摘要 | 第1-6页 |
SUMMARY | 第6-8页 |
英文缩写词表 | 第8-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-40页 |
引言 | 第13-14页 |
1 抗菌肽的发现 | 第14页 |
2 抗菌肽的分类及结构特点 | 第14-19页 |
·抗菌肽的分类 | 第14-17页 |
·抗菌肽结构的一般特征 | 第17-19页 |
3 哺乳动物防御素的产生与分子构形特点 | 第19-22页 |
·防御素的产生与分布 | 第19-21页 |
·防御素的基本序列与结构 | 第21-22页 |
·防御素cDNA 的结构和空间构像 | 第22页 |
4 哺乳动物防御素的生物学活性 | 第22-30页 |
·防御素的生物学活性 | 第22-25页 |
·抗菌肽的作用机制 | 第25-27页 |
·影响抗菌肽的生物学活性的因素 | 第27-30页 |
5 防御素的基因表达与生物合成 | 第30-33页 |
·基因表达与调控 | 第30-31页 |
·生物合成 | 第31页 |
·抗菌肽的基因工程 | 第31-33页 |
6 抗菌肽的人工进化、分子设计与人工合成 | 第33-34页 |
7 哺乳动物防御素在医学与农牧业上的应用前景 | 第34-37页 |
·可成为合成抗生素的取代品 | 第34-35页 |
·在转基因动植物上的应用 | 第35页 |
·将在医学研究中发挥重要作用 | 第35-37页 |
8 国内抗菌肽研究开发现状 | 第37-38页 |
9 总结 | 第38-40页 |
第二部分 研究内容 | 第40-80页 |
第一章 奶牛子宫内膜抗菌肽BNBD5 基因的克隆 | 第40-53页 |
1 前言 | 第40-41页 |
2 材料与方法 | 第41-46页 |
·材料 | 第41页 |
·方法 | 第41-45页 |
·重组质粒的测序 | 第45-46页 |
·序列分析 | 第46页 |
3 结果 | 第46-50页 |
·BNBD5 基因PCR 扩增结果 | 第46页 |
·重组质粒的PCR 鉴定结果 | 第46页 |
·重组质粒的酶切及PCR 鉴定结果 | 第46页 |
·重组质粒的测序结果 | 第46-47页 |
·目的基因的基本性质分析 | 第47-48页 |
·序列分析结果 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
·奶牛子宫内膜抗菌肽BNBD5 的克隆 | 第50-51页 |
·奶牛子宫内膜抗菌肽BNBD5 的分析 | 第51页 |
5 小结 | 第51-53页 |
第二章 奶牛子宫内膜抗菌肽BNBD5 基因的原核表达 | 第53-68页 |
1 前言 | 第53页 |
2 材料与方法 | 第53-62页 |
·材料 | 第53-55页 |
·方法 | 第55-62页 |
3 结果 | 第62-65页 |
·BNBD5 基因片段的获得 | 第62页 |
·重组表达载体的构建及鉴定 | 第62-63页 |
·重组蛋白的诱导表达结果 | 第63页 |
·重组载体PET- BNBD5 表达蛋白的分离纯化及体外活性的检测 | 第63-65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
·影响外源基因在原核表达系统中表达的因素 | 第65页 |
·PET-BNBD5 在大肠杆菌中的表达 | 第65-66页 |
·超低分子量蛋白电泳结果影响因素 | 第66-67页 |
5 小结 | 第67-68页 |
第三章 奶牛子宫内膜抗菌肽的提取、分离纯化和鉴定 | 第68-79页 |
1 引言 | 第68-69页 |
2 材料和方法 | 第69-72页 |
·实验材料 | 第69-70页 |
·实验方法 | 第70-72页 |
3 结果 | 第72-76页 |
·子宫黏液酸溶性粗提物中抗菌多肽分析 | 第72-73页 |
·反相高效液相色谱分离及Tricine-SDS-PACE 分析 | 第73-74页 |
·收集各组分抗菌活性分析 | 第74-76页 |
4 讨论 | 第76-78页 |
·抗菌肽的分离纯化方法 | 第76-77页 |
·抗菌肽的抗菌机制 | 第77-78页 |
5 小结 | 第78-79页 |
第四章 结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-88页 |
附图 | 第88-90页 |
附图1 | 第88-89页 |
附图2 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
作者简介 | 第91-92页 |
导师简介 | 第92页 |