| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 转基因植物制成的口服疫苗 | 第12-15页 |
| ·转基因植物制成的口服疫苗的优点 | 第13页 |
| ·已研究的口服疫苗 | 第13-14页 |
| ·转基因植物口服疫苗的动物实验和临床实验 | 第14-15页 |
| 2 HBsAg基因 | 第15-18页 |
| ·HBV病毒 | 第15-16页 |
| ·HBsAg基因的结构 | 第16页 |
| ·转基因植物生产HBsAg疫苗的研究进展 | 第16-18页 |
| ·问题及展望 | 第18页 |
| 3 果树转基因研究进展 | 第18-21页 |
| ·我国转基因果树的应用 | 第18-20页 |
| ·果树基因转化方法 | 第20-21页 |
| ·问题与展望 | 第21页 |
| 4 苹果转基因 | 第21-25页 |
| ·主要进展 | 第21-23页 |
| ·影响苹果转化频率的因素 | 第23-24页 |
| ·问题及展望 | 第24-25页 |
| 第二部分 研究报告 | 第25-70页 |
| 第一章 乙肝表面抗原大蛋白(S1S2S)基因表达载体构建及根癌农杆菌的转化 | 第25-36页 |
| 1 材料与方法 | 第25-30页 |
| ·材料 | 第25-28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·小量制备质粒DNA | 第28页 |
| ·氯化钙化学法制备大肠杆菌感受态细胞及化学法转化 | 第28页 |
| ·酶切反应 | 第28页 |
| ·质粒连接反应 | 第28-29页 |
| ·乙肝表面抗原大蛋白表达载体构建程序 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-36页 |
| ·目的基因的克隆 | 第30-32页 |
| ·植物双元表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·根癌农杆菌的转化与鉴定 | 第33-36页 |
| 第二章 苹果离体叶片高频再生系统的建立 | 第36-48页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·无菌苗的获得 | 第37页 |
| ·苹果继代培养基的确定 | 第37页 |
| ·离体叶片再生系统的建立 | 第37-38页 |
| ·结果调查统计指标 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-48页 |
| ·苹果无菌体系的建立 | 第38-39页 |
| ·苹果继代培养基的确定 | 第39-41页 |
| ·最适基本培养基的选择 | 第39页 |
| ·最适激素浓度，CH的选择 | 第39-41页 |
| ·苹果离体叶片高频再生系统的确立 | 第41-48页 |
| ·不同细胞分裂素对叶片再生的影响 | 第41-43页 |
| ·不同固化剂对叶片再生的影响 | 第43-44页 |
| ·继代培养时间对叶片再生的影响 | 第44页 |
| ·暗培养时间对叶片再生的影响 | 第44-45页 |
| ·叶片极性对叶片再生的影响 | 第45-46页 |
| ·CH对离体叶片再生频率的影响 | 第46-48页 |
| 第三章 苹果转化体系的建立和番茄的遗传转化 | 第48-55页 |
| 1 材料与方法 | 第48-51页 |
| ·材料 | 第48-50页 |
| ·方法 | 第50-51页 |
| ·菌种的保存 | 第50页 |
| ·苹果转化基本程序 | 第50页 |
| ·苹果转化体系的建立 | 第50-51页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-55页 |
| ·苹果遗传转化体系的建立 | 第51-54页 |
| ·Km耐受力的确定 | 第51页 |
| ·抑菌抗生素浓度确定 | 第51-52页 |
| ·侵染时间对转化的影响 | 第52-53页 |
| ·共培养时间的确定 | 第53-54页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第54-55页 |
| 第四章 转基因苹果和番茄外源基因整合、转录及表达的检测 | 第55-70页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| ·GUS染色鉴定 | 第56页 |
| ·PCR法检测外源基因的整合 | 第56-57页 |
| ·RT-PCR分析 | 第57页 |
| ·植物蛋白抗原活性的ELISA检测 | 第57-58页 |
| ·S1S2S基因表达产物的金免疫电镜观察 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-70页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第58-59页 |
| ·苹果抗性植株GUS组织化学染色 | 第58-59页 |
| ·番茄抗性植株GUS染色检测 | 第59页 |
| ·PCR检测 | 第59-61页 |
| ·转基因苹果的PCR检测 | 第59-60页 |
| ·转基因番茄的PCR检测 | 第60-61页 |
| ·RT-PCR结果 | 第61-62页 |
| ·转基因苹果总RNA的RT-PCR结果 | 第61页 |
| ·转基因番茄的RT-PCR结果 | 第61-62页 |
| ·转基因植株外源蛋白HBsAg的ELISA检测及定量 | 第62-68页 |
| ·标准曲线的建立 | 第62-63页 |
| ·S1S2S基因在苹果中的表达 | 第63-64页 |
| ·S1S2S基因在番茄植株中的表达 | 第64-68页 |
| ·HBsAg表达产物的金免疫电镜观察 | 第68-70页 |
| 讨论 | 第70-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 附录一 基因序列 | 第81-85页 |
| 附录二 图版 | 第85-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
