| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-8页 |
| 英文缩写一览表 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| ·酵母菌类型及其鉴定方法 | 第10页 |
| ·国内外研究进展 | 第10-11页 |
| ·5.85 rDNA 和ITS 序列分析的理论依据、原理及方法 | 第11-13页 |
| ·5.85 rDNA 和ITS 序列分析的理论依据 | 第11-12页 |
| ·rDNA和ITS序列分析的原理 | 第12页 |
| ·5.85 rDNA和ITS序列分析的方法 | 第12-13页 |
| ·基因组DNA的获得 | 第12页 |
| ·5.85 rRNA和ITS基因片段的获得 | 第12-13页 |
| ·通过5.85 rRNA和ITS基因片段分析对酵母菌进行分类鉴定 | 第13页 |
| ·生物信息学 | 第13-14页 |
| ·研究目的及主要内容 | 第14-15页 |
| 课题技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-25页 |
| ·实验材料 | 第16-18页 |
| ·样品来源 | 第16页 |
| ·培养基及生理生化试验用试剂 | 第16-17页 |
| ·缓冲液与常用试剂的配制 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-25页 |
| ·菌株的活化及供试菌液的制备 | 第18页 |
| ·菌株培养及基因组 DNA 的提取 | 第18-20页 |
| ·DNA 样品的检测 | 第20-21页 |
| ·ITS-PCR 扩增体系 | 第21-22页 |
| ·PCR 产物检测 | 第22页 |
| ·ITS-PCR 产物纯化 | 第22页 |
| ·ITS 和5.85 rDNA 的克隆 | 第22-25页 |
| ·与质粒载体pMD19-T 连接 | 第22页 |
| ·转化 | 第22-25页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·转化 | 第23页 |
| ·Amp/X-gal/IPTG 抗性培养基对克隆子的初步筛选 | 第23-24页 |
| ·挑菌、扩增 | 第24页 |
| ·PCR法鉴定重组质粒 | 第24页 |
| ·序列测定 | 第24页 |
| ·数据分析——同源性分析和系统发育树的构建 | 第24-25页 |
| 第三章 实验结果 | 第25-34页 |
| ·5.85 rDNA 和ITS 序列同源性分析结果 | 第25-34页 |
| ·5.85 rDNA 和ITS 序列扩增、克隆及测序 | 第25-26页 |
| ·5.85 rDNA 和ITS 序列同源性分析及系统发育树的建立 | 第26-34页 |
| 第四章 讨论 | 第34-36页 |
| ·5.85 rDNA 和ITS 序列同源性分析在酵母菌鉴定中的应用 | 第34-35页 |
| ·5.85 rDNA 和ITS 序列同源性分析是酵母菌鉴定快速而有效的方法 | 第35-36页 |
| 第五章 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 附录 | 第40-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |
