摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-23页 |
·犬瘟热病毒研究进展 | 第11-15页 |
·犬瘟热病毒的生物学特性 | 第11-12页 |
·犬瘟热病毒的基因组结构 | 第12页 |
·犬瘟热病毒结构蛋白及其功能 | 第12-15页 |
·犬瘟热概述 | 第15-16页 |
·临床症状 | 第15-16页 |
·流行病学 | 第16页 |
·犬瘟热病毒受体的研究进展 | 第16-17页 |
·犬瘟热病毒的分离培养 | 第17-19页 |
·原代细胞 | 第17-18页 |
·传代细胞 | 第18页 |
·稳定表达 SLAM 的细胞系 | 第18-19页 |
·犬瘟热病毒的检测 | 第19-20页 |
·病原检查 | 第19页 |
·免疫学诊断 | 第19-20页 |
·分子生物学诊断 | 第20页 |
·犬瘟热病毒的防治 | 第20-21页 |
·疫苗免疫 | 第21页 |
·临床治疗 | 第21页 |
·研究目的及意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-37页 |
·实验材料 | 第23-26页 |
·菌株、毒株、质粒及细胞系 | 第23页 |
·病料来源 | 第23页 |
·PCR 扩增引物 | 第23-24页 |
·主要试剂 | 第24-25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-37页 |
·稳定表达 SLAM 的 BHK-21/SLAM 细胞系的建立 | 第26-33页 |
·细胞培养物中 CDV 病毒载量的检测 | 第33-35页 |
·CDV 流行毒株的分离 | 第35-36页 |
·不同 CDV 毒株生长情况比较 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-49页 |
·稳定表达 SLAM 的 BHK-21/SLAM 细胞系的建立 | 第37-43页 |
·犬 SLAM 基因的克隆 | 第37页 |
·重组真核表达载体的构建 | 第37-39页 |
·G418 最适浓度的确定 | 第39页 |
·转染细胞的免疫荧光检测 | 第39-40页 |
·转染细胞的 SLAM mRNA 的检测 | 第40-41页 |
·SLAM 蛋白的 Western Blot 检测 | 第41-42页 |
·病毒滴度的测定 | 第42-43页 |
·细胞生长特性的检测 | 第43页 |
·细胞培养物中 CDV 病毒载量的检测 | 第43-45页 |
·实时荧光定量 PCR 的标准曲线和熔解曲线 | 第43-44页 |
·不同细胞感染后病毒载量检测 | 第44-45页 |
·CDV 流行毒株的分离 | 第45-47页 |
·不同 CDV 毒株生长情况比较 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-53页 |
·CDV 受体和亲本细胞系的选择 | 第49-50页 |
·真核表达载体的选择 | 第50页 |
·应用 BHK-21/SLAM 细胞分离及培养不同 CDV 毒株 | 第50-51页 |
·实时荧光定量 PCR 在 CDV 检测上的应用 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-66页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66页 |