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稳定表达犬瘟热病毒受体SLAM的BHK-21细胞系的建立

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-23页
   ·犬瘟热病毒研究进展第11-15页
     ·犬瘟热病毒的生物学特性第11-12页
     ·犬瘟热病毒的基因组结构第12页
     ·犬瘟热病毒结构蛋白及其功能第12-15页
   ·犬瘟热概述第15-16页
     ·临床症状第15-16页
     ·流行病学第16页
   ·犬瘟热病毒受体的研究进展第16-17页
   ·犬瘟热病毒的分离培养第17-19页
     ·原代细胞第17-18页
     ·传代细胞第18页
     ·稳定表达 SLAM 的细胞系第18-19页
   ·犬瘟热病毒的检测第19-20页
     ·病原检查第19页
     ·免疫学诊断第19-20页
     ·分子生物学诊断第20页
   ·犬瘟热病毒的防治第20-21页
     ·疫苗免疫第21页
     ·临床治疗第21页
   ·研究目的及意义第21-23页
2 材料与方法第23-37页
   ·实验材料第23-26页
     ·菌株、毒株、质粒及细胞系第23页
     ·病料来源第23页
     ·PCR 扩增引物第23-24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·主要仪器第25-26页
   ·实验方法第26-37页
     ·稳定表达 SLAM 的 BHK-21/SLAM 细胞系的建立第26-33页
     ·细胞培养物中 CDV 病毒载量的检测第33-35页
     ·CDV 流行毒株的分离第35-36页
     ·不同 CDV 毒株生长情况比较第36-37页
3 结果第37-49页
   ·稳定表达 SLAM 的 BHK-21/SLAM 细胞系的建立第37-43页
     ·犬 SLAM 基因的克隆第37页
     ·重组真核表达载体的构建第37-39页
     ·G418 最适浓度的确定第39页
     ·转染细胞的免疫荧光检测第39-40页
     ·转染细胞的 SLAM mRNA 的检测第40-41页
     ·SLAM 蛋白的 Western Blot 检测第41-42页
     ·病毒滴度的测定第42-43页
     ·细胞生长特性的检测第43页
   ·细胞培养物中 CDV 病毒载量的检测第43-45页
     ·实时荧光定量 PCR 的标准曲线和熔解曲线第43-44页
     ·不同细胞感染后病毒载量检测第44-45页
   ·CDV 流行毒株的分离第45-47页
   ·不同 CDV 毒株生长情况比较第47-49页
4 讨论第49-53页
   ·CDV 受体和亲本细胞系的选择第49-50页
   ·真核表达载体的选择第50页
   ·应用 BHK-21/SLAM 细胞分离及培养不同 CDV 毒株第50-51页
   ·实时荧光定量 PCR 在 CDV 检测上的应用第51-53页
5 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-66页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第66页

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