| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-17页 |
| ·多角体蛋白（polyhedron，Ph） | 第12-14页 |
| ·多角体病毒简述 | 第12-13页 |
| ·多角体蛋白 | 第13页 |
| ·家蚕核型多角体蛋白 | 第13-14页 |
| ·家蚕杆状病毒系统多角体蛋白高效表达的研究进展 | 第14-17页 |
| ·高效表达 | 第14-16页 |
| ·家蚕杆状病毒系统多角体蛋白的高效表达研究 | 第16-17页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第17-19页 |
| ·实验目的和意义 | 第17页 |
| ·实验研究内容 | 第17-18页 |
| ·含多角体部分片段的融合表达系统的构建以及 EGFP 的高效表达与溶解性研究 | 第17页 |
| ·融合多角体基因前后外源基因 mRNA 半衰期与高效表达的关系研究 | 第17-18页 |
| ·实验流程图 | 第18-19页 |
| 第三章 生物信息学分析 | 第19-25页 |
| ·生物信息学工具 | 第19页 |
| ·分析结果 | 第19-23页 |
| ·基本信息 | 第19-21页 |
| ·疏水性分析 | 第21-22页 |
| ·三级结构预测 | 第22-23页 |
| ·讨论 | 第23-25页 |
| 第四章 多角体基因片段与 EGFP 融合基因在大肠杆菌中的高效表达及溶解性分析 | 第25-40页 |
| ·材料与试剂 | 第25-26页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-31页 |
| ·克隆实验设计 | 第26页 |
| ·ph 基因不同片段的克隆 | 第26-29页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第29-30页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第30页 |
| ·三种融合蛋白的溶解性分析 | 第30-31页 |
| ·凝血酶酶切融合蛋白 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-37页 |
| ·BmNPV 基因组琼脂糖凝胶电泳结果 | 第31页 |
| ·ph 基因片段的克隆结果 | 第31-32页 |
| ·EGFP 基因克隆结果 | 第32页 |
| ·重组质粒的 PCR 和双酶切鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的诱导表达结果分析 | 第33-34页 |
| ·融合蛋白的溶解性分析 | 第34-36页 |
| ·凝血酶酶切三种融合蛋白的结果分析 | 第36-37页 |
| ·、讨论 | 第37-40页 |
| 第五章 三种多角体片段融合外源基因 MMGT 和 ABP 的高效表达以及融合蛋白的溶解性分析 | 第40-52页 |
| ·材料与试剂 | 第40页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·主要试剂的配制 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| ·克隆实验设计 | 第40页 |
| ·外源目的基因的克隆 | 第40-43页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第43页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析 | 第43页 |
| ·融合蛋白的溶解性分析 | 第43页 |
| ·凝血酶酶切融合蛋白 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-50页 |
| ·基因片段的克隆结果 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的 PCR 和双酶切鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白的诱导表达结果分析 | 第45-47页 |
| ·融合蛋白的溶解性分析 | 第47-49页 |
| ·融合蛋白凝血酶酶切验证 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第六章 融合多角体基因后对目的基因 mRNA 半衰期的影响 | 第52-75页 |
| ·材料和试剂 | 第52-53页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·试剂配制 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-58页 |
| ·实验设计 | 第53页 |
| ·家蚕细胞的培养 | 第53-54页 |
| ·荧光定量 PCR 标准曲线的建立 | 第54-55页 |
| ·转接重组病毒 | 第55页 |
| ·转录阻断时间的探索以及转录阻断 | 第55-56页 |
| ·细胞及所产生的病毒总 RNA 提取与检测 | 第56-57页 |
| ·RNase I 处理总 RNA | 第57页 |
| ·RNase I 处理后的总 RNA 逆转录成 cDNA | 第57-58页 |
| ·荧光定量 PCR 检测 cDNA 中目的基因的 mRNA | 第58页 |
| ·实验结果 | 第58-72页 |
| ·荧光定量 PCR 标准曲线的建立 | 第58-59页 |
| ·转录阻断时间探索 | 第59-61页 |
| ·RNA 纯度完整度和浓度 | 第61-63页 |
| ·荧光定量 PCR 检测各基因的 mRNA 含量以及半衰期 | 第63-72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
