPPS重组蛋白表达第56-58页
     ·pET28a-AgDPPS重组蛋白表达优化第58-59页
     ·pET42a-AgDPPS融合表达载体的构建第59-61页
     ·pET42a-AgDPPS重组蛋白的表达和纯化第61-62页
     ·棉蚜DPPS重组酶活性检测第62-63页
     ·棉蚜DPPS在大肠杆菌体内共表达体系构建第63-65页
     ·辅酶Q的提取与检测第65-66页
   ·讨论第66-68页
第四章 棉蚜GGPPS基因的克隆及分析第68-83页
   ·材料与方法第68-76页
     ·供试昆虫第68页
     ·主要试剂第68-69页
     ·主要仪器第69-70页
     ·技术路线第70页
     ·棉蚜GGPPS基因cDNA全长的克隆第70-75页
     ·氨基酸序列比对及系统进化分析第75-76页
   ·结果与分析第76-82页
     ·棉蚜GGPPS基因cDNA序列的获得第76-78页
     ·棉蚜GGPPS基因和氨基酸序列分析第78-80页
     ·棉蚜GGPPS系统进化分析第80-82页
   ·讨论第82-83页
第五章 棉蚜GGPPS编码基因的重组表达和功能分析第83-97页
   ·材料与方法第83-90页
     ·供试昆虫第83页
     ·主要试剂第83-84页
     ·主要仪器第84-85页
     ·表达载体简介第85页
     ·pET28a-AgGGPPS重组蛋白的表达第85-88页
     ·pET28a-AgGGPPS重组蛋白的纯化第88-89页
     ·棉蚜GGPPS重组酶活性检测第89-90页
   ·结果与分析第90-95页
     ·pET28a-AgGGPPS融合表达载体的构建、转化第90-92页
     ·pET28a-AgGGPPS重组蛋白表达和纯化第92-94页
     ·棉蚜GGPPS重组酶活性检测第94-95页
   ·讨论第95-97页
第六章 结论、创新点与展望第97-100页
   ·主要结论第97-98页
   ·创新点第98-99页
   ·展望第99-100页
参考文献第100-113页
其他研究工作第113-116页
致谢第116-118页
作者简介第118页

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