| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-38页 |
| 1 低温胁迫与形态组织结构 | 第16页 |
| 2 低温胁迫与光合特性和抗氧化调节 | 第16-17页 |
| 3 低温与细胞膜代谢 | 第17-18页 |
| 4 低温胁迫与激素调节 | 第18-21页 |
| 5 低温胁迫与渗透调节 | 第21-26页 |
| ·氨基酸代谢 | 第21-22页 |
| ·糖代谢 | 第22-23页 |
| ·次生代谢 | 第23页 |
| ·抗冻功能蛋白 | 第23-26页 |
| 6 DREB/CBF路径与抗冻性 | 第26-31页 |
| ·拟南芥DREB/CBF转录因子 | 第26-28页 |
| ·其它物种DREB/CBF转录因子 | 第28-29页 |
| ·DREB/CBF上游调控因子 | 第29-31页 |
| 7 非CBF调节路径 | 第31-35页 |
| ·不依赖CBF转录因子 | 第31-32页 |
| ·RNA分子伴侣调控抗冻性 | 第32-33页 |
| ·mRNA剪切与抗寒性 | 第33-34页 |
| ·小RNAs与抗寒性 | 第34-35页 |
| 8 本研究的主要内容与技术路线 | 第35-38页 |
| 第二章 菊花近缘种属植物抗寒性评价与分析 | 第38-56页 |
| 第一节 45份菊花近缘种属植物的抗寒性评价 | 第38-45页 |
| 摘要 | 第38-39页 |
| 1 材料与方法 | 第39-40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-44页 |
| 3 讨论 | 第44-45页 |
| 第二节 冷驯化诱导菊属植物抗冻性的生理及分子机制 | 第45-56页 |
| 摘要 | 第45-46页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-52页 |
| 3 讨论 | 第52-56页 |
| 第三章 异色菊CdDREBa启动子克隆与功能分析 | 第56-68页 |
| 摘要 | 第56-57页 |
| 1 材料与方法 | 第57-61页 |
| ·植物材料与菌株 | 第57页 |
| ·CdDREBa启动子克隆与序列分析 | 第57-59页 |
| ·5’-连续缺失启动子表达载体构建 | 第59页 |
| ·功能获得型启动子表达载体构建 | 第59-60页 |
| ·内部缺失启动子表达载体构建 | 第60页 |
| ·拟南芥转化与筛选 | 第60页 |
| ·低温和盐胁迫处理 | 第60页 |
| ·GUS活性分析 | 第60-61页 |
| ·统计分析 | 第61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-67页 |
| ·CdDREBa启动子克隆、序列分析与转基因拟南芥检测 | 第61-63页 |
| ·CdDREBa启动子对低温和盐胁迫的响应分析 | 第63页 |
| ·CdDREBa启动子中对低温和盐胁迫正向和负向调控元件 | 第63-65页 |
| ·启动子-430～-351 bp区间包含的可能元件分析 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-68页 |
| 第四章 异色菊CdICE1基因克隆与表达分析 | 第68-82页 |
| 摘要 | 第68-69页 |
| 1 材料与方法 | 第69-73页 |
| ·植物材料、表达载体与菌株 | 第69页 |
| ·异色菊CdICE1基因及其启动子区克隆 | 第69-70页 |
| ·CdICE1亚细胞定位、不同组织以及响应不同胁迫的表达特性分析 | 第70-71页 |
| ·CdICE1白与CdDREBa启动子区MYC元件的结合分析 | 第71-72页 |
| ·转录激活活性分析 | 第72-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-80页 |
| ·异色菊CdICE1基因及启动子克隆 | 第73页 |
| ·CdICE1启动子序列分析 | 第73-77页 |
| ·CdICE1位及表达特征分析 | 第77-78页 |
| ·CdICE1真核表达及凝胶阻滞实验检测连接活性 | 第78-80页 |
| ·CdICE1转录激活活性分析 | 第80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| 第五章 异源表达CdICE1基因提高拟南芥抗冻性 | 第82-94页 |
| 摘要 | 第82-83页 |
| 1 与方法 | 第83-86页 |
| ·植物材料与表达载体 | 第83页 |
| ·载体构建、遗传转化和拟南芥筛选 | 第83页 |
| ·拟南芥低温处理 | 第83-84页 |
| ·荧光定量PCR分析 | 第84-86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-92页 |
| ·转基因植株筛选与鉴定 | 第86-87页 |
| ·抗冻性评价 | 第87-88页 |
| ·CBFs及下游抗冻基因的表达分析 | 第88-90页 |
| ·miR398-CSDs调控抗冻性 | 第90-91页 |
| ·CdICE1下调miR398 | 第91-92页 |
| 3 讨论 | 第92-94页 |
| 第六章 菊花低温cDNA酵母文库构建及CdICE1互作蛋白的筛选 | 第94-102页 |
| 摘要 | 第94-95页 |
| 1 材料与方法 | 第95-96页 |
| ·材料 | 第95页 |
| ·RNA提取及mRNA纯化 | 第95页 |
| ·cDNA合成、扩增及双链cDNA纯化 | 第95页 |
| ·酵母文库构建 | 第95-96页 |
| ·CdICE1互作蛋白的筛选 | 第96页 |
| ·阳性克隆的鉴定与序列分析 | 第96页 |
| 2 结果与分析 | 第96-100页 |
| ·酵母cDNA文库构建 | 第96-98页 |
| ·阳性候选克隆的鉴定 | 第98页 |
| ·候选互作蛋白的序列分析 | 第98-100页 |
| 3 讨论 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-138页 |
| 全文结论 | 第138-140页 |
| 创新点 | 第140-142页 |
| 附录 | 第142-160页 |
| 攻读学位期间发表论文、申请专利品种及参与的科研项目 | 第160-164页 |
| 致谢 | 第164页 |
