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山羊胚胎干细胞的分离与培养

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
文献综述第12-38页
 第一章 胚胎干细胞的研究进展第12-27页
   ·小鼠胚胎干细胞的研究进展第12-13页
   ·人胚胎干细胞的研究进展第13-15页
   ·牛胚胎干细胞的研究进展第15-16页
     ·牛ESCs 的研究进展第15-16页
     ·牛EGCs 的研究进展第16页
   ·山羊和绵羊胚胎干细胞的研究进展第16-17页
     ·山羊和绵羊ESCs 的研究进展第16-17页
     ·山羊和绵羊EGCs 的研究进展第17页
   ·ESCS 多能性维持和自我更新的分子机制第17-22页
     ·ESCs 多能性维持和自我更新的信号通路第17-19页
     ·ESCs 多能性维持和自我更新的重要因子第19-22页
   ·家畜胚胎干细胞研究进展缓慢的原因第22-23页
   ·胚胎干细胞的应用前景第23-25页
     ·生产克隆动物第23页
     ·生产转基因动物第23-24页
     ·细胞、组织、器官的修复和移植治疗第24-25页
     ·药学研究第25页
   ·胚胎干细胞研究所面临的问题和挑战第25-27页
     ·ESCs 的建系第25页
     ·ESCs 的定向分化第25页
     ·移植排斥反应问题第25-26页
     ·ESCs 移植的致瘤问题第26页
     ·ESCs 临床应用所面临的伦理学问题第26-27页
 第二章 胚胎干细胞建系方法的研究第27-38页
   ·ESCS 的培养环境与条件第27-29页
     ·培养环境第27页
     ·培养基第27页
     ·分化抑制因子第27-28页
     ·饲养层第28-29页
   ·ESCS 的原代培养方法第29-31页
     ·全胚培养法第29页
     ·ICM 培养法第29-30页
     ·胚胎卵裂球培养法第30页
     ·孤雌胚胎培养法第30页
     ·克隆胚培养法第30页
     ·其他来源的原代培养第30-31页
   ·ESCS 的传代方法第31-32页
     ·机械法第31页
     ·酶消化法第31页
     ·机械法与酶消化法相结合第31-32页
   ·胚胎干细胞的鉴定方法第32-38页
     ·形态学鉴定第32页
     ·碱性磷酸酶活性检测第32页
     ·阶段特异性胚胎细胞表面抗原检测第32-33页
     ·全能性基因的检测第33页
     ·核型分析第33页
     ·体内分化实验第33-34页
     ·体外分化实验第34-37页
       ·心肌细胞第34-35页
       ·造血细胞第35页
       ·神经细胞第35-36页
       ·内皮细胞和血管第36页
       ·角膜上皮细胞第36-37页
     ·嵌合体制备第37-38页
试验研究第38-64页
 第三章 山羊胚胎干细胞的分离与培养第38-54页
   ·材料与方法第39-45页
     ·实验材料第39页
     ·实验方法第39-45页
   ·结果第45-51页
     ·山羊胚胎采集结果第45-46页
     ·不同处理方法对山羊ESCs 原代集落及传代培养的影响第46-47页
     ·传代方法对山羊ESCs 分离与培养的影响第47页
     ·克隆胚胎和孤雌激活胚胎分离培养山羊ESCs第47-49页
     ·山羊ESCs 的生长行为及形态学特征第49页
     ·山羊ESCs 免疫组化染色分析第49-50页
     ·山羊ESCs 多能性因子检测第50页
     ·山羊ESCs 体外诱导分化第50-51页
   ·讨论第51-52页
   ·小结第52-54页
 第四章 山羊胚胎生殖细胞的分离与培养第54-64页
   ·材料与方法第54-56页
     ·材料第54-55页
     ·试验方法第55-56页
   ·结果第56-61页
     ·山羊PGCs 的生长行为第56-57页
     ·不同培养液对山羊EGCs 体外培养的影响第57-58页
     ·不同传代方法对山羊EGCs 体外培养的影响第58页
     ·山羊EGCs AKP 染色和免疫组化染色结果第58-59页
     ·山羊EGCs 体外分化能力的鉴定第59-61页
     ·山羊EGCs 的RT-PCR 检测结果第61页
   ·讨论第61-62页
   ·小结第62-64页
结论第64-65页
创新点第65-66页
进一步研究的课题第66-67页
参考文献第67-77页
致谢第77-78页
作者简介第78页

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