摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-14页 |
第1章 引言 | 第14-17页 |
第2章 大鼠MSCs 的分离、培养及生物学特性研究 | 第17-29页 |
·实验材料 | 第18-20页 |
·实验动物 | 第18页 |
·主要仪器与产地 | 第18-19页 |
·主要试剂与产地 | 第19页 |
·试剂的配制 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20-22页 |
·MSCs 的分离和培养 | 第20-21页 |
·MSCs 的活性测定 | 第21页 |
·MSCs 的鉴定 | 第21-22页 |
·结果 | 第22-24页 |
·MSCs 的原代培养 | 第22页 |
·MSCs的传代培养 | 第22-23页 |
·MSCs 的生长曲线及鉴定 | 第23-24页 |
·讨论 | 第24-29页 |
·MSCs 自我更新及多向分化潜能 | 第24-25页 |
·MSCs的异质性 | 第25-26页 |
·MSCs 的分离方法 | 第26-27页 |
·MSCs 的生长特性 | 第27-29页 |
第3章 BMP7 基因转染MSCs 的研究 | 第29-48页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·主要仪器与产地 | 第29-30页 |
·主要试剂与产地 | 第30页 |
·试剂的配制 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-38页 |
·BMP-7 慢病毒载体的构建 | 第31-35页 |
·病毒感染细胞 | 第35-36页 |
·重组蛋白表达检测 | 第36-38页 |
·结果 | 第38-42页 |
·BMP-7 慢病毒载体构建成功 | 第38-41页 |
·病毒成功转染大鼠 MSCs | 第41页 |
·重组 MSCs 表达 BMP7 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-48页 |
·载体的选择 | 第42-45页 |
·标记方法的选择 | 第45-46页 |
·靶细胞的选择 | 第46-48页 |
第4章 BMP7 基因修饰的 MSCs 对肾 IRI 修复作用的研究 | 第48-101页 |
·实验材料 | 第48-53页 |
·实验动物和分组 | 第48-49页 |
·主要仪器与产地 | 第49-50页 |
·主要试剂与产地 | 第50-51页 |
·试剂的配制 | 第51-53页 |
·实验方法 | 第53-66页 |
·实验流程 | 第53页 |
·大鼠MSCs的分离和培养 | 第53页 |
·BMP-7 慢病毒载体的构建 | 第53页 |
·携带BMP-7的慢病毒(表达GFP)感染大鼠MSCs | 第53页 |
·肾脏IRI大鼠模型的建立及MSCs移植 | 第53-54页 |
·大鼠肾脏标本的获取 | 第54-55页 |
·上皮钙粘蛋白(E-cadherin)免疫组织化学染色检查 | 第55-56页 |
·5-溴脱氧尿核苷(BrdU)免疫组织化学染色检查 | 第56-57页 |
·波形蛋白(Vimentin)免疫组织化学染色检查 | 第57页 |
·α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学染色检查 | 第57-58页 |
·胶原纤维 VG 染色 | 第58-59页 |
·上皮钙粘蛋白(E-cadherin)mRNA 含量的 RT-PCR 检测 | 第59-60页 |
·波形蛋白(Vimentin)m RNA 含量的RT-PCR 检测 | 第60-62页 |
·α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)m RNA 含量的 RT-PCR检测 | 第62-64页 |
·骨形成蛋白7(BMP7)m RNA 含量的 RT-PCR检测 | 第64-66页 |
·统计学分析 | 第66页 |
·结果 | 第66-90页 |
·BMP7 基因修饰的重组MSCs(表达GFP)构建成功 | 第66页 |
·大鼠肾脏 IRI 模型的建立成功 | 第66-69页 |
·外源MSCs 、BMP7-MSCs 于肾IRI 后在肾组织的分布状况 | 第69-71页 |
·外源MSCs 、BMP7-MSCs在肾IRI后定向分化为肾小管上皮细胞的情况 | 第71-72页 |
·外源MSCs 、BMP7-MSCs 对肾IRI 后肾功能的影响 | 第72-76页 |
·外源MSCs 、BMP7-MSCs对肾IRI后肾脏细胞增殖情况的影响 | 第76-80页 |
·外源MSCs 、BMP7-MSCs 对肾IRI 后肾间质纤维化的影响 | 第80-88页 |
·外源MSCs 、BMP7-MSCs 对肾IRI 后肾组织BMP7 表达的影响 | 第88-90页 |
·讨论 | 第90-101页 |
·肾功能衰竭的治疗概况 | 第90-91页 |
·BMP7 与肾 | 第91-92页 |
·BMP-7 的分布 | 第91页 |
·BMP-7 与肾脏发育 | 第91页 |
·BMP-7 对肾小管上皮细胞表型的维持 | 第91-92页 |
·BMP-7 对细胞外基质降解的促进作用 | 第92页 |
·BMP-7对炎症反应的抑制 | 第92页 |
·外源性 MSCs、BMP7-MSCs 向 IRI 肾脏趋向转移的情况 | 第92-95页 |
·MSCs 的“归巢”特性 | 第92-94页 |
·BMP7-MSCs 在肾 IRI 后的“归巢” | 第94-95页 |
·BMP7 对外源性MSCs 在肾IRI 后向肾小管细胞定向分化的影响 | 第95-97页 |
·MSCs的多向分化潜能 | 第95页 |
·外源性MSCs、BMP7-MSCs在肾IRI后向肾细胞定向分化、修复损伤的情况 | 第95-97页 |
·外源性MSCs、BMP7-MSCs对肾IRI后细胞增殖的影响 | 第97页 |
·外源性MSCs、BMP7-MSCs对肾IRI后间质纤维化的影响 | 第97-99页 |
·BMP-7 对肾IRI 后间质纤维化的影响 | 第98页 |
·外源MSCs 对肾IRI 后间质纤维化的影响 | 第98页 |
·BMP7-MSCs 对肾 IRI 后间质纤维化的影响 | 第98-99页 |
·肾IRI大鼠模型建立的经验总结 | 第99-101页 |
第5章 结论与展望 | 第101-102页 |
·结论 | 第101页 |
·展望 | 第101-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-114页 |
附录A BMP7 基因信息 | 第114-117页 |
附录B 综述 | 第117-125页 |
符彦基攻读学位期间的研究成果 | 第125页 |