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EPSPS基因的克隆及转化甜高粱的初步研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
1 前言第10-23页
   ·概述第10页
   ·除草剂概况第10-12页
     ·除草剂的应用第10-11页
     ·除草剂种类第11-12页
   ·抗除草剂作物研究进展第12-15页
     ·研制抗除草剂作物的意义第12页
     ·抗除草剂基因及作用机制第12-13页
     ·抗除草剂转基因作物的研究第13-15页
   ·遗传转化的途径和方法特点第15-16页
   ·植物遗传转化第16-19页
     ·再生体系的建立与应用第16-19页
     ·农杆菌介导高粱的遗传转化第19页
   ·甜高粱遗传改良研究现状与应用前景第19-21页
     ·甜高粱发展应用前景第19-21页
     ·甜高粱遗传改良概况第21页
   ·本研究的目标第21-23页
     ·研究的意义第22页
     ·研究的目的第22-23页
2 抗草甘膦EPSPS基因的克隆及植物表达载体的构建第23-35页
   ·材料与方法第23-29页
     ·植物材料第23页
     ·菌株与质粒第23页
     ·酶和试剂第23页
     ·抗草甘膦EPSPS基因的克隆第23-27页
     ·植物表达载体PCAMBIA1300-UBI-EPSPS的构建第27-28页
     ·农杆菌的冻融法转化第28-29页
   ·结果与分析第29-33页
     ·抗草甘膦大豆基因组DNA第29-30页
     ·温度梯度PCR试验第30页
     ·PCR扩增产物第30-31页
     ·重组质粒TA-EPSPS所携带的核甘酸全序列测定第31-32页
     ·植物表达载体的双酶切鉴定第32页
     ·农杆菌转化子的鉴定第32-33页
   ·小结第33-35页
3 甜高粱BT3 遗传转化体系研究第35-46页
   ·材料与方法第35-37页
     ·植物材料第35页
     ·试验方法第35-37页
   ·结果与分析第37-45页
     ·不同消毒时间对成熟种子的处理效果第37-38页
     ·不同的生长素和细胞分裂素浓度配比对BT3愈伤组织诱导的影响第38-40页
     ·愈伤组织的继代增殖第40页
     ·胚性愈伤组织的分化第40-41页
     ·组培苗生根第41-42页
     ·甜高粱胚性愈伤对潮霉素抗性临界浓度的决定(选择压筛选)第42-44页
     ·羧苄霉素抑菌试验第44页
     ·农杆菌与愈伤的共培养第44-45页
     ·抗性愈伤的筛选第45页
   ·小结第45-46页
4 全文结论与讨论第46-50页
   ·结论第46-47页
   ·讨论第47-50页
     ·EPSPS基因的克隆与载体构建第47页
     ·甜高粱BT3再生体系的建立第47-48页
     ·潮霉素临界筛选浓度和羧苄霉素最佳抑菌浓度第48页
     ·存在的问题第48页
     ·本研究创新点第48-49页
     ·展望第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-55页
附录第55页

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