摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
·棉花色素腺体及棉酚的研究进展 | 第12-17页 |
·棉花色素腺体及其多样性 | 第12-13页 |
·棉酚的化学 | 第13页 |
·棉酚的生物合成及代谢的分子调节 | 第13-15页 |
·棉酚的生物合成过程中关键酶基因的克隆 | 第15-16页 |
·棉酚腺体的遗传特性 | 第16-17页 |
·控制棉花显性无腺体性状的基因研究进展 | 第17-18页 |
·控制棉花无腺体性状的基因 GI_2~e | 第17页 |
·棉花显性无腺体基因 GI_2~e 在育种上的应用 | 第17页 |
·棉花显性无腺体基因 GI_2~e 的分子标记 | 第17-18页 |
·国内外低酚棉育种概况 | 第18-19页 |
·分离植物差异表达基因的方法 | 第19-23页 |
·mRNA 差异显示技术 | 第19-20页 |
·基因表达的序列分析 | 第20页 |
·cDNA 微阵列技术 | 第20页 |
·抑制消减杂交 | 第20-23页 |
·抑制消减杂交技术原理及技术流程 | 第20-22页 |
·抑制消减杂交技术评价 | 第22页 |
·抑制消减杂交技术在分离植物差异表达基因中的应用 | 第22-23页 |
·研究的目的与意义 | 第23-24页 |
第二章 抑制消减杂交法构建棉花显性无腺体 cDNA 文库 | 第24-40页 |
·试验材料与方法 | 第24-36页 |
·试验材料 | 第24-27页 |
·植物材料 | 第24页 |
·试剂盒和酶 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25-26页 |
·菌株及克隆载体 | 第26页 |
·引物序列 | 第26-27页 |
·试验方法 | 第27-36页 |
·总 RNA 的提取 | 第27页 |
·总 RNA 的检测 | 第27-28页 |
·mRNA 的分离纯化 | 第28页 |
·抑制消减杂交 | 第28-34页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 |
·cDNA 第二链的合成 | 第29-30页 |
·Rsa I 酶切及纯化 | 第30页 |
·接头连接 | 第30-31页 |
·第一次杂交 | 第31-32页 |
·第二次杂交 | 第32页 |
·PCR 扩增 | 第32-34页 |
·消减文库生成 | 第34-36页 |
·载体连接 | 第34页 |
·转化 | 第34-35页 |
·转化重组子的鉴定 | 第35页 |
·文库保存 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-38页 |
·总 RNA 提取、mRNA 纯化及检测 | 第36页 |
·双链cDNA(dscDNA)合成与酶切 | 第36-37页 |
·二次 PCR 产物分析 | 第37页 |
·消减文库中插入片段的 PCR 鉴定 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第三章 棉花显性无腺体抑制消减杂交文库的筛选及差异表达序列的分析 | 第40-50页 |
·试验材料与方法 | 第40-42页 |
·试验材料 | 第40页 |
·文库材料 | 第40页 |
·试验试剂 | 第40页 |
·试验方法 | 第40-42页 |
·高密度杂交膜的制备 | 第40-41页 |
·探针标记及纯化 | 第41页 |
·反向 Northern 杂交及显色 | 第41-42页 |
·差异表达克隆选取 | 第42页 |
·测序 | 第42页 |
·差异表达 EST 生物信息学分析 | 第42页 |
·载体和接头序列的识别与去除 | 第42页 |
·与 NCBI 公共数据库做序列同源性比对 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-48页 |
·反向 Northern 杂交筛选结果 | 第42-43页 |
·差异表达基因的生物信息学分析 | 第43-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
第四章 两个显性无腺体相关基因的克隆与序列分析 | 第50-65页 |
·试验材料与方法 | 第50-54页 |
·试验材料 | 第50-51页 |
·植物材料与试验试剂 | 第50页 |
·试验所用引物 | 第50-51页 |
·试验方法 | 第51-54页 |
·总 RNA 的提取 | 第51页 |
·RACE 实验 | 第51-54页 |
·反转录cDNA 第一链的合成 | 第51页 |
·PCR 扩增 | 第51-53页 |
·目的片段回收 | 第53页 |
·回收片段连接入载体 | 第53页 |
·转化同2.1.2.5.2 | 第53页 |
·转化重组子鉴定 | 第53-54页 |
·测序及序列分析 | 第54页 |
·结果与分析 | 第54-64页 |
·4-FA11 全长基因 RACE 及其生物信息学分析 | 第54-60页 |
·RACE 获得4-FA11 基因序列 | 第54-56页 |
·克隆得到的序列分析 | 第56-60页 |
·核苷酸序列的相似性分析 | 第56-57页 |
·推导的氨基酸序列分析 | 第57-60页 |
·4-FA12 全长基因 RACE 及其生物信息学分析 | 第60-64页 |
·RACE 获得4-FA12 基因序列 | 第60-61页 |
·克隆得到的序列分析 | 第61-64页 |
·核苷酸序列的相似性分析 | 第61-62页 |
·推导的氨基酸序列分析 | 第62-64页 |
·讨论 | 第64-65页 |
第五章 全文结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简历 | 第74页 |