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家蚕30Kc6蛋白抗细胞凋亡作用机制及其对血管内皮细胞保护作用的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-11页
缩略语第11-12页
第一章 文献综述第12-15页
 1 引言第12页
 2 30K蛋白抗细胞凋亡的研究进展第12-13页
   ·30K蛋白抗昆虫细胞凋亡的研究进展第12-13页
   ·30K蛋白抗哺乳动物细胞凋亡的研究进展第13页
 3 氧化应激相关通路的研究进展第13-14页
 4 动脉粥样硬化与人血管内皮细胞氧化应激损伤的关系第14-15页
第二章 实验设计第15-17页
 1 研究目的和意义第15页
 2 研究内容第15-16页
 3 技术路线第16-17页
第三章 家蚕30Kc6蛋白的表达和纯化第17-24页
 1 材料与试剂第17-20页
   ·材料第17页
   ·试剂第17页
   ·试剂的配制第17-20页
 2 方法第20-22页
   ·细胞培养、冻存与复苏第20页
   ·家蚕30Kc6蛋白在家蚕BmN细胞中的表达第20-21页
   ·家蚕30Kc6蛋白镍柱亲和层析纯化第21页
   ·Bradford法进行蛋白定量第21页
   ·家蚕30Kc6蛋白的Westernblotting检测第21-22页
 3 结果第22-23页
   ·30Kc6纯化蛋白的Westernblotting鉴定第22-23页
 4 讨论第23-24页
第四章 家蚕30Kc6蛋白对过氧化氢诱导的家蚕细胞凋亡的抑制作用第24-34页
 1 材料与试剂第24-25页
   ·材料第24页
   ·试剂第24页
   ·试剂的配制第24-25页
 2 方法第25-28页
   ·CellDeathDetectionELISAPLUS试剂盒检测细胞的DNA片段化第25页
   ·CellProliferationELISA试剂盒检测细胞的活力第25页
   ·H_2O_2诱导的BmN体外凋亡模型的建立第25-26页
   ·家蚕30Kc6蛋白对BmN细胞活力影响的检测第26页
   ·检测家蚕30Kc6对BmN细胞DNA片段化的影响第26页
   ·ELISA法检测家蚕30K蛋白对HUVEC胞内8-isoprostane浓度的影响第26-27页
   ·蛋白免疫印迹法检测细胞色素c的释放第27-28页
 3 结果第28-32页
   ·H_2O_2诱导的BmN细胞凋亡模型第28-29页
   ·家蚕30Kc6蛋白对BmN细胞活力的影响第29页
   ·家蚕30Kc6蛋白对BmN细胞凋亡的影响第29-30页
   ·家蚕30Kc6蛋白对BmN细胞内8-isoprostane浓度的影响第30-31页
   ·家蚕30Kc6蛋白对H2O2诱导的细胞色素c释放的影响第31-32页
 4 讨论第32-34页
第五章 家蚕30Kc6蛋白对Ox-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡的抑制作用第34-43页
 1 材料与试剂第34-35页
   ·材料第34页
   ·试剂第34页
   ·试剂的配制第34-35页
 2 方法第35-37页
   ·HUVEC细胞的冻存与复苏第35页
   ·HUVEC的传代培养第35页
   ·氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)的制备第35页
   ·Ox-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡模型的建立第35-36页
   ·家蚕30Kc6蛋白对Ox-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡的影响第36页
   ·免疫印迹检测家蚕30Kc6蛋白对Ox-LDL诱导的HUVEC细胞的影响第36-37页
 3 结果第37-40页
   ·Ox-LDL诱导HUVEC细胞凋亡模型的建立第37-38页
   ·家蚕30Kc6蛋白对HUVEC凋亡模型的影响第38页
   ·家蚕30Kc6蛋白对HUVEC细胞内8-isoprostan浓度变化的影响第38-39页
   ·家蚕30Kc6蛋白通过调节JNK和p38MAPKinase信号通路抑制Ox-LDL诱导的HUVEC凋亡第39-40页
 4 讨论第40-43页
第六章 口服家蚕30Kc6蛋白对动脉粥样硬化模型动物的影响第43-52页
 1 材料与试剂第43-44页
   ·材料第43页
   ·试剂第43页
   ·试剂的配制第43-44页
 2 方法第44-46页
   ·家蚕30Kc6蛋白在蚕蛹中的表达第44页
   ·重组家蚕30Kc6蛋白的ELISA检测第44-45页
   ·家蚕30Kc6蛋白标准曲线的绘制第45页
   ·动物饲养及分组第45页
   ·血脂检测第45页
   ·标本留取第45页
   ·组织石蜡切片(HE染色)制作过程第45-46页
 3 结果第46-50页
   ·家蚕30Kc6蛋白在蚕蛹中表达及Westernblotting分析第46-47页
   ·蚕蛹中重组家蚕30Kc6蛋白的定量分析第47-48页
   ·口服家蚕30Kc6蚕蛹粉对高脂血症兔血清指标的影响第48页
   ·家蚕30Kc6蚕蛹粉对兔主动脉病理学改变的影响第48-49页
   ·家蚕30Kc6蚕蛹粉对兔肝脏病理学改变的影响第49-50页
 4 讨论第50-52页
结论第52-53页
参考文献第53-57页
致谢第57页

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