高山离子芥冷诱导基因在甘蔗上的遗传转化研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-24页 |
| ·甘蔗概述 | 第10-12页 |
| ·甘蔗育种现状 | 第10-11页 |
| ·甘蔗冷害 | 第11-12页 |
| ·植物抗寒机理研究进展 | 第12-14页 |
| ·植物耐冷的分子机制 | 第12-13页 |
| ·与冷相关蛋白的种类 | 第13-14页 |
| ·冷调节基因COR的研究 | 第14-15页 |
| ·COR基因的发现 | 第14页 |
| ·COR基因的特性 | 第14-15页 |
| ·转基因技术的分类 | 第15-21页 |
| ·花粉管通道法 | 第16页 |
| ·基因枪法 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导法 | 第17-19页 |
| ·叶绿体转化法 | 第19-20页 |
| ·其他方法 | 第20-21页 |
| ·植物转基因沉默 | 第21-23页 |
| ·转录水平的基因沉默 | 第22页 |
| ·转录后水平的基因沉默 | 第22页 |
| ·基因沉默的对策 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 材料和方法 | 第24-36页 |
| ·材料和试剂 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·质粒与菌株 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第25-30页 |
| ·载体构建流程 | 第25-26页 |
| ·引物设计和基因扩增 | 第26-28页 |
| ·表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第30页 |
| ·农杆菌介导耐冷基因Cbcor15α转化甘蔗 | 第30-33页 |
| ·甘蔗愈伤组织的诱导 | 第31页 |
| ·甘蔗分化培养基的筛选 | 第31页 |
| ·甘蔗生根培养基筛选 | 第31-32页 |
| ·PPT浓度筛选 | 第32页 |
| ·农杆菌对抗生素的耐受性实验 | 第32页 |
| ·共培育时间确定 | 第32页 |
| ·农杆菌介导的甘蔗转化体系建立 | 第32-33页 |
| ·转化植株的检测 | 第33-36页 |
| ·甘蔗总DNA的提取 | 第34页 |
| ·PCR检测 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-48页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第36-39页 |
| ·Cbcor15a基因亚克隆 | 第36页 |
| ·植物表达载体的构建和验证 | 第36-39页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第39页 |
| ·农杆菌介导的耐冷基因Cbcor15α转化甘蔗 | 第39-48页 |
| ·甘蔗胚性愈伤组织的诱导 | 第39页 |
| ·甘蔗胚性愈伤组织的分化 | 第39-40页 |
| ·甘蔗幼苗生根 | 第40-41页 |
| ·甘蔗对PPT的耐受性 | 第41-43页 |
| ·抗生素抑制农杆菌梯度选择 | 第43-44页 |
| ·共培育时间的确定 | 第44页 |
| ·抗性植株筛选 | 第44-45页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第45-46页 |
| ·转化和筛选程序 | 第46-48页 |
| 第四章 结论和讨论 | 第48-51页 |
| ·转基因甘蔗发展前景 | 第48页 |
| ·关于COR基因 | 第48页 |
| ·关于筛选标记 | 第48-49页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)的使用 | 第49页 |
| ·关于甘蔗转化 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第58页 |
