摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
本文常用缩写词 | 第13-14页 |
前言 | 第14-15页 |
第一篇 文献综述 | 第15-47页 |
第一章 迟缓爱德华菌研究进展 | 第15-31页 |
1 迟缓爱德华菌 | 第16-19页 |
2 环境与迟缓爱德华菌病 | 第19页 |
3 致病机理 | 第19-25页 |
·胞外产物(ECP)和胞内成分(ICC) | 第20-22页 |
·外膜蛋白(OMP) | 第22-23页 |
·运动性(Motility) | 第23页 |
·Ⅲ型分泌系统(Type Ⅲ secretion system,TTSS) | 第23-25页 |
·毒力基因(Virulence Genes) | 第25页 |
4 病理和诊断 | 第25-27页 |
·概述 | 第25-26页 |
·组织病理学 | 第26页 |
·血液病理学和血清学 | 第26页 |
·免疫相关基因的表达 | 第26页 |
·分子诊断法 | 第26-27页 |
5 防治 | 第27-29页 |
6 总结与展望 | 第29-31页 |
第二章 细菌菌蜕研究进展 | 第31-47页 |
1 菌蜕形成的机制 | 第31-32页 |
2 菌蜕的制备 | 第32-33页 |
3 菌蜕的应用 | 第33-36页 |
·菌蜕疫苗 | 第33-35页 |
·菌蜕疫苗与细胞免疫 | 第35-36页 |
·菌蜕疫苗与粘膜免疫 | 第36页 |
4 菌蜕作为抗原、核酸和药物的载体 | 第36-44页 |
·菌蜕作为抗原载体 | 第37-42页 |
·菌蜕作为核酸载体 | 第42-43页 |
·菌蜕作为药物载体 | 第43-44页 |
5 免疫佐剂 | 第44-45页 |
6 展望 | 第45-47页 |
第二篇 试验研究 | 第47-111页 |
第三章 迟缓爱德华菌制苗菌株的筛选 | 第47-65页 |
1 材料和方法 | 第48-52页 |
·菌株与载体 | 第48页 |
·主要试剂与培养基 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·形态学观察 | 第48页 |
·选择性培养基筛选 | 第48页 |
·生理生化测定 | 第48页 |
·PCR鉴定和16S rDNA序列分析 | 第48-49页 |
·药物敏感实验 | 第49-50页 |
·温度对迟缓爱德华菌生长的影响 | 第50页 |
·四株迟缓爱德华菌体外溶血性分析 | 第50页 |
·迟缓爱德华菌CD株对斑马鱼和小鼠半致死浓度(LD_(50))的测定 | 第50-51页 |
·PCR扩增迟缓爱德华菌主要毒力基因 | 第51-52页 |
2 结果 | 第52-62页 |
·形态学观察结果 | 第52页 |
·选择性培养基筛选 | 第52页 |
·生理生化测试结果 | 第52-53页 |
·PCR鉴定和16S rDNA序列分析 | 第53页 |
·药物敏感实验 | 第53页 |
·温度对迟缓爱德华菌生长的影响 | 第53页 |
·四株迟缓爱德华菌在体外的溶血特性 | 第53-57页 |
·迟缓爱德华菌CD株对斑马鱼和小鼠半致死浓度(LD_(50))测定 | 第57-59页 |
·PCR扩增迟缓爱德华菌主要毒力基因 | 第59-62页 |
3 讨论 | 第62-65页 |
第四章 迟缓爱德华菌菌蜕疫苗的制备 | 第65-79页 |
1 材料与方法 | 第66-68页 |
·菌株与载体 | 第66页 |
·主要试剂与培养基 | 第66页 |
·主要仪器 | 第66页 |
·溶菌质粒载体的构建 | 第66-68页 |
2 结果 | 第68-76页 |
·噬菌体PhiX174溶菌基因的克隆、筛选与鉴定 | 第68-69页 |
·重组溶菌质粒的鉴定 | 第69-70页 |
·溶菌动力学试验 | 第70-74页 |
·扫描电镜和透射电镜观察 | 第74-76页 |
3 讨论 | 第76-79页 |
第五章 以小鼠动物模型评价迟缓爱德华菌菌蜕疫苗的口服免疫效果 | 第79-89页 |
1 材料与方法 | 第80-81页 |
·菌株与载体 | 第80页 |
·主要试剂与培养基 | 第80页 |
·主要仪器 | 第80页 |
·疫苗制备 | 第80页 |
·动物免疫及分组 | 第80页 |
·小鼠血清抗体的检测 | 第80-81页 |
·流式细胞分析 | 第81页 |
·攻击保护试验 | 第81页 |
·统计分析 | 第81页 |
2 结果 | 第81-86页 |
·免疫与攻击试验 | 第81-82页 |
·抗体测定 | 第82-83页 |
·T细胞亚型分析 | 第83-86页 |
3 讨论 | 第86-89页 |
第六章 迟缓爱德华菌菌蜕疫苗对斑马鱼的免疫保护试验 | 第89-95页 |
1 材料与方法 | 第90-91页 |
·菌株与载体 | 第90页 |
·主要试剂与培养基 | 第90页 |
·主要仪器 | 第90页 |
·动物免疫及分组 | 第90页 |
·攻击试验 | 第90页 |
·白细胞吞噬活性测定 | 第90页 |
·统计分析 | 第90-91页 |
2 结果 | 第91-93页 |
·白细胞吞噬活性 | 第91-92页 |
·免疫与攻击试验 | 第92-93页 |
3 讨论 | 第93-95页 |
第七章 应用噬菌体裂解基因和葡萄球菌核酸酶基因共表达制备菌蜕疫苗 | 第95-111页 |
1 材料与方法 | 第96-100页 |
·菌株与载体 | 第96页 |
·主要试剂与培养基 | 第96页 |
·主要仪器 | 第96页 |
·溶菌质粒载体的构建 | 第96-100页 |
2 结果 | 第100-108页 |
·葡萄球菌核酸酶A基因的克隆、筛选与鉴定 | 第100-101页 |
·重组溶菌质粒的鉴定 | 第101-103页 |
·溶菌动力学试验 | 第103-108页 |
3 讨论 | 第108-111页 |
全文总结 | 第111-113页 |
参考文献 | 第113-129页 |
附录 | 第129-133页 |
致谢 | 第133-135页 |
博士期间发表论文 | 第135页 |