| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 第一章 人类尿苷-胞苷激酶基因的克隆和功能的研究 | 第8-55页 |
| 一. 前言 | 第8-9页 |
| 二. 材料和试剂 | 第9-15页 |
| 1 菌株、质粒、细胞株、实验动物 | 第9-12页 |
| 2 实验耗材和试剂 | 第12-13页 |
| 3 常用试剂配制 | 第13-14页 |
| 4 引物 | 第14-15页 |
| 三. 主要的仪器设备 | 第15页 |
| 四. 主要的计算机分析软件 | 第15-16页 |
| 五. 技术路线和实验方法 | 第16-26页 |
| 1 设计思路和实验流程 | 第16页 |
| 2 基因的克隆 | 第16-19页 |
| 3 重组 UCK 蛋白在细胞中的表达和酶活检测 | 第19-20页 |
| 4 细胞学定位 | 第20页 |
| 5 Northern 杂交 | 第20-23页 |
| 6 半定量 RT－PCR | 第23页 |
| 7 UCK 重组蛋白的原核表达和纯化 | 第23-24页 |
| 8 多克隆抗体的制备 | 第24页 |
| 9 免疫组化方法 | 第24-25页 |
| 10 MTT 比色法检测药物敏感性 | 第25-26页 |
| 六. 结果 | 第26-47页 |
| 1 人类 UCK 基因的克隆、鉴定以及生物信息学分析 | 第26-32页 |
| 2 UCK 在哺乳动物细胞中的表达及酶活检测 | 第32-34页 |
| 3 UCK 基因的组织表达谱以及在肝癌组织中的表达分析 | 第34-39页 |
| 4 UCK 重组蛋白的表达纯化、多克隆抗体的制备 | 第39-41页 |
| 5 UCK 蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达和免疫组化分析 | 第41-42页 |
| 6 抗肿瘤药物 5-氮胞苷、6-氮尿苷的细胞学效应 | 第42-45页 |
| 7 6-氮尿苷对肝癌细胞株的影响与 UCK 的表达量相关 | 第45-47页 |
| 七. 讨论 | 第47-51页 |
| 八. 小结 | 第51-52页 |
| 九. 参考文献 | 第52-55页 |
| 第二章 人类 TCP10L 基因的转录抑制功能的研究 | 第55-67页 |
| 一. 前言 | 第55页 |
| 二. 实验材料 | 第55-56页 |
| 三. 实验方法 | 第56-57页 |
| 1 双荧光报告基因检测系统 | 第56页 |
| 2 基因的细胞学定位 | 第56-57页 |
| 四. 结果 | 第57-63页 |
| 1 TCP10L 的功能域分析 | 第57-59页 |
| 2 TCP10L 转录抑制功能的研究 | 第59-62页 |
| 3 TCP10L 的细胞学定位 | 第62-63页 |
| 五. 讨论 | 第63-65页 |
| 六. 参考文献 | 第65-67页 |
| 综述 | 第67-76页 |
| 附录 1 博士期间发表论文及获奖情况 | 第76页 |
| 附录 2 发表主要论文 | 第76-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
