| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 缩略语中英文对照 | 第16-17页 |
| 引言 | 第17-21页 |
| 参考文献 | 第19-21页 |
| 第一部分:文献综述 | 第21-55页 |
| 第一章 Wnt/β-catenin通路及其在卵泡发育中的作用 | 第21-33页 |
| 1 Wnt蛋白家族 | 第21-24页 |
| ·组成与分子结构 | 第21-22页 |
| ·Wnt蛋白的生化特性 | 第22-24页 |
| ·Wnt蛋白的纯化 | 第22页 |
| ·Wnt蛋白翻译后的糖基化 | 第22-23页 |
| ·Wnt蛋白翻译后的脂质化 | 第23页 |
| ·Wnt蛋白和胞外基质 | 第23-24页 |
| 2 Wnt/β-catenin通路及其在卵泡发育中的作用 | 第24-27页 |
| 3 研究展望 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-33页 |
| 第二章 Frizzled受体家族基因及其在卵泡发育中的作用 | 第33-43页 |
| 1 Frizzled基因组成及进化历史 | 第33-34页 |
| 2 Frizzled蛋白的初级结构和同源性分析 | 第34-36页 |
| ·初级结构分析 | 第34-35页 |
| ·物种间同源性分析 | 第35-36页 |
| 3 Frizzled蛋白定位与功能 | 第36-37页 |
| 4 Frizzled在啮齿动物卵巢中的的可能作用及研究前景 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 第三章 原位杂交技术及其在动物细胞学研究中的应用 | 第43-55页 |
| 1 原位杂交技术的发展及研究历史 | 第43-44页 |
| 2 RNA原位核酸杂交 | 第44-49页 |
| ·概述 | 第44-45页 |
| ·RNA原位杂交中的探针 | 第45-46页 |
| ·用寡核苷酸探针检测组织切片中的RNA原位杂交 | 第46-47页 |
| ·RNA原位杂交技术现状和进展 | 第47-49页 |
| 3 原位杂交技术在动物细胞学研究中的应用 | 第49-50页 |
| ·基因表达 | 第49页 |
| ·基因定位 | 第49-50页 |
| ·原位杂交技术在肿瘤研究中的应用 | 第50页 |
| 4 展望 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 第二部分 试验研究 | 第55-99页 |
| 第四章 小鼠动情周期的判断与证实 | 第55-64页 |
| 1 材料与方法 | 第56-59页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·实验动物 | 第56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-59页 |
| ·动情周期判断与证实 | 第57页 |
| ·动情周期判断 | 第57页 |
| ·动情周期证实 | 第57页 |
| ·组织样品收集 | 第57页 |
| ·RNA提取与纯化 | 第57-58页 |
| ·反转录(RT) | 第58页 |
| ·Real-time Q-PCR定量分析 | 第58-59页 |
| ·引物设计 | 第58-59页 |
| ·Real-time Q-PCR | 第59页 |
| ·统计分析 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-62页 |
| ·动情周期的判断 | 第59-60页 |
| ·动情周期划分准确性的证实 | 第60-62页 |
| 3 讨论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-64页 |
| 第五章 Frizzled家族基因mRNA在小鼠动情周期卵巢组织中的表达规律 | 第64-71页 |
| 1 材料与方法 | 第65-67页 |
| ·材料 | 第65页 |
| ·实验动物 | 第65页 |
| ·主要仪器 | 第65页 |
| ·主要试剂 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-67页 |
| ·卵巢组织样品收集 | 第65页 |
| ·RNA提取与纯化 | 第65页 |
| ·反转录 | 第65-66页 |
| ·Real-time PCR定量分析 | 第66-67页 |
| ·引物设计 | 第66-67页 |
| ·Real-time PCR | 第67页 |
| ·统计分析 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-71页 |
| 第六章 Frizzled 2在小鼠动情周期卵巢中的时空表达 | 第71-86页 |
| 1 材料与方法 | 第72-77页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·实验动物 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72页 |
| ·主要试剂及配制 | 第72-73页 |
| ·主要试剂 | 第72-73页 |
| ·主要试剂配制 | 第73页 |
| ·方法 | 第73-77页 |
| ·动物材料收集 | 第73-74页 |
| ·卵巢组织样品的收集 | 第73页 |
| ·石蜡材料的包埋 | 第73-74页 |
| ·总RNA提取和real-time Q-PCR分析 | 第74页 |
| ·原位杂交(ISH) | 第74-75页 |
| ·免疫组织化学(IHC) | 第75-76页 |
| ·Western印迹杂交 | 第76页 |
| ·总蛋白提取(Trizol法)及样品制备 | 第76页 |
| ·Western blotting | 第76页 |
| ·统计分析 | 第76-77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-82页 |
| ·小鼠卵巢中Frizzled 2的mRNA和蛋白质的时间表达模式 | 第77页 |
| ·Frizzled 2 mRNA在小鼠动情周期卵巢上的定位 | 第77页 |
| ·Frizzled 2蛋白质在小鼠动情周期卵巢上的免疫定位 | 第77-82页 |
| 3 讨论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-86页 |
| 第七章 Frizzled 3的mRNA和蛋白质在小鼠动情周期卵巢中的表达定位规律 | 第86-99页 |
| 1 材料与方法 | 第87-89页 |
| ·材料 | 第87-88页 |
| ·实验动物 | 第87页 |
| ·主要仪器 | 第87-88页 |
| ·主要试剂及配制 | 第88页 |
| ·主要试剂 | 第88页 |
| ·主要试剂配制 | 第88页 |
| ·方法 | 第88-89页 |
| ·动物材料收集 | 第88页 |
| ·总RNA提取和real-time Q-PCR分析 | 第88页 |
| ·原位杂交 | 第88-89页 |
| ·免疫组织化学 | 第89页 |
| ·统计分析 | 第89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-93页 |
| ·小鼠动情周期卵巢中Frizzled 3 mRNA的表达规律 | 第89页 |
| ·小鼠动情周期卵巢上Frizzled 3 mRNA的空间表达规律 | 第89-91页 |
| ·Frizzled 3蛋白质在小鼠动情周期卵巢上的免疫定位 | 第91-93页 |
| 3 讨论 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-99页 |
| 全文结论 | 第99-101页 |
| 创新 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第105-107页 |
| 附录 | 第107-115页 |
| 附录一、试剂配方 | 第107-113页 |
| 附录二、试验图片 | 第113-115页 |
