| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 课题的提出 | 第12-13页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第13-19页 |
| 1.2.1 水通道蛋白的基本性质 | 第13-16页 |
| 1.2.1.1 水通道蛋白的发现 | 第14页 |
| 1.2.1.2 水通道蛋白的结构 | 第14-15页 |
| 1.2.1.3 水通道蛋白的分类 | 第15-16页 |
| 1.2.2 水通道蛋白的运输功能 | 第16-17页 |
| 1.2.3 水通道蛋白的基因表达 | 第17-18页 |
| 1.2.3.1 植物水通道蛋白基因表达的组织特异性 | 第17页 |
| 1.2.3.2 非生物胁迫对水通道蛋白基因表达的影响 | 第17-18页 |
| 1.2.4 液泡膜水通道蛋白的相关研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 2 研究的主要内容 | 第21-22页 |
| 2.1 毛葡萄液泡膜水通道蛋白基因全长CDS区序列的克隆 | 第21页 |
| 2.2 干旱及复水对毛葡萄水分状况的影响及其与TIPs基因表达的关系 | 第21页 |
| 2.3 毛葡萄TIP基因在转基因拟南芥中的表达分析 | 第21-22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-36页 |
| 3.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 3.1.1 材料 | 第22页 |
| 3.1.2 主要试验仪器及设备 | 第22页 |
| 3.1.3 主要酶及化学试剂 | 第22-23页 |
| 3.2 试验设计与方法 | 第23-35页 |
| 3.2.1 材料培养与处理 | 第23页 |
| 3.2.2 野生毛葡萄水通道蛋白TIP基因的克隆与序列分析 | 第23-28页 |
| 3.2.2.1 葡萄总RNA的提取与反转录 | 第23-25页 |
| 3.2.2.2 野生毛葡萄VhTIPs基因cDNA片段的克隆 | 第25-26页 |
| 3.2.2.3 野生毛葡萄VhTIPs基因cDNA片段的回收 | 第26-27页 |
| 3.2.2.4 野生毛葡萄VhTIPs基因目的cDNA片段的连接 | 第27页 |
| 3.2.2.5 连接产物的转化 | 第27页 |
| 3.2.2.6 连接产物菌液PCR验证 | 第27-28页 |
| 3.2.2.7 野生毛葡萄VhTIPs基因cDNA片段的测序 | 第28页 |
| 3.2.3 VhTIPs的生物信息学分析 | 第28页 |
| 3.2.4 水分相关生理指标的测定方法 | 第28-30页 |
| 3.2.4.1 旱害级别鉴定及叶片水势的测定 | 第28页 |
| 3.2.4.2 叶片相对含水量的测定 | 第28-29页 |
| 3.2.4.3 质膜相对透性的测定 | 第29页 |
| 3.2.4.4 光合参数的测定 | 第29页 |
| 3.2.4.5 水力结构特征的测定 | 第29-30页 |
| 3.2.5 野生毛葡萄VhTIPs基因的表达模式分析 | 第30-31页 |
| 3.2.5.1 不同组织中的表达模式 | 第30-31页 |
| 3.2.5.2 干旱胁迫及复水处理对TIPs基因表达模式的影响 | 第31页 |
| 3.2.6 超量表达目的基因拟南芥株系的获得 | 第31-34页 |
| 3.2.6.1 植物表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.2.6.2 超量表达载体对拟南芥的遗传转化 | 第32-33页 |
| 3.2.6.3 超量表达目的基因的拟南芥株系的抗性检测 | 第33-34页 |
| 3.2.7 转基因拟南芥干旱胁迫耐性分析 | 第34-35页 |
| 3.2.7.1 干旱胁迫下转基因拟南芥幼苗地上部分叶片水势的测定 | 第34-35页 |
| 3.2.7.2 干旱胁迫下转基因拟南芥幼苗地上部分叶片相对含水量的测定 | 第35页 |
| 3.2.7.3 干旱胁迫下转基因拟南芥幼苗电导率的测定 | 第35页 |
| 3.2.7.4 干旱胁迫下转基因拟南芥幼苗丙二醛含量的测定 | 第35页 |
| 3.2.7.5 干旱胁迫下转基因拟南芥幼苗脯氨酸含量的测定 | 第35页 |
| 3.3 试验数据处理方法 | 第35-36页 |
| 4 结果与分析 | 第36-72页 |
| 4.1 毛葡萄VhTIPs基因全长CDs区的克隆 | 第36-38页 |
| 4.1.1 葡萄总RNA的提取 | 第36页 |
| 4.1.2 VhTIPs基因cDNA全长CDs区的克隆 | 第36-38页 |
| 4.2 毛葡萄VhTIPs的生物信息学分析 | 第38-46页 |
| 4.2.1 毛葡萄VhTIPs基因的核苷酸序列对应的氨基酸序列 | 第38-40页 |
| 4.2.2 毛葡萄VhTIPs的理化性质分析 | 第40页 |
| 4.2.3 毛葡萄VhTIPs跨膜区及其信号肽预测 | 第40-41页 |
| 4.2.4 毛葡萄VhTIPs二级结构预测 | 第41页 |
| 4.2.5 毛葡萄VhTIPs三级结构预测 | 第41-42页 |
| 4.2.6 毛葡萄VhTIPs的亚细胞定位及磷酸化位点预测 | 第42-43页 |
| 4.2.7 毛葡萄VhTIPs编码区的核苷酸序列比对 | 第43-44页 |
| 4.2.8 毛葡萄VhTIPs与其他植物TIPs的核苷酸同源性分析 | 第44-45页 |
| 4.2.9 毛葡萄VhTIPs与其他植物TIPs的核苷酸遗传进化关系分析 | 第45-46页 |
| 4.3 干旱-复水过程中葡萄形态变化 | 第46页 |
| 4.4 干旱-复水过程中生理指标的变化 | 第46-55页 |
| 4.4.1 葡萄叶片水势的变化 | 第46-47页 |
| 4.4.2 葡萄叶片相对含水量的变化 | 第47-48页 |
| 4.4.3 葡萄根、茎、叶质膜透性的变化 | 第48-50页 |
| 4.4.4 葡萄叶片光合参数的变化 | 第50-52页 |
| 4.4.5 葡萄水力结构特征的变化 | 第52-55页 |
| 4.5 葡萄TIPs基因表达模式分析 | 第55-64页 |
| 4.5.1 TIPs基因的组织特异性表达模式分析 | 第55-58页 |
| 4.5.2 TIPs基因在土壤干旱-复水模式下的表达分析 | 第58-64页 |
| 4.5.2.1 根中TIPs基因在土壤干旱-复水模式下的表达 | 第58-60页 |
| 4.5.2.2 茎中TIPs基因在土壤干旱-复水模式下的表达 | 第60-62页 |
| 4.5.2.3 叶中TIPs基因在土壤干旱-复水模式下的表达 | 第62-64页 |
| 4.6 葡萄TIPs基因的表达与水分相关生理指标之间的相关性 | 第64-65页 |
| 4.7 VhTIP2;1基因在拟南芥中的过量表达研究 | 第65-72页 |
| 4.7.1 植物遗传表达载体的构建 | 第65-66页 |
| 4.7.2 VhTIP2;1基因在拟南芥中的遗传转化及抗性筛选 | 第66-67页 |
| 4.7.3 转基因拟南芥的PCR筛选 | 第67-68页 |
| 4.7.4 转基因拟南芥的RT-PCR检测 | 第68页 |
| 4.7.5 转基因拟南芥的qRT-PCR检测 | 第68-69页 |
| 4.7.6 转基因拟南芥干旱胁迫耐性分析 | 第69-72页 |
| 4.7.6.1 干旱胁迫对拟南芥外观形态的影响 | 第69页 |
| 4.7.6.2 干旱胁迫对转基因拟南芥幼苗地上部分叶片水势的影响 | 第69-70页 |
| 4.7.6.3 干旱胁迫对转基因拟南芥幼苗地上部分叶片相对含水量的影响 | 第70页 |
| 4.7.6.4 干旱胁迫对转基因拟南芥幼苗丙二醛含量的影响 | 第70-71页 |
| 4.7.6.5 干旱胁迫对转基因拟南芥幼苗脯氨酸含量的影响 | 第71页 |
| 4.7.6.6 干旱胁迫对转基因拟南芥幼苗电导率的影响 | 第71-72页 |
| 5 讨论 | 第72-80页 |
| 5.1 不同抗旱性葡萄植株水分运输的差异 | 第72-73页 |
| 5.2 葡萄TIPs的蛋白结构分析及组织表达特性 | 第73-75页 |
| 5.3 葡萄TIPs与水分运输之间的关系 | 第75-80页 |
| 6 结论 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 参考文献References | 第82-89页 |
| 缩写词（Abbreviations） | 第89-90页 |
| 在读硕士期间发表的论文 | 第90-91页 |
| 附录 | 第91-93页 |
