| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-15页 |
| ·缺硒对鸡肝脏的影响 | 第11页 |
| ·硒蛋白 W 的抗氧化功能 | 第11-12页 |
| ·肝脏氧化损伤与细胞因子的关系 | 第12-13页 |
| ·肝脏氧化损伤与凋亡因子的关系 | 第13-14页 |
| ·试验的目的和意义 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-22页 |
| ·实验的总体设计 | 第15页 |
| ·体内实验 | 第15页 |
| ·体外实验 | 第15页 |
| ·试验的主要试剂及仪器 | 第15-17页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要试剂的配制 | 第15-16页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·试验方法 | 第17-21页 |
| ·鸡肝脏细胞的培养 | 第17页 |
| ·鸡肝脏细胞的鉴定 | 第17页 |
| ·肝脏细胞过氧化氢 IC50的检测 | 第17页 |
| ·构建 SelW 过表达肝脏细胞模型 | 第17-18页 |
| ·构建 SelW 沉默肝脏细胞模型 | 第18-19页 |
| ·过氧化氢诱导细胞凋亡的 TUNEL 检测法 | 第19页 |
| ·建立肝脏中相关基因 mRNA 水平检测的实时荧光定量 PCR 方法 | 第19-20页 |
| ·肝脏 NF-кB、COX-2、PTGEs 及 SelW 蛋白表达的免疫印记检测法 | 第20-21页 |
| ·试验数据的分析与统计 | 第21-22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-39页 |
| ·鸡原代肝脏细胞体外培养及鉴定结果 | 第22-23页 |
| ·肝脏细胞过氧化氢 IC_(50)的测定及形态学观察结果 | 第23-24页 |
| ·鸡肝脏原代细胞 SelW 过表达条件的优化结果 | 第24页 |
| ·细胞干扰条件的优化结果 | 第24-26页 |
| ·过氧化氢诱导细胞凋亡的 TUNEL 法检测结果 | 第26-27页 |
| ·实时定量 PCR 检测方法的建立的结果 | 第27-29页 |
| ·鸡肝脏细胞转染 SelW 基因后 SelW mRNA 的检测结果 | 第29-30页 |
| ·鸡肝脏细胞过表达 SelW 基因后 SelW mRNA 的检测结果 | 第29页 |
| ·鸡肝脏细胞沉默 SelW 基因后 SelW mRNA 的检测结果 | 第29-30页 |
| ·双氧水处理的过表达与沉默 SelW 基因后鸡肝脏细胞中炎症及细胞因子 mRNA 表达的检测结果 | 第30-33页 |
| ·双氧水处理的过表达与沉默 SelW 基因后鸡肝脏细胞中炎症因子 mRNA 表达的检测结果 | 第30-32页 |
| ·双氧水处理的过表达与沉默 SelW 基因后鸡肝脏细胞中细胞因子 mRNA 表达的检测结果 | 第32-33页 |
| ·双氧水处理的过表达与沉默 SelW 基因后鸡肝脏细胞中凋亡因子 mRNA 表达的检测结果 | 第33-34页 |
| ·双氧水处理的过表达与沉默 SelW 基因后鸡肝脏细胞中 cox-2、PTGE 和 NF-кB 蛋白表达的检测结果 | 第34-35页 |
| ·低硒饲喂鸡肝脏中炎症因子 mRNA 表达的结果 | 第35-36页 |
| ·低硒饲喂鸡肝脏中凋亡因子 mRNA 表达的检测结果 | 第36-37页 |
| ·低硒饲喂鸡肝脏中细胞因子 mRNA 表达的检测结果 | 第37-38页 |
| ·低硒饲喂鸡肝脏中 cox-2、PGE2、NF-кB 蛋白表达的检测结果 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-44页 |
| ·鸡肝脏原代细胞体外培养与转染优化 | 第39-41页 |
| ·鸡肝脏原代细胞体外培养与鉴定 | 第39页 |
| ·细胞转染条件的优化 | 第39-41页 |
| ·鸡 SelW 对肝脏中炎症因子表达的影响 | 第41页 |
| ·鸡 SelW 对肝脏中细胞因子表达的影响 | 第41-42页 |
| ·鸡 SelW 对肝脏中凋亡因子表达的影响 | 第42-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
