摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第一部分 文献综述 | 第18-42页 |
一 骨骼肌的发生与发育 | 第18-23页 |
1 骨骼肌的发生 | 第18-19页 |
2 肌肉发育的调控 | 第19-23页 |
3 结语 | 第23页 |
二 细胞生成素基因研究进展 | 第23-28页 |
1 MyoG 基因的定位与结构 | 第23-24页 |
2 MyoG 基因表达的时间性 | 第24-26页 |
3 MyoG 基因的多态性 | 第26-27页 |
4 小结 | 第27-28页 |
三 肌肉生长抑制素基因研究进展 | 第28-33页 |
1 MSTIN 基因的结构 | 第28-29页 |
2 MSTIN 基因的遗传效应及同源性分析 | 第29页 |
3 MSTIN 基因的定位 | 第29页 |
4 MSTIN 基因的功能 | 第29-30页 |
5 MSTIN 基因的作用机制 | 第30-31页 |
6 MSTIN 基因的特异性表达 | 第31-32页 |
7 MSTIN 基因的突变及多态性 | 第32页 |
8 MSTIN 基因的应用前景 | 第32-33页 |
四 胰岛素样生长因子系统组成及生理功能 | 第33-36页 |
1 IGF 系统的组成 | 第33-34页 |
2 IGF-I 的作用机理 | 第34-35页 |
3 IGF-1 的促生长作用 | 第35页 |
4 IGF-1 与肌肉生长的关系 | 第35-36页 |
五 生长激素基因结构及生理作用 | 第36-39页 |
1 GH 基因的结构 | 第36-37页 |
2 GHR 基因的结构 | 第37页 |
3 GH 与 GHR 间的信号传导 | 第37-38页 |
4 GH 的促生长作用 | 第38-39页 |
5 GH 对物质代谢的影响 | 第39页 |
六 GHRH 核酸质粒对动物生长的促进作用 | 第39-42页 |
1 GHRH 的结构 | 第39-40页 |
2 GHRH 的功能 | 第40页 |
3 GHRH 促进GH 分泌的机理 | 第40页 |
4 GHRH 核酸制剂的制备与应用 | 第40-42页 |
第二部分 实验研究 | 第42-136页 |
实验一 北京鸭 GHR、IGF-1、MSTIN、MyoG 基因的克隆与序列分析 | 第42-61页 |
1 材料和方法 | 第42-49页 |
·材料 | 第42-44页 |
·方法 | 第44-49页 |
2 结果 | 第49-56页 |
·RNA 的提取 | 第49-50页 |
·RT-PCR 扩增结果 | 第50页 |
·PCR 扩增产物的克隆 | 第50页 |
·菌落PCR 扩增检测 | 第50页 |
·PCR 测序结果 | 第50-54页 |
·克隆序列的遗传分析与生物信息学分析 | 第54-56页 |
3 讨论 | 第56-59页 |
·MyoG 基因的克隆与分析 | 第56-57页 |
·IGF-1 基因的克隆与分析 | 第57页 |
·MSTIN 基因的克隆与分析 | 第57-58页 |
·GHR 基因的克隆与分析 | 第58-59页 |
4 结论 | 第59-61页 |
实验二 不同日龄北京鸭胸肌组织MyoG、GHR、IGF-1、MSTIN 基因表达的发育性变化研究.. | 第61-71页 |
1 材料和方法 | 第61-62页 |
·样品采集 | 第61页 |
·RNA 提取与反转录 | 第61页 |
·引物设计 | 第61-62页 |
·平台期的确定 | 第62页 |
·半定量PCR 法检测不同日龄北京鸭胸肌组织目标基因mRNA 的表达丰度 | 第62页 |
2 实验结果 | 第62-65页 |
·RNA 的提取 | 第62页 |
·目标基因的扩增次数 | 第62-63页 |
·候选基因表达丰度的发育性变化 | 第63-65页 |
3 讨论 | 第65-70页 |
·关于MyoG 基因表达的时间性分析 | 第65-67页 |
·不同日龄北京鸭胸肌MSTIN 基因表达丰度的变化 | 第67-68页 |
·不同日龄北京鸭胸肌GHR 基因表达丰度的变化 | 第68-69页 |
·不同日龄北京鸭胸肌IGF-1 基因表达丰度的变化 | 第69-70页 |
4 结论 | 第70-71页 |
实验三 GH 基因多态性与北京鸭胸肌发育相关性状的关联分析 | 第71-93页 |
1 材料和方法 | 第71-81页 |
·材料 | 第71-73页 |
·方法 | 第73-81页 |
2 结果与分析 | 第81-87页 |
·基因组 DNA 提取 | 第81页 |
·GH 基因组DNA 的PCR 扩增结果 | 第81-82页 |
·SSCP 检测结果与分析 | 第82-83页 |
·RFLP 检测结果与分析 | 第83页 |
·GH 内含3 的基因型频率及其等位基因频率 | 第83页 |
·GH 引物1 多态位点基因型 Hardy-weinberg 平衡的χ~2 适合性检验 | 第83-84页 |
·GH 多态位点序列的测定 | 第84-85页 |
·GH 内含子3 标记位点纯合度、杂合度、有效等位基因数和多态信息含量 | 第85页 |
·GH 内含子355CP 多态与北京鸭胸肌的相关性分析 | 第85-87页 |
3 讨论 | 第87-92页 |
·采样及 DNA 提取 | 第87-88页 |
·PCR-RFLP 分析 | 第88-89页 |
·PCR-SSCP 研究分析 | 第89-90页 |
·GH 内含子4 的RFLP 分析 | 第90-91页 |
·GH 内含子3 SSCP 多态位点与北京鸭胸肌发育候选指标的相关性分析 | 第91-92页 |
·GH 内含子3 多态性位点的群体遗传分析 | 第92页 |
4 结论 | 第92-93页 |
实验四 IGF-1 基因多态性与北京鸭胸肌发育相关性状的关联分析 | 第93-102页 |
1 材料和方法 | 第93-94页 |
·引物设计 | 第93-94页 |
·PCR 扩增条件 | 第94页 |
·其它 | 第94页 |
2 结果 | 第94-100页 |
·IGF-1基因组DNA的PCR扩增结果 | 第94-95页 |
·引物IGF-5’end(2)扩增结果的酶切分析 | 第95-96页 |
·引物IGF-5’末段扩增产物SSCP分析结果 | 第96-97页 |
·引物IGF-5’end(5)扩增产物的基因型频率及其等位基因频率 | 第97页 |
·引物IGF-5’end(5)扩增产物多态Hardy-weinberg 平衡检验 | 第97-98页 |
·引物IGF-5’end(5)扩增产物标记位点纯合度、杂合度、有效等位基因数和多态信息含量 | 第98页 |
·IGF-5 末端多态位点碱基序列的测定 | 第98页 |
·引物IGF-5’end(5)扩增产物SSCP 多态性与北京鸭胸肌的相关性分析 | 第98-100页 |
3 讨论 | 第100-101页 |
·IGF-1 5’末端的 RFLP 分析 | 第100-101页 |
·北京鸭 IGF-1 5’末端序列的SSCP 分析 | 第101页 |
·北京鸭IGF-1 5’末端序列多态位点的群体遗传学分析 | 第101页 |
4 结论 | 第101-102页 |
实验五 MyoG 基因多态性与北京鸭胸肌发育相关性状的关联分析 | 第102-105页 |
1 材料和方法 | 第102-103页 |
·引物设计 | 第102页 |
·PCR 扩增条件 | 第102-103页 |
·其它 | 第103页 |
2 结果 | 第103-104页 |
·基因组DNA 的PCR 扩增结果 | 第103页 |
·PCR 产物的SSCP 分析结果 | 第103-104页 |
3 讨论 | 第104-105页 |
实验六 鸭 MSTIN 基因部分序列的基因组PCR 扩增 | 第105-111页 |
1 材料和方法 | 第105-106页 |
·引物设计 | 第105页 |
·其它 | 第105-106页 |
2 结果与分析 | 第106-110页 |
·MSTIN DNA PCR 扩增结果及阳性克隆的鉴定 | 第106页 |
·MSTIN 基因组 PCR 扩增测序结果 | 第106-108页 |
·克隆序列的生物信息学分析 | 第108-110页 |
3 结论 | 第110-111页 |
实验七 MSTIN 基因多态性与北京鸭胸发育相关性状的关联分析 | 第111-121页 |
1 材料和方法 | 第111-112页 |
·材料 | 第111页 |
·方法 | 第111-112页 |
2 结果与分析 | 第112-118页 |
·基因组PCR 扩增结果 | 第112-113页 |
·PCR-SSCP 检测结果与分析 | 第113-114页 |
·MSTIN 外显子3 的群体遗传学分析 | 第114-116页 |
·MSTIN 外显子3 PCR 产物碱基序列的测定 | 第116页 |
·MSTIN 外显子3 多态位点与胸肌发育指标的相关性分析 | 第116-118页 |
3 讨论 | 第118-120页 |
·关于鸭SSCP、RFLP 多态分析引物的设计 | 第118-119页 |
·MSTIN 基因的多态性分析 | 第119-120页 |
·MSTIN 基因外显子3 的群体遗传学分析 | 第120页 |
4 结论 | 第120-121页 |
实验八 北京鸭GHRH 基因的克隆与分析 | 第121-136页 |
1 材料 | 第121页 |
·试验动物及样品采集 | 第121页 |
·主要实验仪器和器械 | 第121页 |
·溶液配制 | 第121页 |
·试剂盒 | 第121页 |
2 方法 | 第121-126页 |
·实验原理 | 第121页 |
·引物设计 | 第121-122页 |
·RT(反转录反应)和PCR 扩增 | 第122-123页 |
·PCR 产物的回收 | 第123-124页 |
·连接 | 第124页 |
·感受态细胞的制备 | 第124页 |
·转化 | 第124页 |
·重组质粒DNA 的快速鉴定—Cracking 法 | 第124页 |
·重组质粒DNA 的提取 | 第124-125页 |
·酶切 | 第125-126页 |
·测序 | 第126页 |
3 结果 | 第126-134页 |
·RNA 提取 | 第126页 |
·GHRH1 primer ,M13 primer 4 RT-PCR 扩增结果与产物的鉴定及序列分析 | 第126-129页 |
·GHRH(中)引物RT-PCR 扩增结果与产物的鉴定及序列分析 | 第129-134页 |
4 讨论 | 第134-135页 |
5 继续研究的内容 | 第135页 |
6 结论 | 第135-136页 |
第三部分 总结论 | 第136-138页 |
第四部分 参考文献 | 第138-153页 |
第五部分 附录 | 第153-178页 |
第六部分 缩略词 | 第178-180页 |
致谢 | 第180-181页 |
个人简介 | 第181页 |