| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 1 引言 | 第15-27页 |
| ·花生基因工程研究的意义 | 第15页 |
| ·植物启动子研究进展 | 第15-21页 |
| ·植物基因启动子核心结构及其功能 | 第16页 |
| ·植物启动子的类型以及在基因工程中的应用 | 第16-19页 |
| ·启动子效率的检测及活性比较 | 第19-20页 |
| ·种子特异型启动子在花生分子育种研究上的意义 | 第20-21页 |
| ·农杆菌介导法进行花生基因转化技术体系的研究 | 第21-26页 |
| ·农杆菌介导法进行植物基因转化的原理及研究进展 | 第21-22页 |
| ·农杆菌介导法基因转化的特点 | 第22页 |
| ·农杆菌介导法基因转化影响因素的研究 | 第22-24页 |
| ·农杆菌介导法基因转化花生的研究历程 | 第24-25页 |
| ·农杆菌介导法花生基因转化技术的研究进展 | 第25-26页 |
| ·研究的目的意义及主要内容 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-42页 |
| ·试验材料 | 第27-31页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·质粒和菌种 | 第27页 |
| ·PCR 扩增引物 | 第27-29页 |
| ·供试培养基 | 第29-30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-40页 |
| ·花生叶片总DNA 的提取和纯化 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA 的少量提取 | 第32页 |
| ·PCR 扩增体系 | 第32-35页 |
| ·PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳观察 | 第35-36页 |
| ·目的DNA 片段的克隆和测序 | 第36-39页 |
| ·种子特异表达载体的构建 | 第39页 |
| ·花生胚小叶外植体的制备与基因转化技术的基本流程 | 第39-40页 |
| ·试验设计 | 第40-41页 |
| ·种子特异表达载体的构建试验 | 第40-41页 |
| ·花生胚小叶再生体系的优化试验 | 第41页 |
| ·不同基因型花生的基因转化效率比较试验 | 第41页 |
| ·计算公式 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-68页 |
| ·花生基因组DNA 的提取 | 第42页 |
| ·目的片段的PCR 扩增 | 第42-44页 |
| ·OLEOSIN 启动子全长及其5’端缺失片段的扩增 | 第42-43页 |
| ·ARA H1 启动子全长及其5’端缺失片段的扩增 | 第43-44页 |
| ·目的DNA 片段的克隆 | 第44-48页 |
| ·OLEOSIN 启动子的克隆和重组质粒的鉴定 | 第45页 |
| ·ARA H1 启动子的克隆和重组质粒鉴定 | 第45-48页 |
| ·克隆片段的长度对连接效率的影响 | 第48页 |
| ·克隆启动子的测序及序列分析 | 第48-56页 |
| ·OLEOSIN 启动子的测序及序列分析 | 第48-53页 |
| ·ARA H1 启动子的测序及序列分析 | 第53-56页 |
| ·种子特异表达载体的构建 | 第56-61页 |
| ·种子特异表达载体PB-OL1584 的构建 | 第56-59页 |
| ·种子特异表达载体PB-AH1716 的构建 | 第59-61页 |
| ·花生胚小叶离体再生技术体系的优化 | 第61-64页 |
| ·花生胚小叶在五种芽丛诱导培养基上芽丛诱导率的差异分析 | 第61页 |
| ·芽丛诱导培养基对花生胚小叶植株再生率的影响 | 第61-63页 |
| ·在不同芽丛成苗培养基上植株再生率的差异分析 | 第63-64页 |
| ·不同基因型花生的基因转化效率比较 | 第64-68页 |
| ·农杆菌侵染后21 个基因型花生愈伤诱导率和芽丛诱导率的差异分析 | 第64页 |
| ·农杆菌侵染后21 个基因型花生植株再生率的差异分析 | 第64页 |
| ·21个基因型花生基因转化效率的比较 | 第64-66页 |
| ·转Γ-TMT 基因花生植株的PCR 分析 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| ·花生OL1584 及AH1968 启动子的序列分析 | 第68页 |
| ·不同长度DNA 片段PCR 扩增方法的优化 | 第68-69页 |
| ·提高目的DNA 克隆和重组子鉴定效率的方法探讨 | 第69页 |
| ·双酶切效率影响因素的分析 | 第69-70页 |
| ·激素和基因型对花生胚小叶离体再生效率的影响 | 第70页 |
| ·提高花生基因转化效率方法的探讨 | 第70页 |
| ·花生组织培养模式的改良及花叶PPT 抗性再生苗的获得 | 第70-71页 |
| ·后续工作 | 第71页 |
| 5 结论 | 第71-73页 |
| ·花生种子特异型启动子的克隆及表达载体构建 | 第71-72页 |
| ·花生胚小叶外值体离体再生技术体系的优化 | 第72页 |
| ·不同基因型花生的基因转化效率比较 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 附录 | 第82-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第89页 |
