石刁柏细胞培养及其L-天冬酰胺酶发酵
| 独创性声明 | 第1页 |
| 关于论文使用授权的说明 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| 1 石刁柏概况 | 第12-13页 |
| ·石刁柏概述 | 第12页 |
| ·开发利用价值 | 第12-13页 |
| ·石刁柏的营养学价值 | 第12页 |
| ·药用价值 | 第12-13页 |
| 2 秋水仙碱诱变的研究现状 | 第13-16页 |
| ·秋水仙素加倍法的应用 | 第13-14页 |
| ·影响染色体加倍频率的因素 | 第14-15页 |
| ·外植体的生长状态 | 第14页 |
| ·秋水仙素的浓度和处理时间 | 第14-15页 |
| ·处理温度对药剂的水解速度影响 | 第15页 |
| ·渗透剂二甲基亚砜(DMSO) | 第15页 |
| ·多倍体的鉴定方法 | 第15页 |
| ·存在问题 | 第15-16页 |
| ·秋水仙素的毒害作用 | 第16页 |
| ·嵌合体现象 | 第16页 |
| ·多倍体的诱导技术尚需完善 | 第16页 |
| 3 辐射诱变的研究状况 | 第16-17页 |
| 4 细胞培养的进行高产细胞系的选育研究进展 | 第17-19页 |
| ·小细胞团培养 | 第17-18页 |
| ·单细胞培养 | 第18-19页 |
| 5 植物细胞培养技术生产天然产物 | 第19-22页 |
| ·原理 | 第20页 |
| ·在药物生产方面的应用 | 第20-22页 |
| 6 植物细胞次级代谢产物生产条件的调控 | 第22-25页 |
| ·培养基成分 | 第22-23页 |
| ·供氧量 | 第23页 |
| ·诱导子 | 第23-25页 |
| 7 研究课题的目的及意义 | 第25-26页 |
| 第二章 单细胞的分离与培养 | 第26-40页 |
| 1 材料与仪器 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-28页 |
| ·石刁柏单细胞的分离 | 第26-27页 |
| ·酶解法分离石刁柏单细胞 | 第26-27页 |
| ·悬浮培养分离石刁柏单细胞 | 第27页 |
| (1) 愈伤组织悬浮体系的建立 | 第27页 |
| 1) 蔗糖浓度的确立 | 第27页 |
| 2) 悬浮系的建立 | 第27页 |
| (2) 愈伤组织悬浮系的继代 | 第27页 |
| (3) 单细胞的分离 | 第27页 |
| ·石刁柏单细胞培养的方法 | 第27-28页 |
| ·石刁柏单细胞生长动力学分析 | 第28页 |
| ·石刁柏细胞团的形成 | 第28页 |
| ·细胞培养营养动力学分析 | 第28页 |
| 3 实验结果与分析 | 第28-37页 |
| ·酶浓度和酶解时间对游离单细胞的影响 | 第28-29页 |
| ·细胞悬浮培养分离单细胞法 | 第29-31页 |
| ·蔗糖浓度的确立 | 第29-30页 |
| ·单细胞培养继代方法的比较 | 第30页 |
| ·过滤分离单细胞 | 第30页 |
| ·单细胞分离方法的比较 | 第30-31页 |
| ·石刁柏单细胞培养方法的确定 | 第31-35页 |
| ·单细胞液体培养条件的确定 | 第31-33页 |
| (1) 培养液激素： | 第31页 |
| (2) 接种量 | 第31-32页 |
| (3) 转速 | 第32页 |
| (4) pH值 | 第32页 |
| (5) 温度 | 第32-33页 |
| ·单细胞的平板培养与单细胞的液体培养的比较 | 第33页 |
| ·细胞培养的增长动力学分析 | 第33-35页 |
| ·细胞团的形成 | 第35页 |
| ·细胞培养中的营养消耗动力学 | 第35-37页 |
| ·氮源的消耗 | 第35-36页 |
| ·磷源(磷酸根)的消耗 | 第36-37页 |
| ·碳源(总糖)的消耗 | 第37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 细胞多倍体的诱导 | 第40-47页 |
| 1 材料与仪器 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-41页 |
| ·石刁柏细胞培养的同步化 | 第40页 |
| ·石刁柏多倍体的诱导 | 第40页 |
| ·利用小细胞团进行多倍体诱导 | 第40页 |
| ·利用单细胞进行诱导多倍体 | 第40页 |
| ·多倍体的染色体鉴定 | 第40-41页 |
| ·显微观察 | 第40-41页 |
| ·多倍体染色体数的统计和分析 | 第41页 |
| ·石刁柏多倍体的诱导与培养 | 第41页 |
| 3 实验结果与分析 | 第41-46页 |
| ·温度对细胞同步化的影响分析 | 第41-44页 |
| ·石刁柏多倍体的诱导 | 第44-46页 |
| ·不同处理方法对石刁柏多倍体诱导的影响 | 第44页 |
| ·多倍体鉴定 | 第44-46页 |
| ·多倍体细胞系的筛选 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 L-天冬酰胺酶发酵条件优化及高产系的选择 | 第47-59页 |
| 1 材料与仪器 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-48页 |
| ·石刁柏细胞的L-天冬酰胺酶发酵条件研究 | 第47-48页 |
| ·L-天冬酰胺酶活力测定条件的确定 | 第47页 |
| ·L-天冬酰胺酶发酵条件的优化 | 第47-48页 |
| ·L-天冬酰胺酶产酶时间的确定 | 第48页 |
| ·L-天冬酰胺酶高产细胞株的筛选 | 第48页 |
| ·L-天冬酰胺酶发酵动力学模型的建立 | 第48页 |
| ·L-天冬酰胺酶的粗提 | 第48页 |
| 3 实验结果与分析 | 第48-57页 |
| ·酶活力测定条件的确定 | 第48-50页 |
| ·缓冲系统的确定 | 第48-49页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第49-50页 |
| ·L-天冬酰胺酶发酵条件的优化 | 第50-53页 |
| ·激素配比 | 第50页 |
| ·接种量 | 第50-51页 |
| ·转速 | 第51-52页 |
| ·pH值 | 第52页 |
| ·温度 | 第52-53页 |
| ·产酶时间的确定 | 第53页 |
| ·L-天冬酰胺酶高产细胞株的筛选 | 第53-54页 |
| ·Aspβ细胞的L-天冬酰胺酶发酵动力学研究 | 第54-56页 |
| ·悬浮培养胞的生长曲线和L-天冬酰胺酶积累的曲线 | 第54-55页 |
| ·细胞发酵过程中的代谢规律 | 第55-56页 |
| ·L-天冬酰胺酶的粗提与纯度鉴定 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-60页 |
| 创新之处： | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 缩写词及英汉对照 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
