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细菌氯霉素类药物耐药基因三重PCR检测试剂盒研究与应用

中文摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 前言第8-18页
   ·细菌耐药性检测方法研究状况第9-11页
   ·PCR试剂盒研究状况第11页
   ·氯霉素类药物应用及耐药状况第11-13页
   ·细菌对氯霉素类药物耐药机理研究第13-14页
   ·细菌对氯霉素类药物的耐药基因第14-16页
   ·试剂盒扩增基因的选择第16-17页
   ·本研究的前期工作基础第17页
   ·本研究的目的意义及创新点第17-18页
   ·技术路线第18页
2 试验材料第18-19页
   ·试验菌株第18页
   ·试验药品及试剂第18-19页
   ·试验仪器第19页
3 试验方法第19-27页
   ·引物设计第19页
   ·单基因PCR的扩增第19-20页
   ·耐药基因的测序第20页
   ·三重PCR反应体系的初步建立第20页
   ·三重PCR反应体系的优化第20-22页
   ·PCR模板制备方法的选择和优化第22-23页
   ·三重PCR模板的优化第23页
   ·试剂盒特异性试验第23-24页
   ·试剂盒灵敏度试验第24页
   ·重复性试验第24页
   ·试剂盒保存期试验第24-25页
   ·试剂盒的组装第25页
   ·试剂盒的应用第25-27页
   ·试剂盒操作规程草案第27页
4.试验结果第27-44页
   ·三重PCR引物设计结果第27页
   ·单基因PCR的扩增结果第27-28页
   ·阳性对照菌株PCR扩增产物测序结果及分析第28-31页
   ·三重PCR反应体系的初步建立结果第31页
   ·三重PCR反应体系的优化结果第31-35页
   ·PCR模板制备方法的选择第35页
   ·PCR模板制备方法的优化结果第35-36页
   ·试剂盒特异性试验结果第36-37页
   ·试剂盒灵敏度试验结果第37-38页
   ·试剂盒重复性试验结果第38页
   ·试剂盒保存期试验结果第38页
   ·试剂盒的外包装第38-39页
   ·试剂盒的应用结果第39-44页
   ·试剂盒操作规程草案的制订第44页
5 分析与讨论第44-50页
   ·扩增目的耐药基因的选择第44页
   ·关于多重PCR反应目的片段选择及引物设计原则第44-45页
   ·关于PCR反应模板制备方法的筛选与优化第45-46页
   ·关于多重PCR反应方法建立和优化的影响因素第46-47页
   ·影响试剂盒性能的其他因素第47-48页
   ·试剂盒保存期的影响因素第48页
   ·耐药基因检出率与耐药表型的符合性第48-49页
   ·关于我国各个省市分离菌中氯霉素耐药基因检出率第49-50页
6 结论第50-51页
参考文献:第51-58页
致谢第58-59页
附件第59-65页
 附件1 氯霉素类药物耐药基因多重POR检测试剂盒操作规程第59-64页
 附件2 试剂盒可能遇到的问题与解决办法第64-65页
攻读学位期间发表的学术论文目录第65页

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