| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-22页 |
| ·BVDV生物学特性 | 第11-12页 |
| ·BVDV形态和理化学特性 | 第11页 |
| ·BVDV的分型 | 第11-12页 |
| ·BVDV基因组及其编码蛋白 | 第12-16页 |
| ·BVDV基因组结构 | 第12-13页 |
| ·BVDV编码的蛋白及功能 | 第13-16页 |
| ·BVDV生物型转化的分子机制 | 第16-19页 |
| ·病毒基因与宿主细胞基因的重组 | 第16-17页 |
| ·病毒基因的重复复制及重排 | 第17页 |
| ·病毒基因重复复制和插入序列同时存在 | 第17-18页 |
| ·病毒基因的缺失 | 第18页 |
| ·点突变 | 第18-19页 |
| ·BVDV的致病机理 | 第19-21页 |
| ·持续感染与免疫耐受 | 第19页 |
| ·粘膜病 | 第19-20页 |
| ·繁殖障碍 | 第20页 |
| ·免疫抑制 | 第20页 |
| ·血小板减少症 | 第20-21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-30页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·病毒与细胞 | 第22页 |
| ·质粒与菌种 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·扩增引物 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-30页 |
| ·新生犊牛睾丸细胞(NBTE)的制备 | 第24页 |
| ·BVDV的增殖 | 第24页 |
| ·BVDV基因组RNA的提取 | 第24页 |
| ·BVDV P20和P14基因的克隆及序列分析 | 第24-27页 |
| ·BVDV P20和P14基因重组原核表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·BVDV P20和P14基因在原核表达系统中的表达 | 第28-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-42页 |
| ·BVDV感染NBTE细胞显微镜下观察 | 第30页 |
| ·BVDV P20和P14基因的克隆与序列分析 | 第30-36页 |
| ·BVDV P20和P14基因的PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·重组质粒pMD18-T-P20及pMD18-T-P14的鉴定 | 第31-32页 |
| ·BVDV P20和P14基因的序列测定及同源性比较 | 第32-36页 |
| ·BVDV P20和P14基因重组表达载体的鉴定 | 第36-38页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-P20的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒pPROEX-HTb-P20的鉴定 | 第37页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-P14的鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pPROEX-HTb-P14的鉴定 | 第38页 |
| ·BVDV P20和P14基因在大肠杆菌中的表达 | 第38-42页 |
| ·P20基因表达产物的SDS-PAGE检测 | 第38-39页 |
| ·P14基因表达产物的SDS-PAGE检测 | 第39-40页 |
| ·表达条件的优化 | 第40-41页 |
| ·表达产物含量测定 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-46页 |
| ·BVDV P20和P14基因的克隆与序列分析 | 第42页 |
| ·BVDV P20和P14基因表达系统的选择 | 第42-43页 |
| ·BVDV P20和P14基因表达载体的选择 | 第43-44页 |
| ·BVDV P20和P14基因的表达 | 第44-46页 |
| ·P20和P14基因重组表达载体的构建 | 第44页 |
| ·P20和P14基因的表达 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录 | 第52-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
