| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-31页 |
| ·马流感病毒(EIV)概述 | 第12页 |
| ·EIV的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·EIV的形态结构 | 第12-13页 |
| ·EIV的理化学特性 | 第13页 |
| ·EIV的基因组结构及其编码蛋白 | 第13-14页 |
| ·EI的流行病学 | 第14-19页 |
| ·EIV的变异 | 第14-15页 |
| ·EI的跨国传播 | 第15-17页 |
| ·EI的跨种传播 | 第17-18页 |
| ·我国EI的现状 | 第18-19页 |
| ·保护性免疫应答 | 第19-21页 |
| ·体液免疫 | 第20-21页 |
| ·细胞免疫 | 第21页 |
| ·马流感疫苗研究进展及应用 | 第21-26页 |
| ·常规疫苗 | 第21-24页 |
| ·基因工程标记的疫苗 | 第24-26页 |
| ·甲病毒复制子DNA疫苗 | 第26-29页 |
| ·SFV复制子疫苗的构建的基本原理和特点 | 第26-27页 |
| ·诱导宿主细胞凋亡的免疫机制 | 第27页 |
| ·SFV复制子疫苗的优点 | 第27-28页 |
| ·SFV复制子疫苗的开发与应用 | 第28-29页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-50页 |
| ·实验材料 | 第31-34页 |
| ·毒株和细胞 | 第31页 |
| ·质粒和菌株 | 第31页 |
| ·实验动物 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第32-34页 |
| ·实验方法 | 第34-50页 |
| ·病毒分离 | 第34-35页 |
| ·EIV-HA基因扩增 | 第35-37页 |
| ·构建重组质粒pSFV1CS-EIV-HA | 第37-45页 |
| ·表达载体pcDNA3.1-EIV-HA的构建与鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组质粒对小鼠免疫效果的研究 | 第46-50页 |
| 3 结果 | 第50-79页 |
| ·病毒分离 | 第50-56页 |
| ·病毒滴度测定 | 第50页 |
| ·EIV电镜观察 | 第50-51页 |
| ·分离株EIV HA基因的扩增 | 第51页 |
| ·HA基因遗传演化分析 | 第51-53页 |
| ·HA基因氨基酸序列分析 | 第53-56页 |
| ·EIV-HA基因克隆载体的构建与鉴定 | 第56-58页 |
| ·HA基因的扩增 | 第56页 |
| ·克隆载体的鉴定 | 第56-58页 |
| ·重组质粒pSFV1CS-EIV-HA的鉴定 | 第58-62页 |
| ·表达载体pSFV1CS的鉴定 | 第58页 |
| ·重组质粒pSFV1CS-EIV-HA酶切鉴定 | 第58-61页 |
| ·重组质粒在293T细胞中瞬时表达的检测 | 第61-62页 |
| ·表达载体pcDNA3.1-EIV-HA的鉴定 | 第62-64页 |
| ·表达载体pcDNA3.1-EIV-HA(XJ)酶切鉴定 | 第62页 |
| ·表达载体pcDNA3.1-EIV-HA(QH)酶切鉴定 | 第62-63页 |
| ·间接免疫荧光鉴定真核表达载体 | 第63-64页 |
| ·HI抗体水平检测 | 第64-68页 |
| ·不同剂量免疫组HI抗体的检测 | 第64页 |
| ·pSFV1CS-HA(XJ)重组质粒HI抗体动态分析 | 第64-66页 |
| ·pSFV1CS-HA(QH)重组质粒HI抗体动态分析 | 第66-68页 |
| ·小鼠外周血细胞因子水平检测 | 第68-71页 |
| ·小鼠外周血IFN-γ分泌水平检测 | 第68-69页 |
| ·小鼠外周血IL-2分泌水平检测 | 第69-70页 |
| ·小鼠外周血IL-4分泌水平检测 | 第70-71页 |
| ·小鼠脾T淋巴细胞亚类检测 | 第71-75页 |
| ·病毒分离 | 第75-79页 |
| ·SPF鸡胚内病毒分离 | 第75页 |
| ·RT-PCR分离病毒 | 第75页 |
| ·病理切片 | 第75-79页 |
| 4. 讨论 | 第79-86页 |
| ·两株EIV HA基因遗传演化分析 | 第79-80页 |
| ·载体系统的选择 | 第80-81页 |
| ·复制型表达载体与常规表达载体的比较 | 第81-83页 |
| ·甲病毒复制子重组质粒对机体免疫反应的诱导 | 第83-86页 |
| ·甲病毒复制子重组质粒诱导的体液免疫 | 第83页 |
| ·甲病毒复制子重组质粒诱导的细胞免疫 | 第83-84页 |
| ·细胞因子的动态变化 | 第84-86页 |
| 5 结论 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第98页 |
