| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-36页 |
| 1 蚓激酶的研究进展 | 第16-23页 |
| ·蚓激酶的分离纯化 | 第16-18页 |
| ·蚓激酶分离纯化方法 | 第16页 |
| ·蚓激酶的分离纯化的研究进展 | 第16-18页 |
| ·蚓激酶的理化特性 | 第18页 |
| ·蚓激酶的分子生物学特性 | 第18-19页 |
| ·蚓激酶组分 | 第18-19页 |
| ·蚓激酶的核苷酸编码序列及同源性比较 | 第19页 |
| ·蚓激酶的纤溶特性的研究 | 第19-21页 |
| ·对纤维蛋白原及纤溶酶原研究 | 第19-20页 |
| ·底物特异性研究 | 第20页 |
| ·酶抑制剂的研究 | 第20-21页 |
| ·重组蚓激酶的表达 | 第21-22页 |
| ·蚓激酶的应用 | 第22页 |
| ·存在的问题 | 第22-23页 |
| ·展望 | 第23页 |
| 2 植物生物反应器的研究进展 | 第23-26页 |
| ·植物外源蛋白表达系统 | 第24-25页 |
| ·稳定的遗传表达系统 | 第24页 |
| ·植物病毒表达系统 | 第24页 |
| ·植物叶绿体表达系统 | 第24页 |
| ·油体表达系统 | 第24-25页 |
| ·植物反应器的优点 | 第25页 |
| ·植物反应器是一种高效、廉价的生产系统 | 第25页 |
| ·具有真核生物的加工修饰功能 | 第25页 |
| ·具有应用安全性 | 第25页 |
| ·存在的问题 | 第25-26页 |
| ·外源蛋白在植物中表达一直都存在表达量低的问题 | 第25-26页 |
| ·适用于做转基因宿主的植物范围还很窄 | 第26页 |
| ·复杂糖基化问题 | 第26页 |
| ·植物生产的药用蛋白口服时易被胃蛋白酶降解 | 第26页 |
| ·蛋白提取加工生产成本非常高 | 第26页 |
| ·展望 | 第26页 |
| 3 苜蓿生物技术的研究进展 | 第26-30页 |
| ·苜蓿的组织培养 | 第26-28页 |
| ·品种基因型 | 第27页 |
| ·外植体的类型 | 第27页 |
| ·培养基的种类 | 第27页 |
| ·激素的配比 | 第27-28页 |
| ·苜蓿的遗传转化技术 | 第28页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第28页 |
| ·基因枪法转化 | 第28页 |
| ·电击法转化 | 第28页 |
| ·苜蓿遗传转化的研究进展 | 第28-30页 |
| ·转抗病虫害基因苜蓿的研究 | 第28-29页 |
| ·苜蓿的品质改良 | 第29页 |
| ·转抗逆基因苜蓿的研究 | 第29页 |
| ·转抗除草剂基因苜蓿的研究 | 第29-30页 |
| ·转基因苜蓿作为生物反应器的研究现状和应用前景 | 第30页 |
| 4 丹参生物技术的研究进展 | 第30-34页 |
| ·丹参的离体培养 | 第31-32页 |
| ·丹参的组织培养 | 第31页 |
| ·丹参的细胞培养 | 第31-32页 |
| ·人工诱导多倍体 | 第32页 |
| ·丹参基因工程的研究进展 | 第32-34页 |
| ·丹参次生代谢基因工程的研究 | 第32-33页 |
| ·丹参抗病基因工程的研究 | 第33页 |
| ·丹参抗逆基因工程的研究 | 第33页 |
| ·其它丹参功能基因的研究 | 第33-34页 |
| ·丹参作为植物反应器的研究 | 第34页 |
| ·丹参生物技术的存在的问题与展望 | 第34页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 苜蓿的遗传转化与转基因植株的检测 | 第36-56页 |
| 1 材料与方法 | 第36-45页 |
| ·材料 | 第36-39页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·菌株和质粒 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-38页 |
| ·PCR引物 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-45页 |
| ·农杆菌介导的苜蓿转化 | 第39页 |
| ·CTAB法提取苜蓿基因组DNA | 第39-40页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第40页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒DNA | 第40-41页 |
| ·Southern分析 | 第41-44页 |
| ·ELISA分析 | 第44-45页 |
| ·蛋白纤溶活性的测定 | 第45页 |
| ·TAME法测定转基因植株及蚓激酶肠溶胶囊中蚓激酶活性及标准曲线的绘制 | 第45页 |
| ·转基因植株再生的Kan抗性检测 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-54页 |
| ·苜蓿转基因植株的获得 | 第45-47页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第47-48页 |
| ·转基因植株的Southern检测 | 第48-50页 |
| ·转基因植株表达蛋白的ELISA检测 | 第50-51页 |
| ·蛋白纤溶活性的测定 | 第51页 |
| ·TAME法测定转基因植株及蚓激酶肠溶胶囊中蚓激酶活性及标准曲线的绘制 | 第51-53页 |
| ·转基因植株再生的Kan抗性检测 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 4 小结 | 第55-56页 |
| 第三章 丹参的遗传转化与转基因植株的检测 | 第56-67页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·植物材料 | 第56页 |
| ·菌株和质粒 | 第56页 |
| ·试剂 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| ·PCR引物 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·农杆菌介导的丹参遗传转化 | 第57页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第57页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第57页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒DNA | 第57页 |
| ·Southern分析 | 第57页 |
| ·ELISA分析 | 第57页 |
| ·蛋白纤溶活性的测定 | 第57-58页 |
| ·TAME法测定转基因植株中蚓激酶表达活性 | 第58页 |
| ·转基因植株再生的Kan抗性的检测 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-65页 |
| ·丹参转基因植株的获得 | 第58-59页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第59-60页 |
| ·转基因植株的Southern检测 | 第60-62页 |
| ·转基因植株表达蛋白的ELISA检测 | 第62-63页 |
| ·蛋白纤溶活性的测定 | 第63页 |
| ·TAME法测定转基因植株中蚓激酶活性 | 第63页 |
| ·转基因植株再生的Kan抗性检测 | 第63-65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 4 小结 | 第66-67页 |
| 第四章 结论 | 第67页 |
| 本研究的创新点 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简历 | 第77页 |