目录 | 第1-6页 |
CONTENTS | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-22页 |
·禽流感病毒概况 | 第12-14页 |
·禽流感病毒的结构特点 | 第12-13页 |
·病毒病原性的决定因素 | 第13-14页 |
·H5N1 亚型高致病性禽流感病毒的发展历史及现状 | 第14页 |
·禽流感疫苗的研究进展 | 第14-17页 |
·细胞源性全病毒灭活疫苗 | 第14-15页 |
·VLPS 疫苗 | 第15页 |
·DNA 疫苗 | 第15页 |
·病毒活载体疫苗 | 第15-17页 |
·腺病毒表达系统 | 第17-21页 |
·腺病毒的结构及感染机理 | 第17-18页 |
·腺病毒表达系统的构建 | 第18-20页 |
·腺病毒载体的优点 | 第20页 |
·腺病毒表达系统在禽流感疫苗中的应用 | 第20-21页 |
·研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-32页 |
·试验材料 | 第22-23页 |
·病毒株、菌株、细胞与实验动物 | 第22页 |
·载体和疫苗 | 第22页 |
·生物学试剂 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·分子生物学软件 | 第23页 |
·试验方法 | 第23-32页 |
·PCR 引物设计与合成 | 第23页 |
·重组腺病毒穿梭质粒 pShuttle-CMV-HA 的构建 | 第23-25页 |
·重组腺病毒质粒 pAdEasy-HA 的构建 | 第25-26页 |
·重组腺病毒 rAd-HA 的制备 | 第26-27页 |
·重组腺病毒 rAd-HA 的鉴定 | 第27-28页 |
·重组腺病毒的浓缩纯化及滴度测定 | 第28-29页 |
·rAd-SD628-HA 对 BALB/c 小鼠的免疫效力 | 第29-30页 |
·rAd-SD628-HA 对 SPF 鸡的免疫效力 | 第30-32页 |
3 结果 | 第32-43页 |
·重组质粒的构建及鉴定 | 第32-34页 |
·HA 基因的扩增 | 第32页 |
·重组腺病毒穿梭质粒 pShuttle-CMV-HA 的鉴定 | 第32-33页 |
·重组腺病毒质粒 pAdEasy-HA 的鉴定 | 第33-34页 |
· | 第34-37页 |
·重组腺病毒的形态学观察 | 第34-35页 |
·rAd-HA 在 AD293 细胞中的转录鉴定 | 第35页 |
·HA 蛋白表达的间接免疫荧光鉴定 | 第35-36页 |
·HA 蛋白表达的 western blot 鉴定 | 第36-37页 |
· | 第37页 |
·腺病毒纯化试剂盒浓缩纯化腺病毒 | 第37页 |
·重组腺病毒 rAd-HA 的 TCID50的测定 | 第37页 |
·重组腺病毒活载体疫苗免疫效果的评价 | 第37-43页 |
·BALB/c 小鼠免疫效果评价 | 第37-39页 |
·SPF 鸡免疫效果评价 | 第39-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
5 全文结论 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
附录 | 第54-56页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第56页 |