| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 缩略词 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一部分 文献综述 | 第8-31页 |
| ·玉米遗传转化研究进展 | 第8-23页 |
| ·玉米再生体系 | 第8-10页 |
| ·目的基因与植物载体 | 第10-12页 |
| ·遗传转化方法 | 第12-19页 |
| ·农杆菌法 | 第12-15页 |
| ·基因枪法 | 第15-19页 |
| ·转化体的筛选和鉴定 | 第19页 |
| ·外源基因在转基因后代中的整合、表达和遗传 | 第19-20页 |
| ·转基因沉默及消除 | 第20-22页 |
| ·转基因植物的商品化生产 | 第22-23页 |
| ·拟南芥CBF1与植物对低温和干旱的抗性 | 第23-30页 |
| ·COR | 第23-26页 |
| ·CBF1 | 第26-28页 |
| ·CBF1在其它植物中的同源性 | 第28-29页 |
| ·拟南芥CBF1在改良冷敏植物对低温和干旱抗性的应用 | 第29-30页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 第二部分 CBF1基因载体的构建 | 第31-47页 |
| ·材料与方法 | 第31-39页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·实验方法 | 第33-39页 |
| ·载体构建路线 | 第33-34页 |
| ·质粒提取 | 第34-35页 |
| ·CBF1基因的克隆 | 第35页 |
| ·DNA片段回收 | 第35-36页 |
| ·PCR扩增的CBF1基因与T-载体的连接及转化 | 第36-37页 |
| ·T4 DNA连接酶作用下DNA片段和载体DNA的连接 | 第37页 |
| ·去磷酸化作用 | 第37-38页 |
| ·感受态细胞制备及转化 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·带有ApaⅠ位点的CBF1基因的扩增与克隆 | 第39-40页 |
| ·p35SCBF1Bar(基因枪表达载体)的构建 | 第40-43页 |
| ·pBpCBF1Bar(农杆菌表达载体) | 第43-45页 |
| ·讨论与结论 | 第45-47页 |
| 第三部分 玉米遗传转化体系的建立 | 第47-65页 |
| ·材料与方法 | 第47-55页 |
| ·材料 | 第47-49页 |
| ·方法 | 第49-55页 |
| ·玉米受体材料的准备 | 第49页 |
| ·基因枪法转化玉米 | 第49-51页 |
| ·根癌农杆菌法转化玉米 | 第51-52页 |
| ·转基因玉米植株的分子检测 | 第52-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-62页 |
| ·幼胚的分离和胚性愈伤组织的诱导 | 第55-56页 |
| ·基因枪法转化玉米 | 第56-59页 |
| ·农杆菌法转化玉米 | 第59-61页 |
| ·再生植株PCR分子检测 | 第61-62页 |
| ·讨论与结论 | 第62-65页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导 | 第62页 |
| ·bar标记基因的应用 | 第62页 |
| ·基因枪法转化玉米 | 第62页 |
| ·农杆菌法转化玉米 | 第62-64页 |
| ·PCR分子检测 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |