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基于核酸内切酶及RNA连接酶的循环放大检测DNA及肿瘤细胞

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-19页
第一章 前言第19-43页
   ·DNA 简介第20-23页
     ·DNA 的组成第20-21页
     ·DNA 的结构第21-22页
     ·DNA 的变性与复性第22-23页
   ·逻辑门第23-24页
   ·核酸内切酶第24-26页
     ·限制性内切酶简介第24-25页
     ·限制性内切酶作用第25-26页
     ·酶切分析应用第26页
   ·适体第26-28页
     ·适体简介第26-27页
     ·适体的特点第27-28页
   ·化学发光分析(CL)第28-31页
     ·化学分光分析的基本原理第28-29页
     ·化学发光分析的常见体系第29-31页
   ·荧光分析法(FL)第31-34页
   ·肿瘤细胞第34-37页
     ·细胞的基础知识第34-35页
     ·适体用于肿瘤细胞检测第35-37页
   ·电泳简介第37-39页
     ·概述第37页
     ·技术原理第37-38页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第38-39页
   ·RNA 连接酶第39-41页
   ·课题立项依据及研究内容第41-43页
第二章 基于信号放大的 DNA 化学发光逻辑门的研究第43-60页
 摘要第43-44页
   ·引言第44-45页
   ·实验部分第45-49页
     ·仪器与试剂第45-47页
     ·实验方法第47-49页
       ·巯基 DNA 的前处理与修饰第47-48页
       ·链 G1/G2 与输入信号 I1、I2、I3 链的杂交反应第48-49页
       ·化学发光检测第49页
   ·结果与讨论第49-58页
     ·实验原理第49-52页
     ·反应条件对化学发光的影响第52-54页
     ·不同进样方式对化学发光的影响第54页
     ·体系反应条件的优化第54-55页
     ·线性范围第55-56页
     ·各 I1、I2、I3 链存在不同情况下测信号第56-57页
     ·“与”门(AND)逻辑操作第57-58页
   ·小结第58-60页
第三章 级联循环放大荧光 DNA“或”门的研究第60-78页
 摘要第60-61页
   ·引言第61-62页
   ·实验部分第62-68页
     ·仪器与试剂第62-64页
     ·实验方法第64-68页
       ·磁珠的洗涤与 DNA 修饰第64-65页
       ·链 G1/G2 与 I1、I2、I3 的杂交第65页
       ·DNA 荧光检测第65-66页
       ·DNA 电泳表征第66-68页
   ·结果与讨论第68-77页
     ·实验原理第68-71页
     ·反应条件的优化第71-73页
     ·检测的线性范围第73-74页
     ·“或”门操作第74-75页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第75-77页
   ·小结第77-78页
第四章 利用 RNA 自身催化能力检测肿瘤细胞的研究第78-102页
 摘要第78页
   ·引言第78-82页
   ·实验部分第82-90页
     ·仪器与试剂第82-84页
     ·荧光实验方法第84-87页
       ·磁珠的洗涤与 DNA 修饰第84-85页
       ·细胞与适体结合取代 S2第85页
       ·加入荧光基团修饰的 S3第85-86页
       ·荧光检测第86-87页
     ·化学发光实验方法第87-89页
       ·磁珠的洗涤与 DNA 修饰第87-88页
       ·细胞与适体结合取代 S2第88页
       ·加入磁珠修饰了的 DNA S1’第88-89页
       ·化学发光检测第89页
     ·癌细胞的培养第89-90页
   ·结果与讨论第90-101页
     ·实验原理第90-92页
     ·反应条件对化学发光的影响第92-96页
       ·luminol 浓度的选择第92-93页
       ·H_2O_2浓度的选择第93-94页
       ·缓冲溶液 pH 值的选择第94-95页
       ·细胞与适体反应时间的选择第95-96页
     ·用荧光做 S2 的单独实验第96-97页
     ·用化学发光做 S2 单独实验第97-98页
     ·荧光法测细胞第98-100页
     ·化学发光法测细胞第100-101页
   ·小结第101-102页
第五章 结论第102-105页
参考文献第105-117页
致谢第117-118页
附录:攻读硕士学位期间已发表和待发表的学术论文目录第118-119页

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