| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 第一章 大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶的E292对于其氨基酰化活性有着重要作用 | 第9-31页 |
| 摘要 | 第9页 |
| 1 引言 | 第9-12页 |
| 2 材料与方法 | 第12-17页 |
| 2．1 材料 | 第12-13页 |
| 2．2 突变体LeuRS基因的构建 | 第13-15页 |
| 2．3 LeuRS及其变种酶基因的表达和纯化 | 第15-16页 |
| 2．4 蛋白质浓度测定 | 第16页 |
| 2．5 酶活力测定 | 第16-17页 |
| 2．6 CD光谱和荧光光谱的测定 | 第17页 |
| 3 结果 | 第17-25页 |
| 3．1 含大肠杆菌LeuRS变种基因的重组质粒的构建和基因表达 | 第17-19页 |
| 3．2 变种酶的纯化 | 第19-20页 |
| 3．3 变种酶的活力变化 | 第20-21页 |
| 3．4 LeuRS及其变种酶的CD光谱和荧光光谱 | 第21-23页 |
| 3．5 LeuRS变种酶的稳态动力学常数 | 第23-24页 |
| 3．6 ATP对LeuRS变种酶氨基酰化活力的抑制 | 第24-25页 |
| 4 讨论 | 第25-29页 |
| 参考文献 | 第29-31页 |
| 第二章 大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶变种在编校过程中可以区分tRNA~(Leu)的两种等受体 | 第31-53页 |
| 摘要 | 第31-32页 |
| 1 引言 | 第32-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-37页 |
| 2．1 材料 | 第36页 |
| 2．2 tRNA~(Leu)的T7体外转录 | 第36-37页 |
| 2．3 酶活力测定 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-44页 |
| 3．1 E292突变后的LeuRS变种酶的“粗筛”能力 | 第37-39页 |
| 3．2 LeuRS以及变种酶对tRNA~(Leu)的误氨基酰化 | 第39-40页 |
| 3．3 tRNA~(Leu)等受体的接受茎参与LeuRS的编校反应 | 第40-43页 |
| 3．4 其它LeuRS变种酶对tRNA~(Leu)等受体的区分情况 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 第三章 大肠杆菌tRNA~(Leu)D环和T_ψC环间的三级结构碱基配对在氨基酰化和编校过程中均有重要作用 | 第53-82页 |
| 摘要 | 第53-54页 |
| 1 引言 | 第54-58页 |
| 2 材料与方法 | 第58-61页 |
| 2．1 材料 | 第58-59页 |
| 2．2 tRNA~(Leu)体外转录产物的制备 | 第59-60页 |
| 2．3 tRNA~(Leu)氨基酰和误氨基酰化反应的测定 | 第60-61页 |
| 2．4 编校反应中ATP消耗的测定 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-72页 |
| 3．1 tRNA~(Leu)变种的构建 | 第61-65页 |
| 3．2 突变对tRNA~(Leu)亮氨酰化活力的影响 | 第65-68页 |
| 3．3 tRNA~(Leu)变种的异亮氨酰化 | 第68-69页 |
| 3．4 tRNA~(Leu)参与的编校过程中的ATP消耗 | 第69-72页 |
| 4 讨论 | 第72-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 结论 | 第82-83页 |
| 发表论文目录 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
