摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第1章 前言 | 第14-31页 |
·血吸虫及血吸虫病 | 第14页 |
·血吸虫的种类及分布 | 第14-15页 |
·日本血吸虫的形态与生活史 | 第15-17页 |
·血吸虫病的发病机制 | 第17-18页 |
·血吸虫尾蚴所致的损害 | 第17页 |
·血吸虫童虫所致的损害 | 第17页 |
·血吸虫成虫所致的损害 | 第17页 |
·血吸虫虫卵所致的损害 | 第17-18页 |
·血吸虫病免疫诊断方法的研究进展 | 第18-22页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第19-20页 |
·酶联免疫印迹技术(ELIB) | 第20页 |
·胶体染料试纸条法(DDIA) | 第20-21页 |
·斑点金免疫渗滤法(DIGFA) | 第21页 |
·免疫传感技术 | 第21-22页 |
·血吸虫病免疫诊断抗原的研究进展 | 第22-28页 |
·天然抗原 | 第22-23页 |
·组分抗原 | 第23-24页 |
·重组抗原 | 第24-26页 |
·模拟抗原 | 第26-27页 |
·循环抗原 | 第27-28页 |
·小结 | 第28-29页 |
·选题的目的、意义 | 第29页 |
·实验设计方案 | 第29-31页 |
第2章 日本血吸虫cDNA表达文库的筛选 | 第31-82页 |
·引言 | 第31页 |
·实验材料 | 第31-33页 |
·cDNA表达文库 | 第31页 |
·血清 | 第31页 |
·菌株 | 第31页 |
·主要试剂与仪器 | 第31-33页 |
·实验方法 | 第33-37页 |
·筛库血清的处理 | 第33-34页 |
·λZAPⅡcDNA表达文库的免疫筛选 | 第34-35页 |
·阳性噬菌体删除环化为pBluscript重组质粒 | 第35-36页 |
·pBluescript重组质粒的提取、鉴定 | 第36-37页 |
·序列分析 | 第37页 |
·实验结果 | 第37-80页 |
·cDNA表达文库的免疫学筛选 | 第37-42页 |
·阳性噬菌体删除环化为pBluescript重组质粒 | 第42页 |
·pBluescript重组质粒的提取、鉴定 | 第42-44页 |
·序列分析 | 第44-80页 |
·讨论 | 第80-82页 |
第3章 日本血吸虫抗原基因的克隆、表达 | 第82-103页 |
·引言 | 第82页 |
·实验材料 | 第82-84页 |
·阳性克隆 | 第82页 |
·载体与菌株 | 第82页 |
·主要试剂与仪器 | 第82-84页 |
·实验方法 | 第84-90页 |
·表达载体的构建及鉴定 | 第84-87页 |
·重组质粒在大肠杆菌中的表达和鉴定 | 第87-88页 |
·重组蛋白溶解性鉴定 | 第88页 |
·重组蛋白表达条件的优化 | 第88-89页 |
·重组蛋白的纯化 | 第89页 |
·重组蛋白浓度测定 | 第89-90页 |
·实验结果 | 第90-101页 |
·表达载体的构建及鉴定 | 第90-93页 |
·重组质粒在大肠杆菌中的表达和鉴定 | 第93-95页 |
·重组蛋白溶解性的鉴定 | 第95-98页 |
·重组蛋白的纯化 | 第98-100页 |
·重组蛋白浓度测定 | 第100-101页 |
·讨论 | 第101-103页 |
第4章 日本血吸虫4种重组蛋白诊断价值的初步评价 | 第103-113页 |
·引言 | 第103页 |
·实验材料 | 第103-104页 |
·重组蛋白 | 第103页 |
·血清 | 第103页 |
·主要试剂和仪器 | 第103-104页 |
·实验方法 | 第104-105页 |
·间接ELISA试验条件的优化 | 第104-105页 |
·间接ELISA方法检测血清抗体的敏感性试验 | 第105页 |
·实验结果 | 第105-112页 |
·间接ELISA试验条件优化 | 第105-107页 |
·间接ELISA方法检测血清抗体的敏感性 | 第107-109页 |
·间接ELISA方法检测血清抗体的特异性 | 第109-112页 |
·讨论 | 第112-113页 |
第5章 日本血吸虫循环抗原的富集、鉴定 | 第113-122页 |
·引言 | 第113页 |
·实验材料 | 第113-115页 |
·实验动物 | 第113页 |
·寄生虫 | 第113页 |
·血清 | 第113页 |
·主要试剂和仪器 | 第113-115页 |
·实验方法 | 第115-118页 |
·日本血吸虫成虫的收集 | 第115页 |
·成虫抗原的制备 | 第115-116页 |
·抗成虫抗原IgY抗体的制备 | 第116页 |
·IgY抗体的分离、纯化 | 第116页 |
·IgY抗体效价的测定 | 第116页 |
·IgY抗体的Western Blotting分析 | 第116-117页 |
·免疫沉淀反应 | 第117页 |
·循环抗原的质谱鉴定分析 | 第117-118页 |
·实验结果 | 第118-120页 |
·成虫抗原的制备 | 第118页 |
·IgY抗体的制备、纯化 | 第118页 |
·IgY抗体的效价 | 第118页 |
·IgY抗体的Western Blotting结果 | 第118-119页 |
·免疫沉淀反应 | 第119-120页 |
·质谱鉴定结果 | 第120页 |
·讨论 | 第120-122页 |
结论 | 第122-123页 |
创新点 | 第123-124页 |
参考文献 | 第124-133页 |
致谢 | 第133-135页 |
发表论文及申请专利 | 第135页 |