野生稻基因组富集文库的构建及抗性基因筛选
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 第一章 国内外研究现状 | 第9-24页 |
| ·野生稻的分布与分类 | 第9-10页 |
| ·野生稻有利性状的利用 | 第10-11页 |
| ·植物抗性基因的克隆策略 | 第11-16页 |
| ·图位克隆 | 第14-15页 |
| ·表型克隆 | 第15页 |
| ·转座子标签法 | 第15页 |
| ·mRNA差异显示技术 | 第15-16页 |
| ·大片断可转化基因组文库 | 第16-21页 |
| ·Cosmid文库 | 第17页 |
| ·YAC文库 | 第17页 |
| ·BAC文库 | 第17-18页 |
| ·构建植物基因组文库载体的选择 | 第18页 |
| ·可转化基因组文库的发展 | 第18-21页 |
| ·基因组文库与芯片技术 | 第21页 |
| ·RecA蛋白富集方法的原理及应用 | 第21-24页 |
| 第二章 研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第三章 实验材料 | 第26-29页 |
| ·野生稻、菌株和载体 | 第26页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第26-27页 |
| ·实验所用引物 | 第27-29页 |
| ·特异性引物 | 第27页 |
| ·简并特异性引物 | 第27-29页 |
| 第四章 实验方法 | 第29-41页 |
| ·野生稻基因组文库的构建 | 第29-34页 |
| ·野生稻基因组DNA的制备 | 第29-30页 |
| ·野生稻基因组DNA酶切 | 第30页 |
| ·pCAMBIA1301载体处理 | 第30-32页 |
| ·连接测试及转化 | 第32-33页 |
| ·连接及转化 | 第33页 |
| ·文库质量及稳定性检测 | 第33-34页 |
| ·野生稻液体文库的制备 | 第34页 |
| ·野生稻富集文库的构建 | 第34-37页 |
| ·富集探针制备及测序 | 第34-36页 |
| ·富集反应及转化 | 第36-37页 |
| ·富集文库的保存 | 第37页 |
| ·富集文库的杂交筛选 | 第37-39页 |
| ·杂交探针的制备 | 第37-38页 |
| ·杂交膜的处理 | 第38页 |
| ·杂交 | 第38-39页 |
| ·显色与压片 | 第39页 |
| ·阳性克隆鉴定及分析 | 第39-41页 |
| ·阳性克隆酶切图谱 | 第39-40页 |
| ·阳性克隆末端测序 | 第40页 |
| ·生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 第五章 结果与分析 | 第41-57页 |
| ·野生稻基因组文库 | 第41-46页 |
| ·高质量基因组DNA的制备 | 第41-43页 |
| ·载体处理 | 第43页 |
| ·连接测试 | 第43页 |
| ·连接及转化 | 第43-45页 |
| ·液体文库的制备 | 第45-46页 |
| ·野生稻富集文库的构建 | 第46-49页 |
| ·富集探针序列分析 | 第46-48页 |
| ·富集后转化 | 第48-49页 |
| ·富集文库的保存 | 第49页 |
| ·富集文库的杂交筛选和鉴定 | 第49-51页 |
| ·杂交探针质量分析 | 第49页 |
| ·杂交膜的处理 | 第49页 |
| ·杂交膜显色 | 第49-51页 |
| ·阳性克隆鉴定及生物信息学分析 | 第51-57页 |
| ·阳性克隆酶切图谱 | 第51-52页 |
| ·阳性克隆末端测序分析 | 第52-57页 |
| 第六章 讨论 | 第57-59页 |
| ·pCAMBIA1301构建基因组文库的优势 | 第57页 |
| ·RecA富集策略在基因组文库中的应用 | 第57页 |
| ·RecA富集策略应用及展望 | 第57-59页 |
| 结束语 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 作者在学期间取得的学术成果 | 第68-69页 |
| 附录A 仪器设备 | 第69-70页 |
| 附录B 试剂配方 | 第70-74页 |
| 附录C 缩略词 | 第74页 |
