| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 英文缩写词表 | 第14-15页 |
| A篇 文献综述 | 第15-45页 |
| 第一章 与猪链球菌致病相关的细菌表面结合蛋白和分泌因子的研究进展 | 第15-35页 |
| 1 S.suis细胞壁及细菌表面结合蛋白 | 第16-21页 |
| ·荚膜多糖(Capsular polysaccharide,CPS) | 第16-17页 |
| ·肽聚糖(Peptidoglycan) | 第17页 |
| ·菌毛(Pili) | 第17-18页 |
| ·分选酶(Sortases,SRT) | 第18页 |
| ·含有CWS(即LPXTG-基序)的细菌表面结合蛋白 | 第18-20页 |
| ·缺乏CWS的细菌表面结合蛋白 | 第20-21页 |
| 2 分泌因子 | 第21-26页 |
| ·溶血素(Suilysin,SLY) | 第21-24页 |
| ·磷脂酶C(Phospholipase C) | 第24页 |
| ·胞外因子(Extracellular factor protein,EF) | 第24-25页 |
| ·细菌素样抑制物(Bacteriocin-like inhibitory substances,BLISs) | 第25页 |
| ·IgG结合蛋白(Immunoglobulin G-binding prptein) | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-35页 |
| 第二章 胆固醇依赖溶细胞素研究进展 | 第35-45页 |
| 1 CDCs的共同特点 | 第35-36页 |
| 2 CDCs成员及在疾病中的作用 | 第36-38页 |
| 3 晶体结构 | 第38-39页 |
| 4 CDCs与膜的识别 | 第39-40页 |
| 5 孔的形成 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| B篇 试验研究 | 第45-107页 |
| 第三章 国内病猪中猪链球菌2型分离株溶血素基因的PCR检测及序列分析 | 第45-59页 |
| 摘要 | 第45-46页 |
| 1 材料与方法 | 第46-50页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·细菌培养 | 第46页 |
| ·细菌基因组DNA提取 | 第46页 |
| ·PCR | 第46-48页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第48页 |
| ·重组质粒T-sly的构建及鉴定 | 第48-50页 |
| ·同源性分析 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-53页 |
| ·PCR扩增 | 第50-52页 |
| ·重组质粒T-sly的鉴定 | 第52页 |
| ·同源性分析 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| ABSTRACT | 第57-59页 |
| 第四章 猪链球菌2型溶血素全长基因的原核表达及其生物学特性与免疫原性研究 | 第59-75页 |
| 摘要 | 第59-60页 |
| 1 材料与方法 | 第60-66页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·细菌培养 | 第61页 |
| ·细菌基因组DNA提取 | 第61页 |
| ·PCR | 第61-62页 |
| ·sly的AT克隆与鉴定 | 第62-63页 |
| ·pET32α-sly重组质粒构建 | 第63页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第63-64页 |
| ·重组蛋白的定位 | 第64页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第64-65页 |
| ·纯化蛋白的Western blotting鉴定 | 第65-66页 |
| ·纯化蛋白的溶血活性分析 | 第66页 |
| ·纯化蛋白的细胞毒性分析 | 第66页 |
| ·纯化蛋白的免疫保护性试验 | 第66页 |
| 2 结果 | 第66-70页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第66-67页 |
| ·诱导时间的确定 | 第67-68页 |
| ·表达蛋白的定位 | 第68页 |
| ·重组蛋白的Western blotting鉴定 | 第68-69页 |
| ·重组蛋白的溶血活性的检测 | 第69页 |
| ·重组蛋白的细胞毒性的检测 | 第69页 |
| ·重组蛋白的免疫保护性试验 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| ABSTRACT | 第73-75页 |
| 第五章 猪链球菌2型江苏分离株溶血素基因缺失株的构建 | 第75-89页 |
| 摘要 | 第75-76页 |
| 1 材料与方法 | 第76-81页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·细菌培养 | 第77页 |
| ·细菌基因组DNA提取 | 第77页 |
| ·基因缺失质粒的构建 | 第77-79页 |
| ·基因缺失株的构建 | 第79-81页 |
| 2 结果 | 第81-84页 |
| ·基因缺失质粒的构建 | 第81-82页 |
| ·JR0507(△SLY)的筛选和鉴定 | 第82-84页 |
| 3 讨论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-88页 |
| ABSTRACT | 第88-89页 |
| 第六章 猪链球菌2型江苏分离株溶血素基因缺失株的生物学特性及致病性分析 | 第89-107页 |
| 摘要 | 第89-90页 |
| 1 材料与方法 | 第90-96页 |
| ·菌种及细胞 | 第90页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第90页 |
| ·溶血活性检测 | 第90-91页 |
| ·生长特性分析 | 第91页 |
| ·生化特性鉴定 | 第91页 |
| ·动物致病性试验 | 第91-92页 |
| ·全血存活试验 | 第92页 |
| ·对PK-15、HEp-2和PIEC细胞的粘附作用 | 第92-93页 |
| ·对PK-15、HEp-2和PIEC细胞的毒性作用 | 第93-94页 |
| ·对3D4猪肺泡巨噬细胞炎症相关细胞因子的体外mRNA表达分析 | 第94-96页 |
| 2 结果 | 第96-101页 |
| ·溶血活性 | 第96页 |
| ·生长特性 | 第96-97页 |
| ·生化特性 | 第97-98页 |
| ·动物致病性 | 第98-99页 |
| ·全血存活试验 | 第99页 |
| ·对PK-15、HEp-2和PIEC细胞的粘附作用 | 第99-100页 |
| ·对PK-15、HEp-2和PIEC细胞的毒性作用 | 第100页 |
| ·对3D4猪肺泡巨噬细胞炎症相关细胞因子的体外mRNA表达分析 | 第100-101页 |
| 3 讨论 | 第101-103页 |
| ABSTRACT | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-107页 |
| 全文总结 | 第107-109页 |
| 致谢 | 第109-111页 |
| 攻读学位期间发表的主要学术论文目录 | 第111页 |
