| 摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 蛋白质组学的概念及技术手段 | 第9-10页 |
| 2 蛋白质组学在精子蛋白研究中的应用 | 第10-14页 |
| ·在男性不育研究中的应用 | 第10-12页 |
| ·在精子免疫方面的研究 | 第12-13页 |
| ·在家畜繁殖上的应用 | 第13-14页 |
| 3 X、Y精子国内外研究现状 | 第14-16页 |
| ·X、Y精子基因表达的差异 | 第14-15页 |
| ·X、Y精子差异蛋白的研究进展 | 第15-16页 |
| 4 展望 | 第16-17页 |
| 5 研究意义 | 第17-19页 |
| 第二章 实验材料 | 第19-23页 |
| 1 样品来源 | 第19页 |
| 2 主要试剂和设备 | 第19-23页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·溶液及试剂配制 | 第20-23页 |
| 第三章 实验方法 | 第23-37页 |
| 1 技术路线 | 第23-24页 |
| 2 精子蛋白质的提取 | 第24-25页 |
| 3 蛋白质浓度的测定 | 第25-26页 |
| 4 精子蛋白质的双向电泳 | 第26-32页 |
| ·第一向电泳等电聚焦 | 第26-29页 |
| ·胶条的平衡 | 第29页 |
| ·第二相聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-31页 |
| ·染色方法 | 第31-32页 |
| 5 凝胶扫描 | 第32页 |
| 6 精子蛋白图像差异蛋白点的软件分析 | 第32-33页 |
| 7 蛋白质点的胶内酶切 | 第33-34页 |
| 8 质谱鉴定样品制备 | 第34页 |
| 9 数据库搜索 | 第34-37页 |
| 第四章 实验结果 | 第37-57页 |
| 1 双向电泳等电聚焦程序优化结果 | 第37-38页 |
| 2 不同染色方法比较结果 | 第38-39页 |
| 3 胶内酶切条件的优化结果 | 第39-46页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶存储时间对质谱鉴定的影响 | 第39-40页 |
| ·胰蛋白酶自切对质谱鉴定的影响 | 第40-41页 |
| ·使用含有聚乙二醇(PEG)的枪头和离心管对质谱鉴定的影响 | 第41页 |
| ·酶切时间对质谱鉴定的影响 | 第41-42页 |
| ·角蛋白对质谱峰图的影响 | 第42页 |
| ·优化胶内酶切操作细节后的理想峰图 | 第42-44页 |
| ·胶内酶切条件优化后的应用结果 | 第44-46页 |
| 4 牛X、Y精子细胞分析鉴定结果 | 第46-57页 |
| ·牛X、Y精子细胞2-DE图谱的建立及分析 | 第46-49页 |
| ·牛X、Y精子细胞差异蛋白质点的质谱鉴定结果 | 第49-57页 |
| 第五章 实验讨论与分析 | 第57-65页 |
| 1 双向电泳 | 第57-61页 |
| ·关于实验重复性的讨论 | 第57-58页 |
| ·样品制备 | 第58-59页 |
| ·蛋白定量 | 第59页 |
| ·等电聚焦 | 第59-60页 |
| ·染色方法 | 第60-61页 |
| 2 胶内酶切优化 | 第61-62页 |
| 3 牛X与Y精子差异蛋白分析 | 第62-65页 |
| 第六章 结论 | 第65-66页 |
| 第七章 科研工作中的进一步设想 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简历 | 第73-74页 |
| 导师简介 | 第74-76页 |