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黄花梨及其绿皮芽变果皮发育特性和差异表达基因的克隆与功能分析

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-16页
缩略词第16-18页
引言第18-20页
第一章 文献综述第20-32页
 1 果树的芽变第20-21页
   ·果树芽变的遗传类型第20-21页
   ·果树芽变的特点第21页
 2 果树的芽变育种第21-24页
   ·果树芽变育种的意义第21-22页
   ·果树芽变选种第22页
   ·梨的芽变选种现状第22-24页
 3 果树芽变的研究第24-29页
   ·芽变的鉴定第24-27页
   ·芽变机理的研究第27-29页
 4 梨果皮色泽研究第29-32页
   ·梨果皮色泽类型第29页
   ·梨的果皮色泽遗传第29-30页
   ·梨绿皮与褐皮芽变第30页
   ·梨果皮结构与果点发育第30-31页
   ·木栓质与梨木栓质合成相关基因第31页
   ·砂梨褐皮和绿皮果皮差异表达基因的研究第31-32页
第二章 绿皮黄花梨的生物学特性第32-38页
 摘要第32页
 Abstract第32-33页
 1 材料与方法第33-34页
   ·实验材料第33页
   ·方法第33-34页
 2 结果与分析第34-36页
   ·植物学特征第34页
   ·开花习性第34页
   ·结果习性第34页
   ·绿皮黄花梨与黄花梨果实大小发育比较第34-35页
   ·果实性状第35-36页
 3 讨论第36-38页
第三章 黄花梨与绿皮黄花梨果皮发育特性和表皮膜特性研究第38-58页
 摘要第38页
 Abstract第38-40页
 1 材料与方法第40-43页
   ·材料与试剂第40页
   ·方法第40-43页
 2 结果与分析第43-54页
   ·黄花梨和绿皮黄花梨果点密度的变化第43-44页
   ·黄花梨和绿皮黄花梨果皮色泽的变化第44-45页
   ·不同发育时期黄花梨与绿皮黄花梨果皮的扫描电镜观察第45-46页
   ·不同发育时期梨果皮表皮膜的分离及显微观察第46-49页
   ·黄花梨与绿皮黄花梨成熟果实果皮结构特性研究第49-51页
   ·黄花梨与绿皮黄花梨成熟果实表皮膜结构特性研究第51-53页
   ·黄花梨与绿皮黄花梨果皮色泽与表皮膜颜色的关系第53-54页
 3 讨论第54-58页
   ·果点发育与果皮色泽第54-55页
   ·果点发育与成熟表皮膜的关系第55页
   ·褐皮梨果皮外层为木栓化细胞层而非木质化细胞层第55页
   ·褐皮梨表皮膜决定果实色泽,绿皮梨表皮膜不决定果实色泽第55-56页
   ·果皮中次生代谢产物的积累第56页
   ·褐色果皮的形成第56-58页
第四章 黄花梨褐色果皮与绿皮黄花梨果锈的比较研究第58-66页
 摘要第58页
 Abstract第58-59页
 1 材料和方法第59-60页
   ·材料第59页
   ·实验方法第59-60页
 2 结果与分析第60-65页
   ·色差参数分析第60-61页
   ·果皮表面显微观察第61页
   ·表皮膜观察第61-63页
   ·单位面积表皮膜重量第63-64页
   ·果皮背面石细胞团的观察第64-65页
 3 讨论第65-66页
   ·绿皮黄花梨深锈果皮与黄花梨褐色果皮第65页
   ·浅锈果皮与深锈果皮第65-66页
第五章 黄花梨与绿皮黄花梨果皮差异表达基因的克隆与序列分析第66-104页
 第一节 果皮中不同分子量RNA的分离研究第66-75页
  摘要第66页
  Abstract第66-67页
  1 材料与方法第67-71页
   ·植物材料第67页
   ·实验仪器与耗材第67页
   ·试剂第67-68页
   ·LMW RNA和HMW RNA的分离第68-69页
   ·LMW RNA和HMW RNA的检测第69页
   ·LMW RNA和HMW RNA的质量评价第69-71页
  2 结果与分析第71-74页
   ·果皮中LMW RNA和HMW RNA的分离第71-72页
   ·LMW RNA分离方法的评价第72-73页
   ·HMW RNA的RT-PCR验证第73-74页
  3 讨论第74-75页
 第二节 黄花与绿皮黄花果皮中差异表达基因PpyDFN1、PpyPAL1的克隆第75-91页
  摘要第75页
  Abstract第75-76页
  1 材料与方法第76-83页
   ·植物材料第76页
   ·菌株第76页
   ·仪器和药品第76-77页
   ·DH5α感受态细胞的制备第77页
   ·相关溶液配制第77-78页
   ·方法第78-83页
  2 结果与分析第83-90页
   ·黄花与绿皮黄花果皮HMW RNA的分离第83-84页
   ·RNA中痕量DNA的去除第84页
   ·DDRT-PCR克隆差异表达基因片段第84-85页
   ·差异基因片段的克隆与初步分析第85页
   ·黄花梨防御素基因PpyDFN1的克隆第85-87页
   ·黄花梨苯丙氨酸解氨酶基因PpyPAL1的克隆第87-89页
   ·荧光定量确定防御素基因PpyDFN1、PpyPAL1基因在花后8周的黄花与绿皮黄花果皮中的差异表达第89-90页
  3 讨论第90-91页
 第三节 黄花梨防御素PpyDFN1的序列分析与业细胞定位研究第91-104页
  摘要第91页
  Abstract第91-92页
  1 材料与方法第92-96页
   ·植物材料第92页
   ·菌株和载体第92页
   ·培养基第92-93页
   ·试剂第93页
   ·梨防御素基因序列分析第93页
   ·梨防御素基因的基因组序列克隆及分析第93-94页
   ·亚细胞定位第94-96页
  2 结果与分析第96-102页
   ·黄花梨防御素基因PpyDFN1的序列分析第96-100页
   ·黄花梨防御素基因PpyDFN1的基因组结构分析第100页
   ·PpyDFN1亚细胞定位观察第100-102页
  3 讨论第102-104页
   ·PpyDFN1的序列分析第102页
   ·PpyDFN1蛋白在细胞中的定位第102-104页
第六章 黄花梨和绿皮黄花梨果皮苯丙烷代谢相关基因PpyPAL1、PpyC4H和PpyCCR的表达分析第104-110页
 摘要第104页
 Abstract第104-105页
 1 材料与方法第105-106页
   ·植物材料第105页
   ·引物及相关试剂第105页
   ·方法第105-106页
 2 结果与分析第106-108页
   ·PpyPAL1在不同发育时期梨果皮中的表达第106-107页
   ·PpyC4H基因在不同发育时期梨果皮中的表达第107页
   ·PPyCCR基因在不同发育时期梨果皮中的表达第107-108页
 3 讨论第108-110页
第七章 黄花梨与绿皮黄花梨果皮差异表达基因PpyDFN1的表达分析第110-120页
 摘要第110页
 Abstract第110-111页
 1 材料与方法第111-114页
   ·植物材料第111-112页
   ·主要试剂和仪器第112页
   ·方法第112-114页
 2 结果与分析第114-118页
   ·黄花梨根的获得第114-115页
   ·黄花梨不同器官RNA的提取第115页
   ·PpyDFN1在不同器官中的表达分析第115页
   ·不同发育时期黄花与绿皮黄花果皮中PpyDFN1的表达分析第115-117页
   ·不同诱导条件下PpyDFN1的表达分析第117-118页
 3. 讨论第118-120页
第八章 PpyDFN1的功能分析第120-136页
 摘要第120页
 Abstract第120-121页
 1 材料与方法第121-126页
   ·菌株和载体第121页
   ·培养基第121-122页
   ·试剂第122页
   ·方法第122-126页
 2 结果与分析第126-133页
   ·黄花梨防御素基因PpyDFN1植物双元表达载体的构建第126-127页
   ·转基因烟草株系的获得第127-129页
   ·烟草叶片的抗病性研究第129-130页
   ·烟草生长发育及表型观察第130-132页
   ·烟草幼苗根系生长的抑制第132-133页
   ·烟草中PpyDFN1的提取及对农杆菌EHA105的抑制第133页
 3 讨论第133-136页
   ·PpyDFN1抑菌作用第133-134页
   ·PpyDFN1对生长发育调节作用第134页
   ·PpyDFN1在梨果皮发育中作用第134-136页
全文结论第136-138页
创新点第138-140页
参考文献第140-156页
附录第156-164页
攻读学位期间发表的文章第164-166页
致谢第166页

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