致谢 | 第1-6页 |
前言 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
本文主要缩略词表 | 第11-14页 |
1 绪论 | 第14-23页 |
·卤虫休眠生殖相关研究 | 第14-17页 |
·实验方法的选择 | 第17-18页 |
·展望 | 第18-20页 |
·参考文献 | 第20-23页 |
2 PCR抑制性作用的分析和运用 | 第23-39页 |
·引言 | 第23-25页 |
·材料和方法 | 第25-30页 |
·配制引物和接头 | 第25页 |
·PCR程序 | 第25-27页 |
·模型实验 | 第27页 |
·扩增基因组DNA的限制性片段 | 第27-28页 |
·从少量RNA中扩增cDNA | 第28-30页 |
·结果 | 第30-36页 |
·PCR抑制性作用的动态分析 | 第30-31页 |
·模型实验 | 第31-33页 |
·偏好性地扩增基因组DNA的限制性片段 | 第33-34页 |
·PS-effect在cDNA扩增中的应用 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
·参考文献 | 第38-39页 |
3 双链特异性DNA酶介导的均一化消减杂交 | 第39-50页 |
·引言 | 第39-40页 |
·材料和方法 | 第40-44页 |
·配制引物和接头 | 第40页 |
·Betaine、trehalose和DMSO对DNA的Tm的影响 | 第40-41页 |
·DSN酶的活性和热稳定性 | 第41-42页 |
·检测DNSH的效率 | 第42-44页 |
·结果 | 第44-48页 |
·甜菜碱、海藻糖和DMSO降低DNA的熔解温度 | 第44-45页 |
·Betaine、trehalose和DMSO可以和 DSN共用 | 第45-46页 |
·DNSH的消减效率 | 第46-48页 |
·参考文献 | 第48-50页 |
4 卤虫休眠卵生殖相关基因的分离分析 | 第50-80页 |
·引言 | 第50-51页 |
·材料和方法 | 第51-62页 |
·配制引物和接头 | 第51-52页 |
·卤虫的养殖和操作 | 第52-53页 |
·RNA抽提 | 第53页 |
·DSN介导的均一化消减杂交 | 第53-58页 |
·基因序列分析 | 第58-59页 |
·差异表达基因的鉴定 | 第59-62页 |
·结果 | 第62-72页 |
·孤雌生殖卤虫的卵生和卵胎生 | 第62-64页 |
·卤虫的卵母细胞cDNA的鉴定 | 第64-72页 |
·讨论 | 第72-77页 |
·几丁质结合蛋白 | 第72页 |
·主要易化扩散载体家族 | 第72-73页 |
·分子伴侣 | 第73页 |
·细胞周期调控蛋白 | 第73-74页 |
·转录因子 | 第74页 |
·转座元件 | 第74-77页 |
·参考文献 | 第77-80页 |
5 结论与展望 | 第80-81页 |
·结论 | 第80页 |
·展望 | 第80-81页 |
本研究的创新点 | 第81-82页 |
附录1 编码蛋白质的cDNA分类 | 第82-101页 |
附录2 常用试剂配制 | 第101-105页 |
作者简历 | 第105-106页 |