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表达H5N1禽流感病毒HA基因重组腺病毒的构建及免疫保护性研究

目录第1-6页
CONTENTS第6-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-22页
   ·禽流感病毒概况第12-14页
     ·禽流感病毒的结构特点第12-13页
     ·病毒病原性的决定因素第13-14页
     ·H5N1 亚型高致病性禽流感病毒的发展历史及现状第14页
   ·禽流感疫苗的研究进展第14-17页
     ·细胞源性全病毒灭活疫苗第14-15页
     ·VLPS 疫苗第15页
     ·DNA 疫苗第15页
     ·病毒活载体疫苗第15-17页
   ·腺病毒表达系统第17-21页
     ·腺病毒的结构及感染机理第17-18页
     ·腺病毒表达系统的构建第18-20页
     ·腺病毒载体的优点第20页
     ·腺病毒表达系统在禽流感疫苗中的应用第20-21页
   ·研究的目的和意义第21-22页
2 材料与方法第22-32页
   ·试验材料第22-23页
     ·病毒株、菌株、细胞与实验动物第22页
     ·载体和疫苗第22页
     ·生物学试剂第22页
     ·主要仪器第22-23页
     ·分子生物学软件第23页
   ·试验方法第23-32页
     ·PCR 引物设计与合成第23页
     ·重组腺病毒穿梭质粒 pShuttle-CMV-HA 的构建第23-25页
     ·重组腺病毒质粒 pAdEasy-HA 的构建第25-26页
     ·重组腺病毒 rAd-HA 的制备第26-27页
     ·重组腺病毒 rAd-HA 的鉴定第27-28页
     ·重组腺病毒的浓缩纯化及滴度测定第28-29页
     ·rAd-SD628-HA 对 BALB/c 小鼠的免疫效力第29-30页
     ·rAd-SD628-HA 对 SPF 鸡的免疫效力第30-32页
3 结果第32-43页
   ·重组质粒的构建及鉴定第32-34页
     ·HA 基因的扩增第32页
     ·重组腺病毒穿梭质粒 pShuttle-CMV-HA 的鉴定第32-33页
     ·重组腺病毒质粒 pAdEasy-HA 的鉴定第33-34页
   ·第34-37页
     ·重组腺病毒的形态学观察第34-35页
     ·rAd-HA 在 AD293 细胞中的转录鉴定第35页
     ·HA 蛋白表达的间接免疫荧光鉴定第35-36页
     ·HA 蛋白表达的 western blot 鉴定第36-37页
   ·第37页
     ·腺病毒纯化试剂盒浓缩纯化腺病毒第37页
     ·重组腺病毒 rAd-HA 的 TCID50的测定第37页
   ·重组腺病毒活载体疫苗免疫效果的评价第37-43页
     ·BALB/c 小鼠免疫效果评价第37-39页
     ·SPF 鸡免疫效果评价第39-43页
4 讨论第43-45页
5 全文结论第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-54页
附录第54-56页
攻读硕士期间发表的论文第56页

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