中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
1 前言 | 第8-18页 |
·细菌耐药性检测方法研究状况 | 第9-11页 |
·PCR试剂盒研究状况 | 第11页 |
·氯霉素类药物应用及耐药状况 | 第11-13页 |
·细菌对氯霉素类药物耐药机理研究 | 第13-14页 |
·细菌对氯霉素类药物的耐药基因 | 第14-16页 |
·试剂盒扩增基因的选择 | 第16-17页 |
·本研究的前期工作基础 | 第17页 |
·本研究的目的意义及创新点 | 第17-18页 |
·技术路线 | 第18页 |
2 试验材料 | 第18-19页 |
·试验菌株 | 第18页 |
·试验药品及试剂 | 第18-19页 |
·试验仪器 | 第19页 |
3 试验方法 | 第19-27页 |
·引物设计 | 第19页 |
·单基因PCR的扩增 | 第19-20页 |
·耐药基因的测序 | 第20页 |
·三重PCR反应体系的初步建立 | 第20页 |
·三重PCR反应体系的优化 | 第20-22页 |
·PCR模板制备方法的选择和优化 | 第22-23页 |
·三重PCR模板的优化 | 第23页 |
·试剂盒特异性试验 | 第23-24页 |
·试剂盒灵敏度试验 | 第24页 |
·重复性试验 | 第24页 |
·试剂盒保存期试验 | 第24-25页 |
·试剂盒的组装 | 第25页 |
·试剂盒的应用 | 第25-27页 |
·试剂盒操作规程草案 | 第27页 |
4.试验结果 | 第27-44页 |
·三重PCR引物设计结果 | 第27页 |
·单基因PCR的扩增结果 | 第27-28页 |
·阳性对照菌株PCR扩增产物测序结果及分析 | 第28-31页 |
·三重PCR反应体系的初步建立结果 | 第31页 |
·三重PCR反应体系的优化结果 | 第31-35页 |
·PCR模板制备方法的选择 | 第35页 |
·PCR模板制备方法的优化结果 | 第35-36页 |
·试剂盒特异性试验结果 | 第36-37页 |
·试剂盒灵敏度试验结果 | 第37-38页 |
·试剂盒重复性试验结果 | 第38页 |
·试剂盒保存期试验结果 | 第38页 |
·试剂盒的外包装 | 第38-39页 |
·试剂盒的应用结果 | 第39-44页 |
·试剂盒操作规程草案的制订 | 第44页 |
5 分析与讨论 | 第44-50页 |
·扩增目的耐药基因的选择 | 第44页 |
·关于多重PCR反应目的片段选择及引物设计原则 | 第44-45页 |
·关于PCR反应模板制备方法的筛选与优化 | 第45-46页 |
·关于多重PCR反应方法建立和优化的影响因素 | 第46-47页 |
·影响试剂盒性能的其他因素 | 第47-48页 |
·试剂盒保存期的影响因素 | 第48页 |
·耐药基因检出率与耐药表型的符合性 | 第48-49页 |
·关于我国各个省市分离菌中氯霉素耐药基因检出率 | 第49-50页 |
6 结论 | 第50-51页 |
参考文献: | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
附件 | 第59-65页 |
附件1 氯霉素类药物耐药基因多重POR检测试剂盒操作规程 | 第59-64页 |
附件2 试剂盒可能遇到的问题与解决办法 | 第64-65页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第65页 |