| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第9-18页 |
| 1 神经生长因子(NGF)概述 | 第9-13页 |
| ·NGF的种类和性质 | 第9-11页 |
| ·NGF的生物学和医学功能 | 第11-12页 |
| ·NGF的临床应用 | 第12-13页 |
| 2 NGF的分离纯化概况 | 第13-17页 |
| ·非蛇源NGF蛋白的分离纯化 | 第13-14页 |
| ·蛇毒中NGF的分离纯化 | 第14-17页 |
| ·蛇毒中提取NGF工艺方法概述 | 第14-16页 |
| ·二步柱层析分离NGF工艺的提出及意义 | 第16-17页 |
| 3 NGF研究开发的方向和重点 | 第17-18页 |
| Ⅱ 实验部分 | 第18-30页 |
| 1 实验药品及设备 | 第18-19页 |
| ·药品 | 第18页 |
| ·仪器设备 | 第18-19页 |
| 2 工艺研究 | 第19-22页 |
| ·传统纯化工艺 | 第19-20页 |
| ·设计工艺路线B | 第20页 |
| ·设计工艺路线C | 第20-21页 |
| ·设计工艺路线C_1 | 第21页 |
| ·设计工艺路线C_2 | 第21-22页 |
| ·设计工艺路线C_3 | 第22页 |
| 3 工艺选择与优化 | 第22-23页 |
| 4 工艺放大 | 第23页 |
| ·DEAE-Sepharose fast flow柱层析放大实验 | 第23页 |
| ·Sephadex G50柱层析放大实验 | 第23页 |
| 5 分析与检测 | 第23-27页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第23-24页 |
| ·样品处理 | 第23-24页 |
| ·SDS-PAGE电泳条件 | 第24页 |
| ·蛋白溶液浓度测定 | 第24页 |
| ·NGF纯度测定 | 第24-25页 |
| ·凝胶高效液相色谱法 | 第25页 |
| ·反相高效液相色谱法 | 第25页 |
| ·NGF生物活性测定 | 第25-27页 |
| ·NGF生物活性检测方法概述 | 第25-26页 |
| ·鸡胚背根神经节体外培养法测定NGF生物活性 | 第26-27页 |
| 6 NGF初步急性毒性实验和长期毒性实验 | 第27-30页 |
| ·NGF溶液无菌性试验 | 第27-28页 |
| ·急性毒性实验 | 第28-29页 |
| ·长期毒性实验 | 第29-30页 |
| Ⅲ 结果与讨论 | 第30-56页 |
| 1 工艺研究结果与讨论 | 第30-37页 |
| ·传统纯化工艺分离NGF的实验结果与分析 | 第30-32页 |
| ·Sephadex G50柱层析 | 第30页 |
| ·CM-Cellulose 32柱层析 | 第30-31页 |
| ·Sepharose 6B柱层析 | 第31-32页 |
| ·工艺路线B实验结果 | 第32-33页 |
| ·CM Sepharose CL 6B柱层析 | 第32-33页 |
| ·工艺路线C实验结果 | 第33-34页 |
| ·DEAE-Sepharose fast flow柱层析结果 | 第33-34页 |
| ·工艺路线C_1实验结果 | 第34-35页 |
| ·Sephadex G 25柱层析 | 第34页 |
| ·CM Sepharose CL 6B柱层析结果 | 第34-35页 |
| ·工艺路线C_2实验结果 | 第35-36页 |
| ·DEAE-Sepharose fast flow柱层析 | 第35页 |
| ·Sephadex G50柱层析 | 第35-36页 |
| ·设计工艺路线C_3实验结果 | 第36-37页 |
| ·DEAE-Sepharose fast flow柱层析 | 第36页 |
| ·Sephadex G25柱层析 | 第36页 |
| ·Heparin Sepharose CL 6B柱层析 | 第36-37页 |
| 2 工艺选择与工艺优化 | 第37-42页 |
| ·工艺选择 | 第37-38页 |
| ·工艺优化 | 第38-42页 |
| 3 工艺放大 | 第42-43页 |
| 4 分析与检测实验结果与讨论 | 第43-54页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳实验 | 第43-45页 |
| ·纯化NGF溶液蛋白浓度测定 | 第45-50页 |
| ·纯化各步NGF纯度测定 | 第50-52页 |
| ·凝胶过滤高效液相色谱法 | 第50页 |
| ·反相高效液相色谱法 | 第50-52页 |
| ·NGF生物活性测定结论 | 第52-54页 |
| 5 初步急性毒性实验和长期毒性实验结果与分析 | 第54-56页 |
| ·NGF溶液无菌性试验结果 | 第54页 |
| ·急性毒性实验结果 | 第54-55页 |
| ·长期毒性实验结果 | 第55-56页 |
| Ⅳ 结论 | 第56-58页 |
| 1 结论 | 第56页 |
| 2 存在的主要问题及展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
