| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| ·肝再生的研究现状 | 第10-12页 |
| ·肝再生增强因子的研究进展 | 第12-16页 |
| ·ALR的基因结构和蛋白质结构 | 第12-13页 |
| ·ALR的体内表达分布 | 第13页 |
| ·ALR的生物学功能 | 第13-15页 |
| ·ALR的研究现状 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交系统的基本原理 | 第16-17页 |
| ·本课题的意义、思路、技术路线 | 第17-20页 |
| 第二章 诱饵质粒pGBKT7-hALR的构建与鉴定 | 第20-36页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·实验材料 | 第20-26页 |
| ·菌种 | 第20页 |
| ·质粒 | 第20-22页 |
| ·试剂盒 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23-26页 |
| ·主要仪器与设备 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·RT-PCR法扩增目的基因 | 第26-27页 |
| ·pGBKT7-hALR重组质粒的构建 | 第27页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第27页 |
| ·酵母转化—醋酸锂(LiAc)转化法 | 第27页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性滤膜影印分析法 | 第27-28页 |
| ·抽提酵母蛋白提取物 | 第28页 |
| ·Western blot检测hALR蛋白的表达 | 第28-29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-35页 |
| ·hALR cDNA的RT-PCR结果 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pGBKT7-hALR的鉴定 | 第30-32页 |
| ·pGBKT7-hALR转入AH109 | 第32页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性分析结果 | 第32-33页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第33-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第三章 AD文库的筛选 | 第36-57页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·主要材料与试剂 | 第36-38页 |
| ·主要仪器与设备 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·文库滴度 | 第38页 |
| ·酵母接合 | 第38-39页 |
| ·抽提酵母总DNA | 第39页 |
| ·酵母总DNA转化E.coli | 第39-40页 |
| ·质粒DNA的快速抽提 | 第40页 |
| ·阳性候选克隆的鉴定与归类 | 第40-41页 |
| ·回转实验 | 第41页 |
| ·DNA序列分析 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-55页 |
| ·文库的滴度及与AH109(pGBKT7-hALR)的接合效率 | 第41-42页 |
| ·文库的初步筛选 | 第42-43页 |
| ·阳性候选克隆的鉴定与归类 | 第43-47页 |
| ·回转实验 | 第47-48页 |
| ·测序结果及分析 | 第48-55页 |
| ·小结 | 第55-57页 |
| 结论与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |