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组蛋白乙酰化对水稻花期、基因表达以及杂种优势的表观调控机制

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
縮略词表第11-12页
1 前言第12-30页
   ·表观遗传学概述第12页
   ·组蛋白乙酰化修饰研究进展第12-19页
     ·乙酰化与基因转录的关系第14页
     ·组蛋白乙酰化位点第14-15页
     ·组蛋白乙酰转移酶基因第15-16页
     ·组蛋白去乙酰化酶基因第16-19页
   ·植物开花期的调控机理第19-22页
     ·植物开花诱导机理第19-21页
     ·植物花期的表观调控第21-22页
   ·杂种优势的形成机理第22-25页
     ·杂种优势的遗传学机理第23页
     ·杂种优势的分子生物学机理第23-24页
     ·杂种优势的表观遗传学机理第24-25页
   ·利用高通量技术研究表观基因组学第25-30页
     ·单个修饰信号的宏观特点第26-27页
     ·多个修饰信号的相互关系及对基因转录的影响第27-29页
     ·表观遗传的品种多态性及杂种优势第29-30页
2 本研究的目的和意义第30-31页
3 材料方法第31-44页
   ·实验材料第31页
     ·水稻材料来源及生长条件第31页
     ·菌株第31页
   ·基因序列的获取第31-33页
   ·利用芯片数据库分析基因全生育期表达谱第33页
   ·蛋白家族进化树分析第33-34页
   ·OsHDT1基因的克降及载体的构建第34页
   ·农杆菌介导的遗传转化第34页
   ·基因枪介导的瞬时表达与GFP观察第34-35页
   ·核酸操作方法第35-36页
     ·DNA抽提与Southern杂交第35-36页
     ·RNA抽提和Northern杂交分析第36页
     ·RT-PCR和实时定量(Real-time)PCR分析第36页
   ·蛋白质操作方法第36-38页
     ·蛋白原核表达,纯化及抗体制备第36-37页
     ·水稻组蛋白抽提第37-38页
     ·水稻总蛋白抽提第38页
     ·Western Blot杂交及所用抗体第38页
   ·水稻染色质操作相关实验第38-39页
     ·染色质免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitate,CHIP)第38-39页
     ·免疫染色(Immunostaining)第39页
   ·数字基因表达谱测序及差异基因筛选第39-41页
   ·Pathway显著性富集分析第41-44页
4 结果与分析第44-103页
   ·MH63,ZS97,SY63三个品种的总体乙酰化修饰存在显著差异第44-47页
     ·利用Western Blot检测MH63,ZS97和SY63的总体乙酰化修饰第44页
     ·利用表达谱芯片分析水稻中HATs和HDACs基因的表达量第44-46页
     ·Real-time PCR对部分芯片结果的验证第46-47页
   ·HDT1基因的表达模式以及蛋白定位第47-52页
     ·OsHDT1基因的表达模式第48-50页
     ·OsHDT1蛋白定位第50-52页
   ·超量表达HDT1可以导致SY63开花提早但对MH63没有影响第52-58页
     ·HDT1超量和抑制材料的构建、检测、表型观察以及与ZS97的杂交第52-54页
     ·自交后代与杂交后代的表达检测及田间性状考察第54-58页
   ·HDT1的超量表达改变了某些开花基因的表达量第58-61页
   ·HDT1对组蛋白乙酰化的影响第61-63页
   ·利用高通量测序方法在全基因组水平上寻找差异表达基因第63-101页
     ·在野生型杂交组合中寻找差异表达基因第64-76页
     ·转基因杂种和野生型杂种的差异表达基因第76-78页
     ·OsHDT1对非加性基因表达的影响第78-89页
     ·OsHDT1对基因表达的影响在亲本和杂种中有所不同第89-90页
     ·亲本MH63中表达量受OsHDT1转基因影响的基因第90-94页
     ·在亲本和杂种中转基因后表达量表现出相反变化方向的基因第94-101页
   ·差异表达基因在组蛋白修饰水平上的变化第101-102页
   ·酵母双杂交筛选OsHDT1互作蛋白第102-103页
5 讨论与展望第103-107页
   ·OsHDT1对水稻生长发育和基因表达调控的功能第103-105页
     ·OsHDT1的节律性与去乙酰化作用第103页
     ·OsHDT1对基因表达的调控作用第103-104页
     ·OsHDT1可能的互作蛋白第104-105页
     ·OsHDT1在抗逆中的作用第105页
   ·植物开花机理的深入研究第105-107页
     ·光周期途径的表观调控第105-106页
     ·开花与产量的辩证关系第106-107页
参考文献第107-123页
附录第123-133页
 附录A 部分实验的操作流程第123-132页
 附录B 作者简介第132-133页
致谢第133页

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