摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
引言 | 第12-28页 |
1. 人参皂甙的分类和结构 | 第12-13页 |
2. 人参皂甙的药理学作用 | 第13-15页 |
·人参皂甙对循环系统作用 | 第13-14页 |
·人参皂甙对神经系统的作用 | 第14页 |
·人参皂甙Rb_1 对免疫系统的作用 | 第14页 |
·人参皂甙的抗衰老研究 | 第14-15页 |
·人参皂甙抗肿瘤作用 | 第15页 |
3.β-葡萄糖苷酶及其性质研究进展 | 第15-22页 |
·β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第16页 |
·β-葡萄糖苷酶的催化反应机制 | 第16-17页 |
·β-葡萄糖苷酶活性的测定方法 | 第17-18页 |
·β-葡萄糖苷酶的分子生物学研究 | 第18-19页 |
·β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第19-22页 |
4. 人参皂甙的转化 | 第22-26页 |
·微生物发酵法 | 第22-24页 |
·酶法 | 第24-26页 |
5. 本论文的研究目的和意义 | 第26-28页 |
第一章 人参皂甙RB_1水解酶分离纯化方法的探索 | 第28-40页 |
前言 | 第28页 |
1. 实验材料 | 第28-29页 |
·人参皂甙的提取分离纯化 | 第28页 |
·菌种来源 | 第28-29页 |
2. 实验试剂和仪器 | 第29-30页 |
·试剂 | 第29页 |
·仪器 | 第29-30页 |
3. 实验方法 | 第30-33页 |
·褐孢霉的培养 | 第30页 |
·酶活的检测方法 | 第30页 |
·蛋白含量的测定 | 第30-31页 |
·分离纯化过程 | 第31-32页 |
·SDS-PAGE 垂直板电泳 | 第32-33页 |
4. 结果与讨论 | 第33-39页 |
·粗酶液的提取 | 第33页 |
·超滤浓缩 | 第33-34页 |
·(NH_4)_2SO_4 盐析 | 第34-35页 |
·DEAE-Sepharose CL-6B 离子交换层析 | 第35页 |
·Sepharose CL-6B 层析 | 第35-37页 |
·Q-Sepharose fast flow | 第37页 |
·Mono Q HR 5/5 阴离子交换层析(HPLC) | 第37-38页 |
·SDS-PAGE 垂直板电泳 | 第38-39页 |
5. 小结 | 第39-40页 |
第二章 人参皂甙RB_1水解酶的分离纯化 | 第40-51页 |
前言 | 第40页 |
1. 实验材料 | 第40页 |
·人参皂甙Rb_1 | 第40页 |
·菌种来源 | 第40页 |
2. 实验试剂和仪器 | 第40-41页 |
·实验试剂 | 第40-41页 |
·实验仪器(同第一章) | 第41页 |
3. 实验方法 | 第41-43页 |
·褐孢霉的培养方法 | 第41页 |
·酶活的检测方法(同第一章) | 第41页 |
·蛋白含量的测定 Bradford 法(同第一章) | 第41页 |
·分离纯化过程 | 第41-43页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第43页 |
4. 实验结果与讨论 | 第43-49页 |
·培养时间的确定 | 第43-44页 |
·粗酶液的提取 | 第44页 |
·DEAE-纤维素吸附及NaCl 洗脱 | 第44-45页 |
·DEAE-Sepharose CL-6B 离子交换层析 | 第45-46页 |
·Sepharose CL-6B 分子筛层析 | 第46页 |
·Phenyl sepharose CL-4B 疏水层析柱 | 第46-47页 |
·Mono Q HR 5/5 阴离子交换层析(HPLC) | 第47-48页 |
·Bio-Scale CHT20-1 羟基磷灰石层析柱(HPLC) | 第48页 |
·Superose 6 10/300 GL 凝胶过滤(HPLC) | 第48-49页 |
4. 10 SDS-PAGE 垂直板电泳 | 第49-50页 |
5. 小结 | 第50-51页 |
第三章 人参皂甙RB1 水解酶的性质研究 | 第51-60页 |
前言 | 第51页 |
1. 实验材料 | 第51页 |
2. 实验试剂和仪器 | 第51-52页 |
·实验试剂 | 第51页 |
·实验仪器 | 第51-52页 |
3. 实验方法 | 第52-54页 |
·酶的最适反应pH 值 | 第52页 |
·酶的pH 稳定性 | 第52页 |
·酶的最适反应温度 | 第52页 |
·酶的温度稳定性 | 第52-53页 |
·金属离子和抑制剂对酶活性的影响 | 第53页 |
·动力学参数的测定 | 第53页 |
·底物特异性的测定 | 第53-54页 |
·酶的氨基酸序列分析 | 第54页 |
·酶解产物的确定 | 第54页 |
4 结果与讨论 | 第54-59页 |
·酶的最适温度和温度稳定性 | 第54-55页 |
·酶的最适反应pH 值和pH 稳定性 | 第55-56页 |
·金属离子和抑制剂对酶活性的影响 | 第56页 |
·动力学参数的测定 | 第56-57页 |
·底物专一性的测定 | 第57页 |
·酶的氨基酸序列分析 | 第57-58页 |
·酶解产物的确定 | 第58-59页 |
5. 小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66页 |