| 目录 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-38页 |
| ·绿色荧光蛋白概述 | 第12-14页 |
| ·绿色荧光蛋白的发现 | 第12-13页 |
| ·绿色荧光蛋白的应用 | 第13-14页 |
| ·绿色荧光蛋白基因在芽胞杆菌中的研究 | 第14-15页 |
| ·GFP在芽胞杆菌中的表达 | 第14-15页 |
| ·GFP在苏云金芽胞杆菌中的表达 | 第15页 |
| ·绿色荧光蛋白标记菌株的检测方法 | 第15-17页 |
| ·手提式紫外检测仪 | 第15页 |
| ·荧光分光光度计 | 第15-16页 |
| ·荧光显微镜 | 第16页 |
| ·激光共焦扫描显微镜 | 第16-17页 |
| ·流式细胞仪 | 第17页 |
| ·绿色荧光蛋白基因在苏云金芽胞杆菌中的应用前景 | 第17-23页 |
| ·苏云金芽胞杆菌高效、安全基因工程菌的构建 | 第19页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫分子机理的研究 | 第19-21页 |
| ·苏云金芽胞杆菌细胞表面S-层的生物学 | 第21-22页 |
| ·苏云金芽胞杆菌辅助蛋白的功能分析 | 第22-23页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因的转录与翻译 | 第23-32页 |
| ·启动子和杀虫晶体蛋白基因的转录 | 第24-27页 |
| ·启动子类型 | 第24-26页 |
| ·芽胞分化依赖型启动子 | 第24-25页 |
| ·非芽孢分化依赖型启动子 | 第25-26页 |
| ·mRNA的稳定性 | 第26-27页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因的翻译 | 第27-31页 |
| ·伴胞晶体的形成 | 第27-29页 |
| ·P20帮助蛋白及其功能 | 第29-30页 |
| ·辅助蛋白对杀虫晶体蛋白基因表达和伴胞晶体形成的影响 | 第30-31页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因在大肠杆菌中的表达 | 第31-32页 |
| ·不同大肠杆菌启动子对杀虫晶体蛋白基因表达的影响 | 第31-32页 |
| ·不同大肠杆菌宿主对杀虫晶体蛋白基因表达的影响 | 第32页 |
| ·转基因生物的安全性 | 第32-38页 |
| ·植物用转基因微生物安全性评价 | 第32-34页 |
| ·植物用转基因微生物的风险预测 | 第34-35页 |
| ·重组微生物安全评价的研究方法 | 第35-36页 |
| ·选择安全型的标记基因 | 第35页 |
| ·选择安全型载体 | 第35-36页 |
| ·基因的水平转移的研究 | 第36-38页 |
| ·工程菌标记基因的水平转移 | 第36-37页 |
| ·转基因微生物基因水平转移研究进展 | 第37-38页 |
| 2 研究目的和意义 | 第38-39页 |
| 3 材料和方法 | 第39-49页 |
| ·实验材料 | 第39-44页 |
| ·实验方法 | 第44-49页 |
| 4 结果与分析 | 第49-76页 |
| ·绿色荧光蛋白基因gfp在苏云金芽胞杆菌中的表达 | 第49-52页 |
| ·苏云金芽胞杆菌表达载体pGFP-304的构建 | 第49页 |
| ·重组质粒pGFP-304的转化 | 第49-50页 |
| ·质粒稳定性检测 | 第50页 |
| ·重组菌发光特性的检测 | 第50页 |
| ·重组菌的荧光强度的检测 | 第50-52页 |
| ·利用绿色荧光蛋白基因gfp研究芽胞杆菌的启动子活性 | 第52-54页 |
| ·pGFP-304，pGFPExpA，pGFPExpB的电转化与转化菌株的筛选 | 第52页 |
| ·质粒遗传稳定性检测 | 第52页 |
| ·转化菌株的荧光显微观察 | 第52-53页 |
| ·重组菌株GFP蛋白表达的时序检测 | 第53页 |
| ·重组菌株微量热动力学的检测分析 | 第53-54页 |
| ·GFP标记杀虫晶体蛋白嵌合基因的构建与表达 | 第54-70页 |
| ·构建携带启动子P_(44-12)的嵌合基因gfp-cry1Ac10的表达载体pBMBZGC10 | 第54-58页 |
| ·构建携带启动子P_(BtⅠ-BtⅡ)的嵌合基因gfp-cry1Ac10的表达载体pBMBZGC11 | 第58-61页 |
| ·嵌合基因gfp-cry1Ac10的DNA序列测定 | 第61-62页 |
| ·嵌合基因gfp-cry1Ac10在大肠杆菌中的表达 | 第62-65页 |
| ·构建携带嵌合基因的大肠杆菌的表达载体pBMBZ8 | 第62-64页 |
| ·表达载体pBMBZ8转化大肠杆菌受体菌Top10 | 第64页 |
| ·重组菌Top10(pBMBZ8)的表达 | 第64-65页 |
| ·嵌合基因gfp-cry1Ac10在苏云金芽胞杆菌中的表达 | 第65-67页 |
| ·重组质粒pBMBZGC10和pBMBZGC11转化芽胞杆菌 | 第65页 |
| ·重组质粒pBMBZGC10和pBMBZGC11稳定性检测 | 第65页 |
| ·嵌合基因gfp-cry1Ac10的表达及其荧光检测 | 第65-67页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE检测 | 第65-66页 |
| ·融合蛋白的荧光检测 | 第66-67页 |
| ·辅助蛋白P20基因的导入及对苏云金芽胞杆菌重组菌株融合蛋白表达的影响 | 第67-70页 |
| ·重组质粒pBMB20-2的转化 | 第67页 |
| ·融合蛋白在重组菌株BMB171(pBMBZGC10-20)和CryB(pBMBZGC10-20)中的表达 | 第67-68页 |
| ·重组菌株荧光强度的检测分析 | 第68-70页 |
| ·标记重组菌株杀虫基因水平转移的研究 | 第70-76页 |
| ·重组菌株的选择 | 第70页 |
| ·重组菌株CryB(pBMBZGC10)的荧光显微观察 | 第70-71页 |
| ·基因水平转移盆栽实验设计方案 | 第71-72页 |
| ·重组菌株与土壤微生物间基因转移频率的测定 | 第72页 |
| ·重组菌株的喷洒及其样品的采集 | 第72-73页 |
| ·重组菌株与植物间基因水平转移的测定 | 第73-74页 |
| ·供试植株生物学性状的比较分析 | 第74-76页 |
| 5 讨论 | 第76-78页 |
| 6 结论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
