摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-15页 |
1 引言 | 第12页 |
2 30K蛋白抗细胞凋亡的研究进展 | 第12-13页 |
·30K蛋白抗昆虫细胞凋亡的研究进展 | 第12-13页 |
·30K蛋白抗哺乳动物细胞凋亡的研究进展 | 第13页 |
3 氧化应激相关通路的研究进展 | 第13-14页 |
4 动脉粥样硬化与人血管内皮细胞氧化应激损伤的关系 | 第14-15页 |
第二章 实验设计 | 第15-17页 |
1 研究目的和意义 | 第15页 |
2 研究内容 | 第15-16页 |
3 技术路线 | 第16-17页 |
第三章 家蚕30Kc6蛋白的表达和纯化 | 第17-24页 |
1 材料与试剂 | 第17-20页 |
·材料 | 第17页 |
·试剂 | 第17页 |
·试剂的配制 | 第17-20页 |
2 方法 | 第20-22页 |
·细胞培养、冻存与复苏 | 第20页 |
·家蚕30Kc6蛋白在家蚕BmN细胞中的表达 | 第20-21页 |
·家蚕30Kc6蛋白镍柱亲和层析纯化 | 第21页 |
·Bradford法进行蛋白定量 | 第21页 |
·家蚕30Kc6蛋白的Westernblotting检测 | 第21-22页 |
3 结果 | 第22-23页 |
·30Kc6纯化蛋白的Westernblotting鉴定 | 第22-23页 |
4 讨论 | 第23-24页 |
第四章 家蚕30Kc6蛋白对过氧化氢诱导的家蚕细胞凋亡的抑制作用 | 第24-34页 |
1 材料与试剂 | 第24-25页 |
·材料 | 第24页 |
·试剂 | 第24页 |
·试剂的配制 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-28页 |
·CellDeathDetectionELISAPLUS试剂盒检测细胞的DNA片段化 | 第25页 |
·CellProliferationELISA试剂盒检测细胞的活力 | 第25页 |
·H_2O_2诱导的BmN体外凋亡模型的建立 | 第25-26页 |
·家蚕30Kc6蛋白对BmN细胞活力影响的检测 | 第26页 |
·检测家蚕30Kc6对BmN细胞DNA片段化的影响 | 第26页 |
·ELISA法检测家蚕30K蛋白对HUVEC胞内8-isoprostane浓度的影响 | 第26-27页 |
·蛋白免疫印迹法检测细胞色素c的释放 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-32页 |
·H_2O_2诱导的BmN细胞凋亡模型 | 第28-29页 |
·家蚕30Kc6蛋白对BmN细胞活力的影响 | 第29页 |
·家蚕30Kc6蛋白对BmN细胞凋亡的影响 | 第29-30页 |
·家蚕30Kc6蛋白对BmN细胞内8-isoprostane浓度的影响 | 第30-31页 |
·家蚕30Kc6蛋白对H2O2诱导的细胞色素c释放的影响 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
第五章 家蚕30Kc6蛋白对Ox-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡的抑制作用 | 第34-43页 |
1 材料与试剂 | 第34-35页 |
·材料 | 第34页 |
·试剂 | 第34页 |
·试剂的配制 | 第34-35页 |
2 方法 | 第35-37页 |
·HUVEC细胞的冻存与复苏 | 第35页 |
·HUVEC的传代培养 | 第35页 |
·氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)的制备 | 第35页 |
·Ox-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡模型的建立 | 第35-36页 |
·家蚕30Kc6蛋白对Ox-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡的影响 | 第36页 |
·免疫印迹检测家蚕30Kc6蛋白对Ox-LDL诱导的HUVEC细胞的影响 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-40页 |
·Ox-LDL诱导HUVEC细胞凋亡模型的建立 | 第37-38页 |
·家蚕30Kc6蛋白对HUVEC凋亡模型的影响 | 第38页 |
·家蚕30Kc6蛋白对HUVEC细胞内8-isoprostan浓度变化的影响 | 第38-39页 |
·家蚕30Kc6蛋白通过调节JNK和p38MAPKinase信号通路抑制Ox-LDL诱导的HUVEC凋亡 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
第六章 口服家蚕30Kc6蛋白对动脉粥样硬化模型动物的影响 | 第43-52页 |
1 材料与试剂 | 第43-44页 |
·材料 | 第43页 |
·试剂 | 第43页 |
·试剂的配制 | 第43-44页 |
2 方法 | 第44-46页 |
·家蚕30Kc6蛋白在蚕蛹中的表达 | 第44页 |
·重组家蚕30Kc6蛋白的ELISA检测 | 第44-45页 |
·家蚕30Kc6蛋白标准曲线的绘制 | 第45页 |
·动物饲养及分组 | 第45页 |
·血脂检测 | 第45页 |
·标本留取 | 第45页 |
·组织石蜡切片(HE染色)制作过程 | 第45-46页 |
3 结果 | 第46-50页 |
·家蚕30Kc6蛋白在蚕蛹中表达及Westernblotting分析 | 第46-47页 |
·蚕蛹中重组家蚕30Kc6蛋白的定量分析 | 第47-48页 |
·口服家蚕30Kc6蚕蛹粉对高脂血症兔血清指标的影响 | 第48页 |
·家蚕30Kc6蚕蛹粉对兔主动脉病理学改变的影响 | 第48-49页 |
·家蚕30Kc6蚕蛹粉对兔肝脏病理学改变的影响 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
致谢 | 第57页 |