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豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因转化花椰菜的研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
文献综述第8-21页
 1 微生物来源的抗虫基因第8-12页
  1.1 苏云金芽孢杆菌内源激素蛋白基因(B. t. )第8-12页
  1.2 来源于微生物的其它抗虫基因第12页
 2 植物来源的抗虫基因第12-17页
  2.1 蛋白酶抑制剂(proteinase inhibitor PI)基因第12-15页
  2.2 淀粉酶抑制剂基因第15页
  2.3 植物凝集素(Lectin Lec)基因第15-17页
  2.4 来源于植物的其它抗虫基因第17页
 3 其它来源的抗虫基因及其应用第17-19页
  3.1 蝎昆虫毒素第18页
  3.2 蜘蛛毒素第18-19页
 4 植物基因工程潜在的应用问题及解决措施第19-21页
  4.1 昆虫的抗药性是困扰农业生产的重大问题。第19-20页
  4.2 抗虫基因在植物体内的“沉默”第20页
  4.3 对天敌等有益生物的影响第20页
  4.4 转基因作物的安全问题第20-21页
引言第21-22页
材料与方法第22-32页
 1 材料第22-24页
  1.1 植物材料:第22页
  1.2 菌种和质粒第22页
  1.3 主要分子生物学试剂第22页
  1.4 细菌培养基第22页
  1.5 质粒提取液:第22-23页
  1.6 植物组织培养培养基第23页
  1.7 植物总DNA提取液第23-24页
 2 方法第24-32页
  2.1 大肠杆菌质粒的提取(碱裂解法)第24-25页
  2.2 质粒的酶切、目的片段的回收第25-26页
  2.3 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第26页
  2.4 农杆菌LBA4404感受态细胞的制备、转化及质粒提取第26-27页
  2.5 花椰菜高频再生体系的建立第27-28页
  2.6 花椰菜外植体的遗传转化第28页
  2.7 植物总DNA的提取(CTAB法)(Kidwell et al. 1992)第28-29页
  2.8 转基因植株基因组DNA的PCR扩增第29页
  2.9 转基因植株的PCR-Southern和Southern杂交检测(顾红雅等,1994;赵微平,1996)。第29-31页
  2.10 转基因植株的初步抗虫检测(钟仲贤等,2000)第31-32页
结果与分析第32-38页
 1 甘蓝高频再生体系的建立第32页
  1.1 植体分化能力的比较第32页
  1.2 激素对花椰菜外植体分化的影响第32页
 2 花椰菜外植体转化体系的建立第32-34页
  2.1 卡那霉素(Kan)对外植体不定芽分化的影响第32-33页
  2.2 预培养对外植体分化的影响第33-34页
  2.3 感菌时间、菌液浓度及共培养时间对芽分化的影响第34页
 3 抗性植株的获得第34-35页
 4 转化植株的鉴定第35-38页
  4.1 PCR扩增第35页
  4.2 PCR-Southern和Southern杂交检测第35-36页
  4.3 初步抗虫试验第36-38页
讨论第38-42页
结论第42-43页
参考文献第43-52页
英文缩写第52-53页
致谢第53-54页
附图第54-57页

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