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鸭疫里默氏杆菌TonB1和TonB2基因缺失株的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 引言第12-17页
   ·革兰氏阴性细菌TonB 蛋白的结构与功能研究进展第12-15页
     ·TonB蛋白的结构及功能第12-14页
     ·TonB蛋白在革兰氏阴性菌获铁过程中的作用第14-15页
   ·目前鸭疫里默氏杆菌TonB蛋白的研究还是空白,相关研究将有助于解析鸭疫里默氏杆菌的分子致病机制第15-16页
   ·实验设想第16-17页
第二章 大肠杆菌-鸭疫里默氏杆菌穿梭载体pRES的构建第17-37页
   ·材料和方法第17-20页
     ·材料第17-19页
     ·方法第19-20页
   ·试验方法第20-28页
     ·鸭疫里默氏杆菌携带质粒的检测第20页
     ·鸭疫里默氏杆菌CH3 株推测的ompA基因启动子DNA序列的克隆与测序第20-21页
     ·鸭疫里默氏杆菌RA0726 质粒复制起始序列DNA(ori-0726)的克隆与测序第21-22页
     ·大肠杆菌-鸭疫里默氏杆菌穿梭载体pRES的构建第22-25页
     ·穿梭载体pRES稳定性检测第25-26页
     ·用pRES构建Th4△ompA缺失株的互补菌株第26-28页
   ·实验结果第28-36页
     ·不同鸭疫里默氏杆菌中质粒分布情况第28页
     ·鸭疫里默氏杆菌CH3 株推测的ompA启动子DNA片段的克隆第28-29页
     ·鸭疫里默氏杆菌pRA0726 质粒推测的复制起始区域DNA(oir-0726)的克隆第29页
     ·大肠杆菌-鸭疫里默氏杆菌穿梭载体pRES0 和pRES的构建第29-31页
     ·穿梭载体pRES的稳定性检测第31-33页
     ·Th4△ompA缺失株互补菌株的构建第33-36页
   ·讨论第36-37页
第三章 鸭疫里默氏杆菌TonB1 和TonB2 基因缺失株的构建第37-67页
   ·材料第37-39页
     ·菌株和载体第37页
     ·酶及试剂第37-38页
     ·引物设计第38-39页
   ·方法第39-47页
     ·鸭疫里默氏杆菌基因组的提取第39页
     ·鸭疫里默氏杆菌CH3 株TonB1 基因和TonB2 基因的克隆与测序第39-40页
     ·鸭疫里默氏杆菌CH3 株TonB1 和TonB2 基因缺失株的构建第40-44页
     ·缺失突变株CH3△TonB1 和CH3△TonB2 的互补株构建第44-45页
     ·CH3△TonB1 和CH3△TonB2 基因缺失株互补株的构建第45页
       ·鸭疫里默氏杆菌CH3△TonB1 和CH3△TonB2 基因缺失株的生物学特性研究第45-47页
   ·结果第47-64页
     ·CH3 株TonB1 基因缺失株和TonB2 基因缺失株的构建第47-54页
     ·CH3ΔTonB1 和CH3ΔTonB2 突变株的互补株构建第54-56页
     ·鸭疫里默氏杆菌CH3ΔTonB1 和CH3ΔTonB2 基因缺失株生长曲线的测定第56-57页
     ·TonB1 基因和TonB2 基因缺失对生物被膜形成的影响第57-58页
     ·TonB1 和TonB2 蛋白在鸭疫里默氏杆菌CH3 株铁摄取过程中起重要作用第58-60页
     ·铁离子的利用试验第60-62页
     ·鸭疫里默氏杆菌CH3、基因缺失株CH3ΔTonB1 和CH3ΔTonB2 和互补株cCH3ΔTonB1 和cCH3ΔTonB2 粘附与入侵Vero细胞试验第62-63页
     ·鸭疫里默氏杆菌CH3△TonB1 和CH3△TonB2 基因缺失株LD50的测定第63-64页
   ·讨论第64-67页
第四章 结论第67-68页
参考文献第68-75页
致谢第75-76页
作者简历第76页
硕士期间发表论文第76页

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